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文档简介

1、会计学1人教版动物细胞工程技术人教版动物细胞工程技术从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.27.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。比老龄动物的组织细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛。分化程度越低,增殖能力越强,越容易培养。动物细胞培养动物细胞培养不能最终培养不能最终培养成生物体成生物体细胞增殖缓慢,核型可能变化动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。细胞贴壁表面光滑

2、、无毒,易于贴壁。5%CO2。维持培养液的pH多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的内环境的知识,思考以下问题: 1.体外培养细胞时需要提供哪些物质? 2.体外培养的细胞需要什么样的环境条件? 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子和动物血清等。适宜温度、PH和气体环境;无菌无毒环境比较项目比较项目植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养原 理细胞的全能性细胞增殖培养基类型固体培养基液体培养基培养基特有成分蔗糖、植物激素葡萄糖、动物血清促生长因子培养结果新的个体或细胞产品细胞或细胞产品培养目的快速繁殖、培育无病毒植株等获得细胞或细胞产物 1.核移植的受体细胞是什么?核

3、移植的受体细胞是什么?处在什么时期?处在什么时期?2.通过什么手段激活受体细胞通过什么手段激活受体细胞,构建重组胚胎?,构建重组胚胎? 比较项目比较项目植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞融合动物细胞融合原 理细胞膜的流动性、植物细胞全能性细胞膜的流动性细胞融合的方法去除细胞壁后诱导原生质体融合使细胞分散后诱导细胞融合诱导方法物理(离心、振荡、电刺激)化学(聚乙二醇)物理、化学方法同左)灭活的病毒用 途获得杂种植株物理、化学方法主要用于制备单克隆抗体1.在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前,为什么必须先去掉受体卵母细胞的核?为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自有重要利用价值的动物提供的体

4、细胞,在供体细胞的细胞核移至受体细胞之前,必须将受体细胞的遗传物质去掉或将其破坏。培养的动物细胞一般当传代至1050代左右时,部分细胞核型可能会发生变化,其细胞遗传物质可能会发生突变,而10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。因此,在体细胞核移植中,为了保证供体细胞正常的遗传基础,通常采用传代10代以内的细胞。2.用于核移植的供体细胞一般都选用传代10代以内的细胞,想一想,这是为什么?3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物,是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么?绝大部分DNA来自于供体细胞核,但其核外还有少量的DNA,即线粒体DNA是来自于受体卵母细胞。此外,即便动物的

5、遗传基础完全相同,但动物的一些行为、习性的形成与所处环境有很大关系,核供体动物生活的环境与克隆动物所生活的环境不会完全相同,其形成的行为、习性也不可能和核供体动物完全相同,从这一角度看,克隆动物不会是核供体动物100%的复制。动物细胞培养不需经过脱分化过程。因高度分化的动物细胞发育潜能变窄,失去了发育成完整个体的能力,所以,动物细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。要想使培养的动物细胞定向分化,通常采用定向诱导动物干细胞,使其分化成所需要的组织或器官。细胞细胞A细胞细胞B杂种细胞杂种细胞B淋巴细胞受抗原刺激后,可以产生抗体。动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体,每种抗体对

6、特定的抗原具有特异性免疫作用。每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。由单个B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特异性强、灵敏度高 细胞融合、筛选筛选,继续培养体外培养注射到小鼠腹腔1、本过程利用了哪些原理?、本过程利用了哪些原理?免疫原理,细胞融合原理和动物细胞培养原理2、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合?细胞融合?这样融合成的杂交瘤细胞,继承了双亲细胞的遗传物质,不仅具有B细胞分泌抗体的能力,而且还有无限增殖的本领,因而可以获得大量单克隆抗体。与常规抗体相比,单克隆抗体产量高,特异性

7、强,灵敏与常规抗体相比,单克隆抗体产量高,特异性强,灵敏度高,优越性十分明显度高,优越性十分明显。1、临床诊断、临床诊断2、作为载体,运载抗癌药物,形成、作为载体,运载抗癌药物,形成“”治疗肿瘤治疗肿瘤资料资料:目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体目前世界各国已经研制出数以百计的单克隆抗体。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病。许多缺乏良好诊断手段的传染病、免疫性疾病、血液病、内分泌疾病和遗传病,用单克隆抗体作为诊断手段,是、内分泌疾病和遗传病,用单克隆抗体作为诊断手段,是一个必然趋势。另外,用单克隆抗体做体内诊断,借以鉴一个必然趋势。另外,用单克隆抗体做体内诊断,借以鉴别和

8、定位体内别和定位体内“病灶病灶”也引起人们的注意,目前,主要用也引起人们的注意,目前,主要用于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。于肿瘤追踪及心肌梗塞的诊断。在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是()确的是()A A结果是相同的结果是相同的B B杂种细胞的形成过程基本相同杂种细胞的形成过程基本相同C C操作过程中酶的作用相同操作过程中酶的作用相同D D诱导融合的手段相同诱导融合的手段相同. . 单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B B淋巴细胞淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,诱导融合后,要用特定培养基

9、筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是(在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( ) 淋巴细胞淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞 B B淋巴细胞自身融合细胞淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞A A B BC C D D C C用胰蛋白酶分散细胞,说明细胞间的物质主要是蛋白质。动物细胞培养适宜的PH为7.27.4,此环境下胃蛋白酶(2.0)没有活性,而胰蛋白酶(7.2-8.4)的活性较高。比老龄动物的组织细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛。分化程度越低,增殖能力越强,越容易培养。动物细胞培养动物细胞培养不能最终培养不能最终培养成生物体成生物体细胞增殖缓慢,核型可能变化动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。 细胞细胞A细胞细胞B杂种细胞杂种细胞细胞融合、筛选筛选,继续培养体外培养注射到小鼠腹腔. . 单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B B淋巴细胞淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,诱导融合后,要用特定培养

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