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1、师中学 2015 届高三生物科组二轮复习选修资料回归课本,注重基础!谦虚、淡定!善于思考,勤于总结!高考生物选修 3 3 知识点总结_ 专题一基因工程一、基因工程的基本工具1 1、 分子手术刀”一-限制酶)功能:能够识别双链 DNADNA 分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中 特定部位的两个核苷酸之间的 磷酸二酯键 断开,因此具有专一性。结果:经限制酶切割产生的 DNADNA 片段末端通常有两种形式: 黏性末端和平末端 。2 2、 分子缝合针” 一 NANA 连接酶(1 1)两种 DNADNA 连接酶(E E coliDNAcoliDNA 连接酶和 T T4DNA连接 酶)的比较:1相

2、同点:都缝合 磷酸二酯 键。区别:E E - - coliDNAcoliDNA 连接 酶只能连接 黏性末端;T T4DNADNA 连接酶 能缝合 两种末端,但效 率较低。3 3、 分子运输车”一范载体(1) 载体具备的条件: 能在受体纟田胞中复制并稳定保存。2具有一至多个限制酶切点, 供外源 DNADNA 片段插入。 具 有标记基因,供重组 DNADNA 的鉴定和选择。(2 2 )最常用的载体是:质粒,它是一种裸露的、结构简单的、 独立于细菌染色体之外, 并具有自我复制能力的双链环 状 DNADNA 分子。(3 3)其它载体: 噬菌体的衍生物、动植物病毒二、基因工程的基本操作程序 1 1、曰的

3、基因的获取从基因文库中获得、人工合成、 PCRPCR 扩增。人工合成曰的 基因的常用方法有 反转录法- -和化学合成法_。(了解基因组文 库和 CDNACDNA 文库?;如何从基因文库中提取曰的基因? )2 2、 基因表达载体的构建(关键步骤)组成:曰的基因+启动子+终止子+标记基因(1) |启动子|:是一段有特殊结构的 DNADNA 片段,位于基因的 首端,是 RNARNA 聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转 录出 mRNAmRNA,最终获得所需的 蛋白质。(2) 终止子:也是一段有特殊结构的 DNADNA 片段,位于基因 的尾端。(3) 标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中是否含有曰的

4、基因,从而将 含有曰的基因的细胞 筛选出来。常用的标记 基因是抗生素基因。3 3、 将曰的基因导入受体纟田胞_ _(1)常用的转化(导入)方法:导入植物细胞:常用 农杆菌转化法 (双子叶植物),其次还 有基因枪法和花粉管通道法等。导入动物细胞:最常用的方法是 显微注射技术。此方法的受体细胞多是受精卵 。导入微生物细胞:感受态细胞法。先用 CaCa2+处理细胞,使其 成为感受态细胞,再将重组表达载体 DNADNA 分子溶于缓冲液中 与感受态细胞混合, 在一定的温度下促进感受态细胞吸收 DNADNA 分子, 完成转化过程。原核生物作为受体细胞的原因是 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相师中学 2015

5、 届高三生物科组二轮复习选修资料回归课本,注重基础!谦虚、淡定!善于思考,勤于总结!对较少,最常用的原核细胞是大肠杆菌。(2 2)重组细胞导入受体细胞后, 筛选含基因表达载体受体细 胞的依据是标记基因是否表达。4 4、目的基因的检测和表达检测转基因生物的染色体 DNADNA 上是否插入了目的基因,方法 是采用 DNADNA 分子杂交技术。检测目的基因是否转录出 mRNAmRNA,方法是采用用标记的目的 基因作探针与 mRNAmRNA 杂交。检测目的基因是否翻译成蛋白质,提取蛋白质,用相应的抗体 进行抗原-抗体杂交。有时还需进行 个体生物学水平 的鉴定。如转基因抗虫植物 是否 出现抗虫性状。三、

6、蛋白质工程的概念蛋白质工程 是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成 ,对现有蛋白质进行 改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需 求。(基因工程在原则上只能生产 自然界已存在 的蛋白质) 专题 2 2 细胞工程一、植物细胞工程1 1、理论基础(原理):植物细胞全能性2 2、 植物组织培养技术(1 1)过程:离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织试管 苗植物体(2 2 )用途:微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育 种、细胞产物的工厂化生产 。(3 3 )地位:是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新 品种的最后一道工序。3 3、 植物体细

7、胞杂交技术诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等 C化学法用聚乙二醇(PEGPEG) 作诱导剂。原理:细胞膜的流动性。意义:克服了远缘杂交不亲和的障碍。二、动物细胞工程1 1、动物细胞培养(1 1)取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)剪碎用 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 处理分散成 单个细胞制成 细胞悬液转入培养瓶中进行原代培养贴满瓶壁的细胞重师中学 2015 届高三生物科组二轮复习选修资料回归课本,注重基础!谦虚、淡定!善于思考,勤于总结!新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。(2)细胞贴壁悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上。 接 触抑制:细胞数目不断增多,当贴壁

