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文档简介

1、基 tuairbm、植物细胞工程| c h u zhi5h ¥ a o d教材学问问题化梳理1. 植物组织培育(2)操作过程:外植体植物体(1)理论基础:植物细胞的全能性。图中脱分化,再分化, a 表示愈伤组织,b 表示胚状体或丛芽2. 植物体细胞杂交技术-植物细胞融合2.培育条件(1) 无菌、无毒的环境。(2) 养分:除糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素之外,还通常需加入血清等取动辆 1 2 相关组织快价散就取个i细胞 -玻入适宜培育慕 -让如胞粧氏和增殖自然成分。(3)适宜的温度和 ph :温度为 36.5 °c ±).5 c, ph 为 7.27.4。

2、222气体环境:c02 和。 。 是细胞代谢所必需的,c0 的主要作用是维持培育液的三、体细胞核移植技术ph。四、单克隆抗体(1) 制备过程:给小駄注射一从脾脏中仆离 未融合细胞 i 特定的抗喘 匕淋巴细胞(浆细胞)-f 同种融介细胞 一| 培撵 ti髓牺细胞一谓髓癥细胞)f4, a”li 杂交痫细胞 丨 筛jj皿世 朦薜产生特定抗体峡交瘤细胞晋蜜(2) 单克隆抗体的特点:特异性强、灵敏度高。效果自评组合式设计一、 在小题集训中洞悉命题视角1 理论上,每个正常活细胞都具有全能性。(v)2.植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性。(x )3 愈伤组织是外植体脱分化和再分化后形成的。

3、4原生质体融合的原理是细胞膜的流淌性。5再生出细胞壁是原生质体融合成功的标志。6传代培育的细胞失去接触抑制现象。7.原代培育和传代培育都需要用胰蛋白酶处理。8 动物细胞核移植的受体细胞是卵细胞。9.克隆动物的性状与供体动物完全相同。10 单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点。(x)(v)(v)(x )(v)(x )(x )(v)11. 杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生专一性抗体。二、 在回忆教材图表中强化学科力量(v)枚入二氧化碳培弄箱中培捽据动物细胞培育过程回答下列问题:用腆蛍白牌赴理芬(1) 能否用胃蛋白酶处理动物组织块,使之分散成单个龈细血胞单?牛为什么?制成细胞妞液答案:不行以,由于

4、培育液 ph 为 7.27.4,胃蛋白酶的最适 ph 为 1.8 左右。转入培育涨中產薛 进行(2) 细胞获得不死性是在原代培育原过代培程养中,还是在传代培育过程中?贴满瓶樂的细胞用胰殒白酶处理舟 散答案:传代培育过程中。威单牛细胞制成细胞悬液(3)答案:保持细胞正常的二倍体核型。转入培界10冷冻保存的细胞为什么要液选中进行代以内的培育细胞?传代培育高频譽点襄通美gao 卩阳 kaodian yaqtohtgguan2需重点强化的重难点1. 植物组织培育与动物细胞培育的异同项目理论基础植物细胞全能性植物组织培育细胞增殖动物细胞培育类型固体或半固体培育基培养成分水、矿质元素、维生素、蔗糖、氨基酸

5、、琼脂基液体培育基葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、促生长因子、动物血清等动物胚胎或诞生不久的幼龄取材植物幼嫩部位或花药等动物的器官或组织动物胚胎或幼龄外植体(离体根、茎、叶等)动物的组织器官脱分(半)固体培育基 化剪絆腆帯白酶处理甲个细胞 用枷愈伤组织-”胚狀体v细腕悬浮液过程世賠养堆化心“* *试骨幼苗人胚皮人工种子移戕植株-细胞贴壁土长増悄传优培育“1 丨40 我 50 ft >细胞获得不死性 (遗传物质发主转变)新的细胞系或细胞株,不形成结果新的组织或植株个体,可以体现全能性个体,不体现全能性 植株快速生殖 蛋白质生物制品的生产 脱毒植株的培育 皮肤移植材料的培育目的 人工种子 检

6、测有毒物质 生产药物、杀虫剂等 生理、病理、药理学争辩 转基因植物的培育 两技术手段培育过程中都进行有丝分裂,都是无性生殖,都可称克隆,都不相同点涉及减数分裂 均为无菌操作,需要适宜的温度、ph 等条件2. 相关概念的辨析(1) 原代培育和传代培育: 原代培育:可有两种表述:a.细胞悬液第一次在瓶中培育,没有分瓶培育之前的细胞培育; 代细胞的培育与传 10 代以内的细胞培育统称为原代培育。两种表述没有本质区分。b第 1 传代培育:同样有两种表述:a.细胞悬液培育一段时间后, 的细胞培育,统称为传代培育。分瓶再进行的细胞培育;b.传 10 代以后(2) 细胞株和细胞系:细胞株:原代培育的细胞一般

