医学检验本科班分子生物学检验技术试卷

1、医学检验本班分子生物学检验技术试卷选择题（在备选答案中选择一个最佳答案,每题 2分,共 20分）:1. 在核酸提取时 , 常需要使用氯化钠 , 醋酸钠等盐溶液 , 真正的目的是（ ）A.中和核酸的负离子，使其易于沉淀 B. 调节PH值C. 保持核算的完整性D.提高核酸的浓度E. 无特定目的2. 在一个DNA分子中,如G所占摩尔比为17.2%,则A所占摩尔比为（）A. 82.8% B. 32.8% C. 17.2% D. 65.6% E.无法计算3. 下列那项不是扩增反应所必需的 ?（）A. 引物和模板 B. dNTP C. Mg+ D .DNase E.缓冲液4. 下列那项是分子生物学技术形成

2、的理论基础 ?（）A. 基因结构与功能的关系B.基因结构变异与疾病的关系C. 病原微生物的基因结构特征D.基因的表达 . 调控与疾病的关系A. DNAB. RNAA. DNAB. RNAE. 以上皆是5. 分子生物学检验技术主要包括那些技术 ?（）A. 核酸分子杂交技术B. DNA测序技术C. PCR 技术D. DNA重组技术E. 以上全是6. 下列哪项检测需应用分子生物学检验技术 ?（）A. 肝功能检测B.乙肝两对半检测C.乙肝病毒DNA（HBV-DNA检测D. 肿瘤细胞培养E. 病原微生物培养7. 在核酸的分离纯化过程中 , 为保证其一级结构的完整性 , 应采取（ ）A. 尽量简化分离步骤

3、 , 缩短提取时间 B. 适当延长提取时间C.在37摄氏度条件下进行D.加入Mg+,Ca+等二价金属离子E. 以上全是有一核酸样品 , 测得 A260/A280=2.0, 请问该样品属于哪类核酸样品 ?（）A. DNAB. RNAC.是DNA但有蛋白质污染D.是RNA但有蛋白质污染E. DNA 和 RNA8. 在RNA提取和纯化过程中，为避免Rnase污染而导致 RNA的降解，应采取（）A. 在洁净的实验室里操作B.带手套和口罩C.所用器材高压消毒或 DEPC处理D.冰浴下操作E. 以上皆是9. 随机引物标记法全程标记DNA时,需选用下列哪种酶？（）A. DNA 多聚酶 I 的 Kelnow

4、片段 B. TaqDNA 聚合酶C. 限制性内切酶D. DNA连接酶E. 末端转移酶判断题：（你认为下列叙述正确的请在题后括号内打V,错误的打X,每题2分，共6分）1. 双脱氧核酸链终止法是最常用的DNA测序技术（）3't 5'外切酶活性，无校正功能,2. TapDNA聚合酶的作用是催化 DNA合成，但由于缺乏所以在复制合成新链过程中可能会发生碱基错配,导致PCR产物的错误（3. 采用加热煮沸法可使 RNase完全失活（） 三：填空题 （ 每空格 2 分, 共 24 分）:一级结构的完整性 ）；1. 在选择核酸的分离纯化方法,应遵循的总原则是：一是保证核酸（ 二是尽可能（ 排除

5、其他分子的污染,保证核酸样品的纯度）。2. 在PCF反应中，Mg+是个至关重要的因素，浓度（过低 ）会降低酶的活性，浓度（过 高 ）又会导致非特异性扩增。3. 用于核酸杂交的普通硝酸纤维素膜最大的优点是 （ 本底低 ）,因而最容易检测杂交信号, 缺点是（ 脆性大 ）易破裂，且队V 5 0 0 bp的核酸结合力低。4 整个核酸杂交反应主要由（ 预杂交 ）、（ 杂交 ）和（ 洗脱 ）三个步骤组成。5. 转移到硝酸纤维素膜或尼龙膜上的核酸, 其与滤膜的结合是松散的, 需做进一步的固定, 常用的固定方法是（ 烘烤 ）、（紫外线固定 ）和（ 碱固定 ）。三. 名词解释： （ 每题 4 分, 共 20 分

6、）:1. 融点曲线分析技术：是根据野生型序列和突变序列因不同Tm而产生不同的融点曲线而设计的。2. 探针 : 指所有能与特定的靶分子发生特异性的相互作用,并可以被检测的分子3. Tm 值： DNA 熔解温度,指把 DNA 的双螺旋结构降解一半时的温度。4. 转染：将外源DNA直接导入真核生物细胞的过程称为转染。5. 转化：将重组的DNA分子导入细菌，使其在细菌体内扩增及表达的过程称为转化。四. 问答题 ：（每题 10 分，共 30 分）1. 简述限制性内切酶的定义、命名原则和分类。答：定义：限制性内切酶是能识别和水解双链DNA分子内特异序列的核酸水解酶类。命名：通常由 3 个斜体字母表示，第

7、1个大写字母为来源微生物的属名第 1个字母，第 2、 第 3 个小写子母取微生物种名的头两个字母。分类：根据酶分子组成及裂解方式的不同， 将限制性内切酶分 3类，I类和川类限制性内切 酶在同一酶分子中兼有修饰 （甲基化）作用和依赖于 ATP的限制水解活性，H类限制性内切 酶能识别并水解特异性的核苷酸序列是 DNA重组技术中最重要的工具。2. PCR 引物的设计应遵循哪些原则。答：1.用于PCR反应的引物需要两条， 分别设在被扩增目的的片段的两端，并分别与模版正负链序列互补。2. 引物的长度一般以 18-25 个核苷酸为宜， 引物过长容易产生寡核苷酸的链内互补， 形成发 夹状结构，影响引物和模板

8、之间的互补。3. 两条引物之间尤其在 3'端的序列不能有互补，以免形成引物二聚体。4. 引物的碱基组成应平衡，避免出现嘌呤、嘧啶碱基堆积。5. PCR扩增中的退火温度是根据引物的Tm值而决定的，两条引物的 Tm值不能差太大。6. 根据需要，可在合成引物时于其5'端加修饰成分。3. 试述实时荧光PCR水解探针法的实验原理？答：原理：PCR反应体系中除有两条引物外还需要一条荧光素标记的探针。探针的5'端和3'端分别标记荧光报告基团R和荧光淬灭基团 Q当探针完整时 R基团与Q基团分别位于探针的两端，Q基团抑制R基团使其不能发射荧光。PCR程中，TaqDNA聚合酶沿着模