8、细胞分裂生长到表面 相互 抑制时,会停止分裂增殖。(3) 动物细胞培养需要满足以下条件1无菌、无毒的环境:培养液应进行 无菌处理。通常还要在 培养液中添加一定量的 抗生素,以防培养过程中的污染。 此外, 应定期更换培养液,防止 F 谢产物积累对细胞自身造成危害 。2营养:糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。需加入血清、血浆 等天然成分。3温度:适宜温度:哺乳动物多是 36.536.5 C+ 0.50.5 C ; pHpH :7.27.2 7.47.4。4气体环境:95%95%空气+ 5%CO5%CO2。0 02是细胞代谢所必需的,COCO2作用是维持培养液的 pHpH。2 2、 动物体

9、细胞核移植技术和克隆动物(1) 哺乳动物核移植可以分为 胚胎细胞核移植(比较容易) 和体细胞核移植(比较难)。(2) 选用去核卵( (母) )细胞的原因:卵( (母) )细胞比较大,容易操 作;卵( (母) )细胞细胞质多,营养丰富。3 3、 动物细胞融合(1)原 理级方法:细胞膜的流动性。诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法用聚乙二醇(PEGPEG)作 诱导剂。还可以用灭活的病毒诱导。(2) 动物细胞融合的意义:克服了 远缘杂交的不亲和性。项目细胞融合 的原理细胞融合 的方法诱导手段用法植物体 细胞杂 交细胞膜的流动性去除细胞 壁后诱导 原生质体 融合物理法、化克服远缘杂交

10、不亲和性, 获 得杂种植株学法动物细 胞融合细胞膜的流动性使细胞分 散后诱导 细胞融合物理法、化制备单克隆抗体的技术之一学法、灭活的病毒诱 导4 4、单克隆抗体(1 1)抗体:一个 B B 淋巴细胞只分泌一种 特 异性抗体。从血清中分离出的抗体 产量低、 纯度低、特异性差。(2 2 )杂交瘤细胞的特点:既能大量繁殖,又能产生专一的抗体。(3 3 )单克隆抗体的优点:特异性强,灵敏 度高,并能大量制备。(4 4 )单克隆抗体的作用:师中学 2015 届高三生物科组二轮复习选修资料回归课本,注重基础!谦虚、淡定!善于思考,勤于总结!作为诊断试剂:准确识别各种 抗原物质的细微差异,并跟 一定抗原发生

11、特异性结合,准确、高效、简易、快速。用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗癌症治疗,可制成生物导弹”,也有少量用于治疗其它疾病。一、动物胚胎发育的基本过程1 1、胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操 作和处理技术,如胚胎移植、体外受精、胚胎分割、胚胎干细 胞培养等技术。经过处理后获得的胚胎,还需移植到雌性动物 体内生产后代,以满足人类的各种需求。2 2、动物胚胎发育的基本过程(1 1)精子的发生:细胞核为精子头的主要部分,高尔基体发 育为顶体,中心体演变为精子的尾,线粒体在尾基部形成线粒 体鞘膜,其他物质浓缩为原生质滴直至脱落。(2 2)卵子的发生:在胎儿时期,卵原细胞进行有丝分裂

12、演变 成初级卵母细胞,减一分裂 在排卵前后 完成,形成次级卵母细 胞和第一极 体进入输卵管;减二分裂 是在受精过程中 完成的。(3 3) 受精:精子获能(在雌性动物生殖道内);卵子的准备(排出的卵子要在输卵管中进一步成熟到减二中期才具备受 精能力);受精阶段:透明带反应:防止多精子入卵受精的第 一道屏障。卵黄膜的封闭作用:它是防止多精子入卵受精的第 二道屏障。受精标志是第二极体的形成;受精完成标志是雌雄 原核融合成合子。受精场所是母体的 输卵管上段。(4 4) 胚胎发育:卵裂期-桑椹胚(全能细胞)-囊胚:开始 出现分化(该时期细胞的 全能性仍比较高)。聚集在胚胎一端 个体较大的细胞称为 内细胞

13、团,将来发育成胎儿的各种组织。 中间的空腔称为囊胚腔。-原肠胚:有了三胚层的分化,具有 囊胚腔和原肠腔。二、体外受精1 1、 卵母细胞的采集和培养 :对体型小的动物用促性腺激素 处 理,从输卵管冲取卵子(可直接受精);对体型大的动物从卵 巢中采集卵母细胞(要在体外培养成熟)2 2、 精子的采集和获能:对啮齿动物、兔、猪等的精子用培养法(放入人工配制的获能液中);对牛、羊等精子用化学法(放 在肝素或钙离子载体溶液中)三、胚胎移植1 1、 将雌性动物的 早期胚胎 移植到同种的、牛理状态相同的 其 他雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的。通过转基因、 核移植、专题 3 3 胚胎工程师中学 2015

