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文档简介
1、实验十实验十 蛋白质的化学性质蛋白质的化学性质【实验目的】【实验目的】 1掌握蛋白质的重要化学性质。掌握蛋白质的重要化学性质。 2了解核蛋白的组成。了解核蛋白的组成。【实验操作】【实验操作】一蛋白质的盐析一蛋白质的盐析 取取1.5mL蛋白质溶液,参与等体积饱和硫蛋白质溶液,参与等体积饱和硫酸铵溶液浓度为酸铵溶液浓度为50%饱和,悄然摇动饱和,悄然摇动试管,使溶液混合均匀后,静置数分钟,试管,使溶液混合均匀后,静置数分钟,球蛋白即析出呈絮状沉淀如无沉淀可再球蛋白即析出呈絮状沉淀如无沉淀可再加少许饱和硫酸铵,用滤纸滤取上清液,加少许饱和硫酸铵,用滤纸滤取上清液,滤液中再参与固体硫酸铵粉末至不再溶解
2、,滤液中再参与固体硫酸铵粉末至不再溶解,析出的即为清蛋白,再加水稀释,察看沉析出的即为清蛋白,再加水稀释,察看沉淀能否溶解。淀能否溶解。二蛋白质的沉淀二蛋白质的沉淀 1用重金属盐沉淀蛋白质用重金属盐沉淀蛋白质 取三支试管,各加取三支试管,各加1mL蛋白质溶液,蛋白质溶液,分别各加分别各加3滴滴6%醋酸铅溶液、醋酸铅溶液、3滴滴2%硫硫酸铜溶液和酸铜溶液和3滴滴1%硝酸银溶液,察看蛋硝酸银溶液,察看蛋白质沉淀的析出。白质沉淀的析出。 2 2用有机酸沉淀蛋白质用有机酸沉淀蛋白质 取二支试管,各加取二支试管,各加1mL1mL蛋白质溶液,并加蛋白质溶液,并加5%5%醋酸溶液使之呈酸性该沉淀反响最好在弱
3、醋酸溶液使之呈酸性该沉淀反响最好在弱酸中进展。然后分别滴加饱和苦味酸、饱鞣酸中进展。然后分别滴加饱和苦味酸、饱鞣酸溶液,直至沉淀产生为止。酸溶液,直至沉淀产生为止。 用用10%10%三氯醋酸溶液、三氯醋酸溶液、3%3%磺柳酸溶液进展磺柳酸溶液进展类似实验用量同前,察看景象。类似实验用量同前,察看景象。三蛋白质的颜色反响三蛋白质的颜色反响 1 1黄蛋白反响黄蛋白反响 于试管中,加于试管中,加1mL1mL蛋白质溶液和蛋白质溶液和1010滴浓滴浓硝酸溶液,直火加热煮沸,察看溶液和硝酸溶液,直火加热煮沸,察看溶液和沉淀颜色。冷却后,再参与沉淀颜色。冷却后,再参与2020滴滴10%10%氢氯氢氯化钠溶液
4、,察看颜色变化。化钠溶液,察看颜色变化。2 2与茚三酮的反响与茚三酮的反响 在二支试管中,分别加在二支试管中,分别加1%1%赖氨酸溶赖氨酸溶液和液和1mL1mL蛋白质溶液,分别加蛋白质溶液,分别加2 2滴茚三酮滴茚三酮溶液,加热至沸,察看有什么景象?溶液,加热至沸,察看有什么景象? 3 3与硝酸汞试剂作用与硝酸汞试剂作用米伦反响米伦反响 在二支试管中,分别加在二支试管中,分别加1mL 0.5%1mL 0.5%苯酚苯酚溶液和溶液和1mL1mL蛋白质溶液,再各加蛋白质溶液,再各加0.5mL0.5mL米米伦试剂不可太多,苯酚溶液出现玫伦试剂不可太多,苯酚溶液出现玫瑰红色,而蛋白质溶液加热后出现沉淀,
5、瑰红色,而蛋白质溶液加热后出现沉淀,加热凝固的蛋白质呈砖红色,有时溶液加热凝固的蛋白质呈砖红色,有时溶液也呈红色。也呈红色。 4 4蛋白质的双缩脲反响蛋白质的双缩脲反响(1) (1) 双缩脲的生成双缩脲的生成 于枯燥试管中,加于枯燥试管中,加0.2g0.2g0.3g0.3g尿素,尿素,微火加热,尿素熔化并构成双缩脲,放微火加热,尿素熔化并构成双缩脲,放出的氨可用红色石蕊试纸实验。试管内出的氨可用红色石蕊试纸实验。试管内有白色固体出现后,停顿加热。有白色固体出现后,停顿加热。(2) (2) 双缩脲反响双缩脲反响 上述产物冷却后,加上述产物冷却后,加1mL10%1mL10%氢氧化钠溶氢氧化钠溶液,
6、摇匀,再加液,摇匀,再加2 2滴滴2%2%硫酸酮溶液,混匀,硫酸酮溶液,混匀,察看有无紫色出现。察看有无紫色出现。 于试管中,加于试管中,加1mL1mL清蛋白溶液和清蛋白溶液和1mL10%1mL10%氢氧化铜溶液,再加氢氧化铜溶液,再加1 1滴滴2 2滴滴2%2%硫酸铜溶硫酸铜溶液共热,由于蛋白质与硫酸铜生成络合物液共热,由于蛋白质与硫酸铜生成络合物而呈紫色。取而呈紫色。取1%1%赖氨酸溶液作对照,察看赖氨酸溶液作对照,察看颜色变化。颜色变化。(四四) 核蛋白组成的鉴定核蛋白组成的鉴定1 1核蛋白的水解核蛋白的水解 取取20mL20mL酵母核蛋白混悬液于离心管酵母核蛋白混悬液于离心管中离心分别
7、,弃去清液,将沉淀转入小中离心分别,弃去清液,将沉淀转入小烧杯中,加烧杯中,加15mL 5%15mL 5%硫酸,盖上外表皿在硫酸,盖上外表皿在水浴上煮沸约水浴上煮沸约1h1h煮沸过程中坚持原有煮沸过程中坚持原有体积,水解毕,离心分别,取上层清体积,水解毕,离心分别,取上层清液作以下检查。液作以下检查。 2 2核糖的鉴定核糖的鉴定 于试管中,加于试管中,加1mL 20%1mL 20%间苯二酚盐酸间苯二酚盐酸溶液,以小火加热至沸,迅速参与溶液,以小火加热至沸,迅速参与5 5滴水滴水解液,呈现红色,如红色不显可再稍解液,呈现红色,如红色不显可再稍加热。加热。 3 3磷酸的鉴定磷酸的鉴定 取取1010滴水解液,置于试管中,加滴水解液,置于试管中,加5 5滴滴7%7%钼酸铵溶液和钼酸铵溶液和2 2滴浓硝酸溶液,小心于滴浓硝酸溶液,小心于火上加热,即有黄色沉淀生成。火上加热,即有黄色沉淀生成。 4 4嘌呤与嘧啶的鉴定嘌呤与嘧啶的鉴定 取约取约4mL4mL水解液,置于小烧杯中,参水解液,置于小烧杯中,参与氨水至微碱性,过滤,在滤液中加与氨水至微碱性,过滤,在滤液中加1mL 1mL 5%5%硝酸银铵溶液,静置片刻,即有絮状硝酸银铵溶液,静置片刻,即有絮状的嘌呤或嘧啶银盐沉淀生成
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