zhongyao制剂学

1、脂质体研究进展摘要：对国内有关脂质体的研究进展进行了检索、分析、整理和归纳，综述了脂质体的特性、评价方法以及应用情况。关键词：脂质体；特性；评价方法；应用情况 脂质体是一种新型的药物载体, 源于Bangham等对磷脂悬浮于水的研究, 60年代末被用作药物载体。脂质体是由磷脂和其他两亲性物质分散于水中,由一层或多层同心的脂质体双分子膜包封而成的超微型球状药物载体制剂。其结构类似于生物膜,可包封水溶性和脂溶性药物。脂质体作为靶向给药系统中第4代给药体系1, 具有无可比拟的优越性。一方面可以靶向性延释药物2,提高药效,降低体内消除速度;另一方面可以降低药物体内毒性,减轻变态反应和免疫反应等优点。随着

2、中药现代化进程的不断推进,脂质体已经应用于中药制剂研究4。由于中药化学成分的复杂性, 较之西药,中药脂质体的研究要困难得多。目前,尽管中药脂质体的研究和应用还在初级阶段,但是对中药脂质体的研究和应用极大地推动了中药制剂技术的发展与改革。现将近年来脂质体的研究和应用综述如下。1.脂质体的特性 脂质体所具有的功能在于其本身的特性：磷脂分子、双层分子膜结构和脂质体的内容物。 (1)、磷脂分子 脂质体的由来即源于磷脂，而磷脂又是构成人体细胞的重要成分，尤其是细胞膜的结构，使脂质体与细胞膜具有很强的亲和力。 (2)、双层分子膜结构 脂质体的功能源于磷脂的双分子膜结构。由于脂质体与细胞

3、膜结构相似，类脂双分子膜与细胞膜相互作用，双分子膜和细胞膜溶合，活性成分被释放，吸收或完整的脂质体被细胞吞噬，然而进入到细胞质中，再吸收，由此利用脂质体便可以达到下面的功能。 渗透性：透过双分子膜，促进有效成分的渗透。由于脂质体能与细胞膜相互溶合，因此可以把不易被细胞吸收的物质包封进入脂质体，透过脂质体这一载体进入细胞内部，以此促进细胞对活性物质的吸收。 缓释性：脂质体进入皮肤深层后，由于磷脂双分子膜的包封，脂质体内的物质不可能一下子释放出来，只能缓慢地渗透出来。由于机体组织吸收快慢能自动调节，因此可以延长细胞吸收活性成分的时间，并提高吸收率。如果包封的是保湿剂，则可使皮肤长时间保持滋润。 稳

4、定性：由于包封作用，提高了某些被包封成分的稳定性，以免使这些物质在进入细胞之前被氧化或自行分解，从而提高这些物质的利用率。使用脂质体作为载体可以减少被包封物质对皮肤的刺激性。 导入性：脂质体进入人体内具有一定的靶向性，如脂质体进入人体内有趋向肝脏的特点，因此脂质体药物有重要的意义。 （3）脂质体的物理性质与介质温度有密切关系，当温度升高时脂质体双分子层中的疏水链可从有序排列变为无序排列，从而引起一系列变化。如膜厚度减小，流动性增加，产生由胶晶态（固态）向液晶态的转变等。转变温度称为相变温度，它取决于磷脂的种类。如脂质体膜由两种以上磷脂组成，它们各有特定的相变温度，在一定条件下它们可以同时存在不

5、同的相。在相变温度时，脂质体膜的流动性增加，被包裹的药物具有最大的释放速度。因此膜的流动性直接影响脂质体的药物释放和稳定性。【3】2.脂质体的质量评价方法（1）包封率的测定 对处于液态介质中的脂质体制剂，可通过适当的方法分离脂质体，分别测定介质和脂质体中的药量，按下式计算包封率：包封率=脂质体中的药量(介质中的药量+脂质体中的药量)×100分离脂质体可以采用柱色谱法、离心法或透析法等。离心法可加速脂质体的沉降，粒径愈小的脂质体，需要的离心力愈大，甚至需要冷冻超速离心机。透析法是无需设备的最简便的分离方法，将脂质体试液盛入适当的透析袋内，外面为基本等渗的介质(避免因渗透压差引起脂质体包