7、传至10 代左右会消灭生长停滞,年轻死亡,少数度过“危机”的细胞能传 50 代左右,形成细胞株。细胞株的遗传物质并没有发生转变。细胞系:细胞株传至 50 代以后,会消灭其次次危机,少数度过其次次危机的细胞能够无限传代下去,形成细胞系。细胞系的遗传物质发生了转变,带有癌变细胞的特点。例 1下列与细胞工程技术相关的表述中,不.正确的是()a 植物体细胞杂交技术可以克服常规的远缘杂交不亲和障碍b. 动物细胞培育与植物组织培育所用的培育基成分相同c. 动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同d .植物组织培育技术的理论基础是细胞的全能性解析植物体细胞杂交可以把来自不同植物的细胞融合在一起,克服了自

8、然状态下植物间远缘杂交不亲和障碍,融合后的细胞能培育成一个植物个体,体现了植物细胞全能性,细胞融合原理是膜的流淌性,但植物细胞培育基除基本成格外还需要植物激素,动物细胞培养液还需要动物血清。答案brs1植物体细胞杂交与动物细胞融合植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流淌性、细胞的全能性细胞膜的流淌性细胞 a、b去壁原生质体 a、b细胞 a、b,融合融合过程融合的原生质体杂交细胞1|有丝分裂杂种细胞多个相同杂交细胞、植物组织培育杂种植株相关酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶融合方除物理法和化学法外还可以用灭活物理法:离心、电激、振动; 化学法:聚乙二醇等试剂法的病毒诱导诱导结果杂种植株杂交

9、细胞意义克服了远缘杂交的不亲和性,获得杂种植株突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能例 2 (2013 广东名校质检)下面是“白菜甘蓝”杂种植株培育过程示意图。下列叙述正确的是()a 如将纯种的白菜和甘蓝的卵细胞分别制成原生质体,按相同的方法操作也可得到与 图示相同基因型的杂种植株b 可以通过观看在 0.3 g/ml 蔗糖溶液中是否发生质壁分别来推断白菜原生质体的死活c.该培育过程中可能发生细胞分化、染色体变异、基因突变或基因重组d 植物组织培育和动物细胞培育的培育基、培育目的不完全相同,但诱导细胞或原生质体融合的方法完全相同解析a 项用卵细胞杂交得到的植株细胞的遗传物质是体细胞杂交的一

10、半。的原生质体已经去掉了细胞壁,不会发生质壁分别。c 项培育过程中可能发生细胞分化、b 项白菜染色体变异、基因突变或基因重组。d 项植物组织培育是得到植株或细胞产物,养是得到大量的细胞;细胞融合的方法也不完全相同,动物细胞融合可用灭活的病毒。而动物细胞培答案c7需特别关注的會易失分点易误点失误类型不能精确把握单克隆抗体的制备过程学问理解类失误认知纠偏i 单克隆抗体的制备过程细胞笙上注対抗原b 淋巴細胞朵交斓第 1 探筛逸:筛选出杂亶瘤抓胞 细胞彌选- 第 2 祝晞选;在孤交刪细血中端茁外培翠/休内部养从培育液/从小鼠取中提取水中提取单克隆抗怵选出能产定所需机体的杂变瘤 细胞2.两次筛选的目的不

11、同第一次筛选是将未融合的b 淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及 bb 融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培育基淘汰,筛选出 b 瘤融合的细胞。(2)其次次筛选是将产生特定抗体的 b 瘤细胞通过细胞培育用相应抗原检测的方法筛选 出来。由于从体内取免疫过的 b 淋巴细胞时取出很多种,形成的杂交瘤细胞有很多种,所 以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。设误角度高考命题常从以下角度设置陷阱(1)(2)给出单克隆抗体的制备过程,考查对相关过程的理解与把握。结合基因工程、细胞工程等学问,综合考查单克隆抗体的制备方法。1. 对于下面制备单克隆抗体过程示意图,不 正确的叙述是产 从定捽 補的捉 収w抗()a 表示 b 淋巴细胞

12、和骨髓瘤h细群胞巴均是从小鼠的脾脏中提取的b .中的筛选是通过抗原、抗体反应进行的c.促进细胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介导d 可以无限增殖解析:选 a 单克隆抗体是利用 b 淋巴(浆)细胞和小鼠骨髓瘤细胞融合得到,可以有化学方法如聚乙二醇,生物方法如灭活病毒; 假如要筛选可以通过检测抗原、融合方法抗体反应,假如有反应说明表达了抗体;融合细胞具有双亲特点,即能无限增殖又能产生单一抗体。 骨髓瘤细胞是体外培育的。2. (2013 南京一模)下列方案中不能制备出抗 h1n1 流感病毒单克隆抗体的是()a 将 h1n1 流感病毒抗原的基因导入骨髓瘤细胞,并使该基因表达b 将抗 h1n1 流感病毒抗

