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文档简介

1、双光子和光谱扫描在激光共聚焦显微镜上的运用阅历浙江大学生命科学学院仪器与技术效力平台机型：Zeiss LSM710 nlo32通道阵列PMT690-1080nm可调谐飞秒激光器激光共聚焦显微镜的非常规运用 利用双光子分辨目的荧光和自发荧光 利用光谱扫描鉴定微弱荧光信号的真假 转基因资料快速挑选 嘈杂背景下的细胞计数 非线性效应 光刻和深度扫描 模拟近红外光源GFP标志水稻根中自发荧光的去除单光子激发，水稻根带有剧烈的黄绿色单光子激发，水稻根带有剧烈的黄绿色自发荧光自发荧光双光子激发，自发荧光为蓝色双光子激发，自发荧光为蓝色ex 488nm，Lambda modeex 820nm , lambd

2、a modeGFP标志水稻根中自发荧光的去除双光子激发下GFP荧光与自发荧光的波长分别，820nm激发时，仅采集493-542nm区间的信号以保证特异性Ex 820nm, channel mode 微弱或自发荧光存在下的信号鉴定Promoter:GFP载体注射烟草叶片lambda mode成像转GFP弱表达转GFP不表达镜下目视特征：绿色信号被剧烈红光掩盖GFP和RFP弱时无法分辨Lambda合成图特征：GFP：绿色偏蓝自发荧光：绿色偏黄叶绿素荧光：红色光谱特征：GFP：主发射峰位于约518nm副发射峰位于约540nm后者高度约为前者的一半呈台阶形自发荧光：在560nm左右对称分布叶绿素荧光：

3、625nm以上剧烈信号GFP叶绿素叶绿素转基因资料的快速挑选原那么：密集预陈列待测样技巧：lambda扫描 颜色判别 荧光峰形检查GFP蓝绿特征色GFP台阶形特征峰518540土壤浸出液中外源GFP标志细菌浓度分析目的：了解土壤中的不同细菌间的竞争关系方法：等比掺入外源GFP标志菌体，设置多种环境条件问题：土壤标本背景嘈杂，往往带有各种带荧光的杂质颗粒处理：1 固定样品体积2 lambda成像检测GFP特异荧光3 最大化pinhole 非线性效应：碳纳米管498518421原理：某些资料在双光子激发，会发射波长为激发光一半的荧光利用不同波长的双光子激光照射能够含碳纳米管的靶向药物，lambda扫描发现荧光信号呈现严厉的倍频关系Ex 850Ex 1000Ex 1040光刻和深度扫描一种人工合成的透明有机晶体，在一定强度的近紫外光下会发生部分变性，从而具有双光子效应在2个不同Z坐标下做bleach， ex 458nm ex 900nm 做z-stack，显示多层光刻效果，信号随深度添加

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