6、封率变化)，将更换的介质用于测定未包入的药物量。（2）渗漏率的测定 脂质体不稳定的主要表现为渗漏。渗漏率表示脂质体在液态介质中贮存期间包封率的变化，可由公式计算。（3）药物体内分布的测定 通常可以小鼠为受试对象，将脂质体静注给药，测定不同时间血药浓度，并定时处死剖取脏器组织，捣碎分离取样，以同剂量药物作对照，比较各组织的滞留量，进行动力学处理，以评价脂质体在动物体内的分布。脂质体以静脉给药时，能选择地集中于单核。巨噬细胞系统，7089集中于肝、脾。如卡氮芥脂质体注射液在小鼠尾静脉注射后卡氮芥主要被肝、脾摄取，40min在肝中达峰值，8h仍保持较高的滞留量，较同一时间的卡氮芥水溶液摄取量提高l0

7、倍。脾对卡氮芥摄取量较肝缓慢而代谢快。又如用放线菌素D脂质体对小鼠静注3h后，肝、脾和肺中药物浓度分别为游离放线菌素D的125、51和14倍；用甲氨蝶呤脂质体对猴静注后，在肝脾中分布的浓度也比甲氨蝶呤静注高得多。（4）载药量 脂质体内含药物的质量分数称为载药量，如用包封药物溶液体积的相对量表示，可称为体积包封率，单位为lmol类脂。应用不同制备工艺，制得脂质体的载药量或体积包封率不相同。载药量影响的因素有：类脂质膜材料的投料比，当增加胆固醇含量时可提高水溶性药物的载药量；脂质体电荷的影响，当相同电荷的药物包封于脂质体双层膜中，同电相斥致使双层膜之间的距离增大，可包封更多亲水性药物；脂质体粒径大

8、小的影响，当类脂质的量不变，类脂质双分子层的空间体积愈大，所载药物量就愈多；药物溶解度的影响，极性药物在水中溶解度愈大，在脂质体水层中的浓度愈高，水层空间愈大能包封极性药物愈多，室脂质体的体积包封率远比单室的大，非极性药物的脂溶性愈大，体积包封率愈高，水溶性与脂溶性均小的体积包封率也低。此外，脂质体的包封率也可用于评价其制备方法。【4】3.脂质体的应用情况（1）脂质体在抗癌药物中的应用近年来,将脂质体作为抗癌药物载体的报道经常见到。脂质体作为抗癌药物载体具有能增加与癌细胞的亲和力,克服耐药性,增加药物被癌细胞的摄取量,提高疗效,降低毒副作用的特点。例如方莹等5研究了阿霉素脂质体,用超声波脂质体

9、制备法建立一种阿霉素脂质体的制备方法,并经实验证明此法制备的脂质体包封率高,重现性好,简便易行,所制得的阿霉素脂质体体外对人肝癌细胞系n9101及人低分化胃癌MGC803细胞系具有高度的杀伤活性,且作用比单纯阿霉素更持久。陈强等6比较了注射用紫杉醇脂质体与传统紫杉醇注射液(紫烷素)治疗乳腺癌和非小细胞肺癌疗效及不良反应的差别,结果发现,紫杉醇脂质体联合阿霉素或顺铂治疗晚期乳腺癌和晚期非小细胞肺癌效果良好,与紫烷素疗效相当,但过敏反应发生率明显低于紫烷素。谭继宏等7通过基因重组构建生存素基因突变体(pcD-NA3survivinmutant,Cys84Ala)质粒,并以脂质体转染的方法将质粒DN

10、A转入胃癌细胞株,观察到突变体Cys84Ala能诱导胃癌细胞凋亡和增加胃癌细胞对化疗药物的敏感性。这项研究表明,脂质体在抗癌方面的应用不再仅仅局限于药物载体,同样有许多其他有效的途径。（2）脂质体在抗菌药物中的应用利用脂质体与生物细胞膜亲和力强的特性,将抗生素包裹在脂质体内可提高抗菌效果。扈本荃等8制备荧光素钠阳离子脂质体,测定了该脂质体的包封率和体外释药规律,并通过流式细胞术(FASC)检测了该脂质体向金黄色葡萄球菌内转运的效率。结果发现,制备的阳离子脂质体能够有效地向革兰阳性细菌内转运,可作为向细菌内递药的良好载体。陈伟等9采用薄膜分散法结合冷冻溶融法制备利福平脂质体(Lip-RFP),在