13、体的基因导入骨髓瘤细胞,并使该基因表达c.抗体的效应 b 细胞和骨髓瘤细胞融合,将产生抗 h1n1 流感病毒筛选出杂交瘤细胞 并进行体外大规模培育d.将骨髓瘤细胞中的癌基因导入能产生抗h1n1 流感病毒抗体的效应 b 细胞中,并使 癌基因表达解析:选 a h1n1 流感病毒的遗传物质是rna ,该病毒dna连接而无法正常表达。解题练ji eti x un li an y ao ft a 0 x i a 0呱速虞课堂考点集训考点一植物细胞工程1. 下列有关植物组织培育的说法错误的是 ()a .可用于爱护生物的多样性,特别是爱护珍稀、濒危物种b .其理论基础为细胞的全能性c.离体条件、激素刺激、无

14、菌操作、有机养分供应,四者缺一不行d .再分化过程中有细胞形态、结构的变化,而脱分化过程中没有解析:选 d 离体的、已分化的组织细胞经脱分化形成愈伤组织,细胞的形态结构发生了变化。2. (2010 苏高考)(多选)明党参是我国珍稀药用植物,对其进行爱护性开发利用的方法有()a .设计细胞培育反应器,实现药用成分的工厂化生产b. 大量培育愈伤组织,直接提取药用成分c. 大规模栽培组织培育苗,猎取药用成分d .利用组织培育获得胚状体,制成人工种子解析:选 abcd 设计细胞培育反应器,可以实现细胞产物的工厂化生产。有些药用成分可以从愈伤组织中直接提取。微型生殖和人工种子都可以促进植物大量生殖。考点

15、二动物细胞融合和单克隆抗体3.物细胞工程猎取单克隆抗中对单克隆抗体制备的相关叙述错误的是()(2013 南京二模)下列是应用动x 抗体的具体操作步骤,其从患骨髓瘤的小鼠体内猎取骨髓瘤细胞x 抗体的 b 淋巴细胞 将杂交瘤细胞注入小鼠腹腔内培育将 x 抗原注入小鼠体内,获得能产生抗筛选出能产生抗 x 抗体的杂交瘤细胞 利用选择培育基筛选出杂交瘤细胞从小鼠腹水中提取抗体胞融合因子促使细胞融合a .试验挨次应当是b .过程产生多个杂交瘤细胞的过程称为克隆利用促细c.过程获得的细胞均可无限增殖d 利用细胞融合生产单克隆抗体过程中通常要经过两次筛选解析:选 c 在细胞融合过程中, 假如只考虑两两细胞的融

16、合,有骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞的融合,骨髓瘤细胞和b 淋巴细胞的融合,b 淋巴细胞和 b 淋巴细胞的融合,其中 b淋巴细胞和 b 淋巴细胞的融合不能无限增殖。4.(2013 浙江四校调研)植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是( )a 纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理b .植物组织培育和动物细胞培育一一细胞的全能性c.原生质体融合和动物细胞融合一一生物膜的流淌性一一酶的专一性d .紫草细胞培育和杂交瘤细胞的培育一一细胞分裂解析:选 b 植物组织培育的原理是细胞的全能性,而动物细胞培育的原理是细胞的增殖。考点三动物细胞培育与核移植5.技术和克隆动物的叙述,正确的是下列关于动物体细

17、胞核移植()a .目前在试验中,科学家可以用类似植物组织培育的方法获得完整的动物个体b 体细胞的细胞核移植到受体细胞之前,要先去掉受体卵母细胞的核c.用于核移植的供体细胞一般都选用传代50 代以内的细胞d .用体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行解析:选 b 目前在试验中,科学家还不能直接把动物细胞培育成完整的动物个体。100%的复制用于核移植的供体细胞一般都选用传代10 代内的细胞,由于 10 代内的细胞能保持正常的核型。体细胞核移植方法生产的克隆动物,并没有对体细胞供体动物进行部分遗传物质来自受体卵母细胞的线粒体。6(2013 东北三省四市联考)科学家通过转基因技术获得了含

18、有人生长激素基因的奶牛,假如要加速转基因奶牛的繁育,可以对此转基因奶牛进行克隆 答下列问题:100%的复制,由于还有(如下图所邮胞培育 會有人住艮去核丿缴w素棊闵的頁 a 奶牛休细胞采集卵母 i® - 妙 *重纽细胞亟组胚胎極 t在进行细胞培育时,要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分别,形成单个细胞,这个过程中需要利用酶处理。(2) 形成重组细胞时应选用期的卵母细胞,并去掉其细胞核的缘由是。(3)胞,则在进行原代培育时,会表现出等特点。图中犊牛并非是对体细胞核供体母牛 100%的复制,其缘由主要有假如重组细胞为贴附性细 和 (5)上图中所示的生物技术整体被称为,其包括的具体生物技术有、

