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文档简介

1、二、实验原理二、实验原理 抑制剂和底物结构相似，可与底物竞争结合酶的活性中心，阻碍酶- -底物复合物形成抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力，以及抑制剂与底物浓度的相对比例（I/SI/S）第1页/共9页HOOCCH=CHCOOHFADFADH2甲烯白MBHMBH2 2 （无色）甲烯蓝MB （蓝色）在在无氧条件无氧条件下以甲烯蓝褪色时间判断琥珀下以甲烯蓝褪色时间判断琥珀酸脱氢酶活性高低，观察竞争性抑制作用酸脱氢酶活性高低，观察竞争性抑制作用 丙二酸丙二酸HOOCHOOCCHCH2 2COOHCOOH琥珀酸脱氢酶琥珀酸脱氢酶第2页/共9页三、实验步骤三、实验步骤. . 酶促反应及竞争性抑制作用 取

2、试管6 6支，按表所列步骤操作。 加液体石蜡以隔绝空气3737水浴保温 随时观察并记录各管褪色时间！第3页/共9页3. 3. 实验记录和结果分析 酶提取液中有没有琥珀酸脱氢酶活性？各管的褪色情况有何区别？为什么？丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制作用的类型及其特点是什么？本实验中5 5号、6 6号试管的作用是什么？第4页/共9页四、结果分析1 1、酶提取液中有没有琥珀酸脱氢酶活性？2 2、各管的褪色情况有何区别？为什么？3 3、丙二酸对琥珀酸脱氢酶抑制作用的类型 及其特点是什么？如何证明的？4 4、本实验中5 5号、6 6号试管的作用是什么？第5页/共9页五、注意事项五、注意事项加试剂时加试剂时看清底物与抑制剂的浓度看清底物与抑制剂的浓度。注意注意随时观察记录随时观察记录各管褪色时间。各管褪色时间。3737水浴保温过程中，水浴保温过程中，不能振摇试管不能振摇试管，避免甲烯白重新氧化变蓝。避免甲烯白重新氧化变蓝。实验结束后一定实验结束后一定洗净试管内的液体石蜡洗净试管内的液体石蜡。

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