14、 届高三生物科组二轮复习选修资料回归课本,注重基础!谦虚、淡定!善于思考,勤于总结!体外受精获得的胚胎必须移植给受体才能获得后代。2 2、 优势:可以 充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力,缩短供体 本身的繁殖周期。3 3、 胚胎移植的 牛理学基础:动物发情排卵后, 同种动物的供、受体生殖器官的生理变化 是相同的。这就为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环 境。师中学 2015 届高三生物科组二轮复习选修资料早期胚胎形成后处于游离状态,为胚胎的收集提供可能; 受体对移入子宫的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应;为胚 胎在受体的存活提供了可能。供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系,遗传特性在孕育过

15、程中不受影响。4 4、胚胎移植的程序:对供、受体母牛进行选择,用 促性腺激素进行同期发情处 理;对供体母牛用促性腺激素 做超数排卵处理。选择同种优 秀公牛配种;对胚胎进行收集此时胚胎处于游离状态;对 胚胎进行质量检查此时胚胎应发育到桑椹胚或囊胚:胚胎 移植;检查受体母牛是否受孕;产下胚胎移植的犊牛。四、胚胎分割1 1、 概念:将 早期胚胎切割成 2 2、4 4、8 8 等分等,经移植获得同 卵双胎或多胎的技术。 来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物 质,属于无性繁殖。2 2、 操作要点:选择发育良好,形态正常的桑椹胚或囊胚。内细胞团要均等分割,否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。五、胚胎干细胞的移

16、植(识记)1 1、含义:由早期胚胎囊胚或胎儿的原始性腺 中分离出来的一 类细胞,又叫 ESES 或 EKEK 细胞。发育的全能性,即可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。体外培养下,ESES 细胞可以只增殖不分化3 3、应用:用于治疗人类疾病,如利用ESES 细胞诱导其分化成新的组织细胞特性,移植 ESES 细胞可使坏死或退化的部位得以 修复。专题五 生态工程的原理(识记)1 1、对象:以破坏的生态系统进行修复和重建2 2、基本原理:物质循环再生原理如无废弃物农业物种多样性原理提高生态系统的抵抗力稳定性协调与平衡原理处理生物与环境的协调与平衡,考虑环境容 纳量整体性原理考虑自然系统、经济系统和

17、社会系统的统一 系统性和工程学原理系统的结构决定功能原理:考虑系统内 部不同组分之间的结构,通过改变和优化结构,达到改善系统 功能的目的;系统整体性原理:实现总体功能大于各部分之和 的效果相关考题:一、一对表现型正常的夫妇,生了一个镰刀型细胞贫血症(常染色体隐性遗传病)患儿。在他们欲生育第二胎时,发现妻子的双侧输卵管完全堵塞,不能完成体内受精。医生为该 夫妇实施了体外受精和产前基因诊断,过程如下图。2 2、特征:形态上体积小、细胞核大、核仁明显 ;功能上具有回归课本,注重基础!谦虚、淡定!善于思考,勤于总结!回归课本,注重基础!谦虚、淡定!善于思考,勤于总结!卵子-受精卵早期胚胎请回答:1)过

18、程是指在体外进行的_ 理,从而使精子与卵子结合形成受 精卵;过程称为父、母、患儿 酶切产物子宫1抽取r、分离羊水中的胎丿L细胞扩增产物Mstn酶切产物胎儿父患儿母基因分析电泳带谱注:电泳条带力口样孑 L二、自 1981 年 Evans 和 Kaufman 首次成功分离小鼠胚胎干细胞 究虽颇有争议但也如火如荼,O(2) 在对胎儿进行镰刀形细胞贫血症的产前基因诊 断时,要先从羊水中的胎儿 细胞提取物质 进行 PCR 扩增。然后用 Mstn对扩增产物 进行切割,产生多个片段的 酶切产物。据此判断,Mstn是一种_ 酶。(3) 不同长度的酶切产物 在电泳时移动的速率不同, 形成不同的电泳条带。该家 庭

19、成员的镰刀型细胞贫血 症基因分析的电泳带谱如 ,据此判断胎儿为(填 “正常”、“患者”或“携带者”)。ES 细胞),医学界对其的研师中学 2015 届高三生物科组二轮复习选修资料点。在哺乳动物早期发育过程中,囊胚的后一个阶段是 _ 。(3)过程川中目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是 _,将获得的目的基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体,其目的是 _ (4)过程“得到的小鼠畸胎瘤里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时,必须用X 射线照射去除胸腺的小鼠,获得免疫缺陷小鼠,其目的是_ 该过程研究的意义在于解决_ 问题。三、胚胎工程技术包含的内容很丰富,如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况,其中供体 1 是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是黄牛,请据图回答下列问题:(1)应用 1 中获得的小牛,其遗传物 质来源于_ ,细胞 B 的名称是_ 。应用 2 中牛完成体内受精的场所 是,刚种植在子宫内的胚胎其发育程度一般为_胚胎种植后可以通过 _从母体获得正常发育所需要的物 质。这种试管牛的产生,采用的胚 胎工程技术有(至少答出2 种)等。应用 3 中细胞 C 取自牛胎儿 的 , 或细胞。* W爾 肠陷干细 细胞分小牛F图表示利用胚胎干细胞(ES 细胞)所做的一系列研

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