19、 等。转基因奶牛的克隆成功,说明白动物具有全能性。解析:图中所示技术为动物体细胞核移植技术,其中应用到的生物技术包括动物细胞培养、细胞核移植、胚胎移植等。转基因奶牛的克隆成功,说明白动物体细胞的细胞核具有全能性。在动物细胞培育过程中,一般用胰蛋白酶将细胞分散开,获得细胞悬液。假如重组细胞为贴附性细胞,在进行原代培育时, 会表现出贴壁生长和接触抑制等特点。形成重组细胞的过程中一般选用处于减数其次次分裂中期的卵母细胞,在细胞核移植去除其细胞核是为了保证克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞。质来自卵母细胞,并且生物性状的表达还受到环境因素的影响,克隆出的个体细胞质中的遗传物所以图中犊牛并非

20、是对体细胞核供体母牛 100%的复制。答案:(1)胰蛋白(或胶原蛋白)(2)m n 中(或减 n 中)使克隆出的动物个体的遗传物 质几乎全部来自供体细胞 (或避开卵细胞中的遗传物质对后代造成干扰)(3)贴壁生长(或细胞贴壁) 接触抑制(4) 生物的性状受细胞核基因和细胞质基因共同把握生物的性状受环境因素的影响(两空挨次可以颠倒)核移植(或体细胞核移植) 动物细胞培育 胚胎移植体细胞的细胞核老师备选题库1. (2011 江苏高考)关于现代生物技术应用的叙述,错误的是( )a .蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质b .体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体c.植物组织培育技术可用于植物茎

21、尖脱毒d .动物细胞培育技术可用于转基因动物的培育解析:选 b 克隆动物是核移植工程的应用;茎尖分生力量强,没有病毒侵染,以茎尖为外植体,通过植物组织培育可获得无病毒植株;导入目的基因的受体细胞,需通过动物细胞培育技术获得早期胚胎,才能进一步培育成转基因动物。2.物细胞培育的叙述,正确的是a .培育保留接触抑制的细胞在培育瓶壁上可形成多层细胞b 克隆培育法培育过程中多数细胞的基因型会发生转变c.二倍体细胞的传代培育次数通常是无限的d 恶性细胞系的细胞可进行传代培育(2010 浙江高考)下列关于动()解析:选 d 由于接触抑制,动物细胞培育时只能形成单层细胞; 克隆培育法在培育时, 由于全部子代

22、细胞来自于一个亲代细胞, 所以基因型一般都相同; 二倍体细胞的传代培育次 数通常是有限的,只有少数细胞遗传物质发生转变, 才能无限增殖;恶性细胞系的细胞具有 癌变的特点,可进行传代培育。3.(2010 东高考)(双选)新技术的建立和应用对生物学进展至关重要。下列技术(或仪器)与应用匹配正确的是() a . pcr 技术一一扩增蛋白质b.杂交瘤技术 制备单克隆抗体c.光学显微镜一一观看叶绿体的基粒 d .花粉离体培育 一一培育单倍体植物解析:选 bd a 项,pcr 技术的应用是扩增基因,而不是蛋白质; b 项,杂交瘤技术 的应用是制备单克隆抗体,杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生特异性抗体;c

23、项,叶绿体属于显微结构,可用光学显微镜观看, 叶绿体中的基粒属于亚显微结构, 则需用电子显微镜 才能观看;d 项,培育单倍体植物主要包括花粉离体培育和用秋水仙素处理两大步骤。4.(2011 天津高考)絮凝性细菌分泌的具有絮凝活性的高分子化合物,能与石油污水中的悬浮颗粒和有机物等形成絮状沉淀,起到净化污水的作用。为进一步提高对石油污水的净化效果,将絮凝性细菌和石油降解菌融合,构建目的菌株。其流程图如下。据图回答:(1) 溶菌酶的作用是 (2) peg的作用是 。(3) (3)图中 ab 融合菌能生长和经处理后,在再生培育基上,未融合的 a、b 难以生长。生殖的缘由是 (4) (4)筛选既能分泌具有絮凝活性的化合物,又能在含有培育基上生长的 ab 融合菌,选择效果最好的作为目的菌株。目的菌株的筛选: 的(5) 为探究目的菌株不同发酵时间发酵液的絮凝效果,将目的菌株进行发酵培育,定时取发酵液,

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