霉菌的形态观察

1、霉菌的形态观察一、【实验目的】1、学 习并掌握观察霉菌形态的根本方法2、了解四类常见霉菌曲霉、毛霉、青霉、根霉的根本形态特征二、【实验原理】1、霉菌 霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝 生长到一定 阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体 尤其是繁殖菌丝及 孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依 据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细 菌和放线菌粗得多 约 310卩 m , 常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍，因此， 用低倍显微镜即可观察。2、PDA培养基PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato DextroseAgar Medium, 依次

2、对应马铃薯、葡萄糖、琼 脂的英文。 它是一种常用的培养 基，宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等 真菌。3、载 玻片培养观察法小室培养法观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，本次实验采用载玻片培养观察法小室培养法。载玻片培养观察法：用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，接种后盖上盖玻片培养，霉菌记载载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后，将载玻片上的培养物置显微镜下观 察。这种方法既可以保持霉菌自然 生长状态，还便于观察不同发育期培 养物。三、【实验器材】1、 菌种：曲霉 Aspergillus sp. ，青霉，根霉 Rhi

3、zopus sp. ,毛霉 Mucor sp. ，培养 7d 的马铃薯琼脂平板培养物2、培养基：马铃薯培养基简称 PDA 配方见附表3、仪器或其他用具：平皿，载玻片，盖玻片，无菌吸管， U 型玻棒，解剖刀，镊子， 50 沱醇， 20%甘油，显微镜，接种环 , 酒精灯四、【操作步骤】1.配置PDA培养基:再放上U形玻棒,其上放一洁净的载玻片，然后将二个盖玻片分别斜立在载玻片的两端,盖上皿盖，把数套根据需要而定如此装置的培养皿叠起，包扎好，于110CX菌20-30分钟，烘干后备用按配方配置马铃薯培养基 200ml,其做法是先将马铃薯洗净去皮,再 切成小块， 加水煮烂煮沸2030分钟，能被玻璃棒戳破

4、即马铃薯块可，先用一层纱布过滤，再用六层纱布过滤，取滤液，加热，参加葡萄糖补水至200ml。将其分为两份各100ml，取其中一份参加琼 脂,加热搅拌至琼脂融化， 稍冷却均匀倒入20只试管中每只约5ml,将剩余100ml与等量琼脂倒入100ml 锥形瓶中。加塞，包扎，121C灭菌20分钟左右后取出冷却备用。2、载玻片培养观察法小室培养法1 、培养小室的灭菌：如图1,将略小于培养皿底内径的滤纸放入皿内,图1载玻片培养示意图1平皿 2 U型玻璃棒 3载玻片 4培养物 5盖玻片 6滤纸2、琼脂薄片的制作：取已灭菌的马铃薯琼脂培养基各 67ml注入另两个灭菌平皿中，使 之凝固成 薄层。通过无菌操作，用无

5、菌刀片将其切成 1cmx1cm的琼脂块，用已用酒精灭过菌 的镊子轻轻夹起琼脂块放在已灭菌的培养皿内的载 玻片上，每片上放置2块3、接种:通过无菌操作，用接种环从斜面培养物上挑取肉眼可见的少量霉菌抱子，轻轻点在琼脂块的边缘上，用无菌镊子夹着立在载玻片旁的盖玻片盖在琼脂块上，再盖上皿盖4、培养：通过无菌操作，在培养小室中的圆滤纸上加2? 3ml灭菌的20 %的甘油用于保持平皿内的湿度，盖上皿盖，28 C正置培养一周。5、镜检：必要时根据需要可以在不同的培养时间内取出载玻片置低倍镜下观察, 换高倍镜。五、【本卷须知】载玻片培养观察中，注意无菌操作，接种量要少，同时尽可能将分散的抱子接种在琼脂块边缘上

6、，否那么培养后菌丝过于稠密影响观察曲霉六、【实验结果及绘图】緒时W咖?；.耐;葩，詡嘯乍麴咖四种霉菌形态特征图青霉菌种曲霉根霉毛霉冃霉营养菌丝具菌丝无隔、菌丝无隔、菌丝有横有分隔；气多核、分枝多核、分枝隔，分生抱生菌丝的一状，有匍匐状，无假根子梗亦有局部形成长菌丝和假或匍匐菌横隔，光滑而粗糙的分根。在假根丝。菌丝休或粗糙。基生抱子梗，的上方直立上直接生出部无足细顶端膨大成地生长出一单生、总状胞，顶端不球状顶囊，至数根孢囊分枝或假轴形成膨大外表辐射出梗，其顶端状分枝的抱的顶囊，其一层或两层膨大成球形囊梗。各分分生抱子形态特征小梗，小梗抱子囊。囊枝顶端着生梗经过多上着生成串的基部有囊球形抱子次分枝，产的球形分生 抱子。分生 抱子梗生于 足细胞上， 并通过足细 胞与营养菌 丝相连。托，中间有 球形或半球 形囊轴。囊 内产大量抱 囊抱子，有 性生殖时由 不同性别的菌 丝或匍匐菌丝 上生出配子囊， 配子囊双双异 宗配合形成一接合抱 子。囊，无囊托。生几轮对 称或不对 称的小梗， 形如扫帚， 称为帚状 休。小梗顶 端有抱子。四种霉菌形态特征表【摄影】根霉菌10x10曲霉10x10【绘图】【附表】马铃薯培养