2022年2022年多聚酶链式反应扩增DNA片段导学案

1、精选学习资料 - - - 欢迎下载课题 2多聚酶链式反应扩增dna片段学习目标 学问 目标：1.明白 pcr技术的基本操作2.懂得 pcr的原理3.争论 pcr的应用 才能目标：在多聚酶链式反应扩增dna片段的实 验过程中,应防止外源dna污染,严格掌握温度等反应条件 情感态度价值观：通过对 pcr试验的操作及结果分析,培育同学严谨的科学态度和实事求为的科研精神自主学习一： pcr技术扩增dna的过程,与细胞内dna复制过程类似： 1细胞内dna复制条件分析：条件组分作用模板原料酶能量引物2细胞内dna复制过程的解析：解旋：解旋酶. atp, dna两条链打开,形成两条dna单链；引物结合：在

2、dna单链 3端与 dna反向配对结合；dna聚合酶结合：dna聚合酶与模板链结合,标志着单链合成开头；子链合成： dna聚合酶从引物3端开头,将配对的脱氧核苷酸连接起来；后续加工： dna聚合酶 i 将引物切去, 并合成空缺处的dna单链, 再由 dna连接酶将不连续的dna子链连接起来（半不连续合成；先导链,滞后链）子链合成特点：；摸索 dna分子能精确复制的缘由有哪些？；精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载3 dna 分子复制的人工掌握解开螺旋：在时, dna双螺旋打开,形成两条dna单链,称为变性；复原螺旋：在左右时,两条dna单链重新形成双螺旋结构,称为复性；复制条件：；反

3、应场所：（自动温度周期性调剂）；摸索缓冲液相当细胞内的什么成分？（核基质）4 pcr的反应过程变性复性延长变性：在时 dna解旋复性：在时引物与dna单链结合延长：在时合成dna子链（两个引物间的序列） 试验操作（1） pcr 反应体系：缓冲液.,.两种 rna引物,水（2） 试验操作步骤根据 pcr反应体系配方配制反应液；将 pcr反应体系50 l 用微量移液器转移到微量离心管（0.5ml）中；将微量离心管放到pcr仪中；设置 pcr仪的工作参数；dna在 pcr仪中大量扩增；2 4 水浴法：将微型离心管依次在.的恒温水浴锅中循环处理相应时间；3试验留意事项（ 1）防止外源dna污染：所用仪

4、器.缓冲液.蒸馏水等使用前高压灭菌；（ 2）缓冲液和酶分装成小份,20低温储存；精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载（ 3）每添加一种反应成分,更换一个移液器的枪头；（ 4）混匀后离心处理,使反应液集中在离心管底部；【典例分析】例 1 标准的 pcr过程一般分为变性.复性.延长三大步,这三大步需要的温度依次为 ； a94 .55 .72 b72 .55 .94 c55 .94 .72 d80 .55 .72 例 2 聚合酶链式反应pcr 技术 为体外酶促合成特异dna片段的一种方法,由高温变性.低温退火及适温延长等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的dna得以快速扩增,其简要过程如

5、下列图；以下关于pcr技术表达不正确选项 ；a pcr技术为在试验室中以少量dna制备大量dna的技术 b反应中新合成的dna又可以作为下一轮反应的模板c pcr技术中以核糖核苷酸为原料,以指数方式扩增 d应用 pcr技术与探针杂交技术可以检测基因突变限时训练1 dna分子复制时,解旋的两条链中（）a 仅一条作为复制模板b 两条链作为模板并复制出两个不同的dna分子c两条链作为模板并复制出两个相同的dna分子d 两条链作为模板,各自合成一条子链,然后两条母链重新结合为原先的双螺旋分子,两条新链结合成一个全新的dna分子2. 以下关于 dna复制过程的正确次序为（）互补碱基对之间氢键断裂互补碱基对之间形成氢键dna 分子在解旋酶的作用下解旋以解旋后的母链为模板进行碱基互补配对子链与母链回旋成双螺旋状结构abcd3. 以下各项过程中,遵循“碱基互补配对原就”的有（） dna复制 rna复制转录翻译逆转录abcd4. 试验室内模拟生物体dna的复制必需的一组条件为（）精品学习资料精选学习资料 - - - 欢迎下载酶游离的脱氧核苷酸atp dna分子mrna trna 相宜的温度相宜的