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文档简介
1、检验日期:一、依据:月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤( LST) 验证验收方案及食品安全国家 标准 食品微生物学检验 培养基和实际的质量要求 GB 4789.28-2013二、设备与材料1、培养箱(型号/编号):2、 培养基盐胰蛋白胨肉汤(LST 批号: 胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA)批号: 营养肉汤(NB批号:无菌生理盐水3、质控菌种大肠埃希菌 CMCC( B)44102 编号:粪肠球菌 ATCC 29212编号: 三、具体步骤1、培养基的制备 将LST肉汤分装试管,每管10 mL02、 工作菌悬液的制备将标准储备菌株接种到营养肉汤培养过夜,用无菌生理盐 水制备成10倍系列稀释的菌悬液。其中,大肠
2、埃希菌取10-7级及10-8级作为试验菌液;粪肠球菌取10-5级 及10-6级作试验菌液,两者均取10-7级及10-8级作计数菌液。3、接种(1) 在LST中接种10-7级及10-8级的大肠埃希菌,接种总量为1 mL同时接 种两个平行管,混匀。同时将1 mL菌悬液(与试管接种同一稀释度)倾注TSA平 板,接种两个平板,作接种量计数用。(2) 在LST中接种10-5级及10-6级的粪肠球菌,接种总量为1 mL同时接种 两个平行管,混匀。同时将1 mL菌悬液(10-7级及10-8级)倾注TSA平板,接 种两个平板,作接种量计数用。(3)培养条件:36C± 1C(4)培养时间:24h48h
3、四、结果解释用目测的浊度值(如02)评估培养基:0表示无混浊;1表示很轻微的混浊; 2表示严重的混浊。并记录小导管收集气体的体积比。目标菌即接种大肠埃希菌管的浊度值应为 2,产气应为1/3或以上;非目标菌即接种粪肠球菌的浊度值应为 0或1,无产气现象。五、结果记录1、实际加菌量10-510-610-710-8大肠埃布菌TSA粪肠球菌TSA加菌量2、浊度及产气试验10-510-610-710-8大肠埃布困1大肠埃希菌2粪肠球菌1粪肠球菌2六、结论1、 本品按月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)验证验收方案及食品安全国家标 准 食品微生物学检验 培养基和实际的质量要求 GB 4789.28-2013
4、验收。 结果:符合规定 不符合规定。2、 能口 不能 达到食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和 实际的质量要求 GB 4789.28-2013的要求,满足实验室的日常检验的需要。3、 月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST) 适用 不适用 于下述标准的检验(1)GB 4789.3-2010(2)GB 4789.3-2003(3)GB 4789.38-2012(4)GB 4789.39-2013检验日期:七、依据:月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)验证验收方案及食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和实际的质量要求 GB 4789.28-2013八、设备与材料4、培养箱(型号/编号):5、
5、 培养基盐胰蛋白胨肉汤(LST 批号: 胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA)批号: 营养肉汤(NB批号:无菌生理盐水6 质控菌种 大肠埃希菌 CMCC( B)44102 编号:JZ002-C19粪肠球菌 ATCC 29212编号:JZ026-C1九、具体步骤4、培养基的制备 将LST肉汤分装试管,每管10 mLo5、 工作菌悬液的制备 将标准储备菌株接种到营养肉汤培养过夜,用无菌生理盐 水制备成10倍系列稀释的菌悬液。其中,大肠埃希菌取10-7级及10-8级作为试验菌液;粪肠球菌取10-5级 及10-6级作试验菌液,两者均取10-7级及10-8级作计数菌液。6接种(5)在LST中接种10-7级及1
6、0-8级的大肠埃希菌,接种总量为1 mL同时接 种两个平行管,混匀。同时将1 mL菌悬液(与试管接种同一稀释度)倾注TSA平 板,接种两个平板,作接种量计数用。(6)在LST中接种10-5级及10-6级的粪肠球菌,接种总量为1 mL同时接种 两个平行管,混匀。同时将1 mL菌悬液(10-7级及10-8级)倾注TSA平板,接 种两个平板,作接种量计数用。(7)培养条件:36C± 1C(8)培养时间:24h48h十、结果解释用目测的浊度值(如02)评估培养基:0表示无混浊;1表示很轻微的混浊; 2表示严重的混浊。并记录小导管收集气体的体积比。目标菌即接种大肠埃希菌管的浊度值应为2,产气应
7、为1/3或以上;非目标菌即接种粪肠球菌的浊度值应为 0或1,无产气现象。十一、结果记录1、实际加菌量10-510-610-710-8大肠埃布菌TSA687187746粪肠球菌TSA3028.533.5274加菌量32.8 X 10712、浊度及产气试验10-510-610-710-8大肠埃布困1浊度2产气2/3浊度2产气1/3大肠埃希菌2浊度2产气2/3浊度2产气1/3粪肠球菌1浊度0 无产气浊度0 无产气粪肠球菌2浊度0 无产气浊度0 无产气十二、结论4、 本品按月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST)验证验收方案及食品安全国家标 准 食品微生物学检验 培养基和实际的质量要求 GB 4789.28-2013验收。 结果:符合规定 不符合规定。5、 能口 不能 达到食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和 实际的质量要求 GB 4789.28-2013的要求,满足实
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