11、脂质体水相层中包入不同单糖作为肺组织的导向分子,采用微生物测定法,通过测定小鼠肺组织中RFP含量确定了5%D-甘露糖的利福平脂质体(Lip-RFP-Man)呈现最佳肺靶向作用,而且Lip-RFP与游离药物相比,对血液中细菌的清除能力明显增强,且维持时间延长。（3）脂质体作为免疫激活剂的应用易学瑞等10利用DCChol制备粒径为50300nm的正电荷脂质体,作为乙肝疫苗(HBsAg)的佐剂,免疫BALB/c小鼠后进行血清中特异性抗体IgGl及IgG2a、脾细胞产生细胞因子的检测。结果该脂质体佐剂所诱导的抗体亚类以IgG2a为主,脾细胞产生的IL-2、IL-5、IFN-分别比铝佐剂组高16

12、3;5倍、10倍、2倍。表明该脂质体佐剂可以诱导很强的细胞免疫反应,是一种能促进Th1和Th2均衡应答的佐剂。另外,脂质体本身也是一种有效的免疫增强剂。各种脂质体包括空白脂质体进入体内后,都将被巨噬细胞吞噬,使巨噬细胞活性增强。而活化的巨噬细胞,如肝中的巨噬细胞对肿瘤细胞的转移有细胞毒作用,将游离状态下不能活化巨噬细胞的巨噬细胞活化因子(MAF)或合成的胞壁酰二肽(MDP)包封成脂质体注入机体,即可使巨噬细胞的摄取量明显增加,并能有效地活化巨噬细胞,抑制肿瘤的生长和转移。（4）脂质体作为肝靶向制剂的载体近年来,国内外药物肝靶向传输系统的研究已成为热点之一。脂质体作为载体的研究也有报道,侯新朴等

13、11用肝实质细胞上无唾液酸糖蛋白受体(ASGPR)的配体无唾液酸胎球蛋白(AF)修饰脂质体得AFSSL。将ASGPR重组于脂质双分子膜(BLM)得ASGPRBLM,与AFSSL相互作用,监测BLM膜电参数变化,发现ASGPRBLM稳定时间随AFSSL加入量增加而缩短,表现出明显的量效关系,证明在ASGPRBLM与AFSSL之间有特异识别反应;用3H标记方法测提体外AFSSL与肝实质细胞结合率明显高于无AF修饰脂质体SSL(在第10和90min时P<0·05,在第30和60min时P<0·01);另将AFSSL包抗癌药阿霉素(ADM),考察其抗癌药效,结果抗肝癌疗

14、效,AFSSL组大鼠存活期显著长于无AF修饰组,且对心、肾、肺的毒副作用小。这说明配体修饰脂质体达到主动靶向对应受体细胞是可行的。4.结语脂质体作为药物载体，已显示了它所具有的优越性，它有可能把药物运载至靶组织或细胞的分子靶部位，提高原有药物疗效，降低副作用。但目前,中药脂质体的研究还有很多困难。如: 中药成分往往上百成千,复方的治疗疾病物质基础还不太清楚, 中药在体内的作用机制还不明确; 中药体现的是整体性, 如何体现化学成分的共同作用,是脂质体必须要面对的问题; 因为中药中每种化学成分含量都及其低, 从而导致中药脂质体载药量较小,往往达不到治疗疾病的药物浓度; 药物的载药量低和稳定性差;

15、中药脂质体刚刚起步, 研究还不够深入, 自身理论还不够成熟,走向工业化还需要一个阶段。 随着中药现代化进程的不断深入, 高分子材料的不断涌现, 新技术的不断进步, 学科之间的不断交叉渗透, 中药脂质体必将得到深入的研究和快速的发展,从而促进中药剂型的发展。参考文献1李际强,符林春. 中药脂质体口服制剂的研究进展J. 中国中医药信息杂志,2001 , 8( 6):21- 23 .2张冬青,程怡. 脂质体的研究概况J. 中药新药与临床药理, 2002 , 13( 2): 125- 128 .3医学教育网.相变温度（药剂学）。2010-5-44余江南, 徐希明, 朱源,等. 水飞蓟宾脂质体包封率及其水飞蓟宾含量测定J. 中国中杂志, 2003 , 28( 11): 1027- 1030 .5方莹,张长弓,李东辉,等·阿霉素脂质体的制备及其活性的初步研究·厦门大学学报(自科学版),2003,42(3):4014046陈强,张其忠,刘健,等·紫杉醇脂质体与传统紫杉醇治疗乳腺癌和非小细胞肺癌的随机对照研究·中华肿瘤杂志,2003,25(2):1901927谭继宏,涂水平,邹冰,等·生存素基因突变体诱导胃癌细胞凋亡的实验研究·中华消化志,2003,23(4):1992028扈本荃,罗晓星,廉江平,等·荧光素钠阳离子脂质