探究培养液中酵母菌种群数量的变化(精华)

1、4.2 培养液中酵母菌种群数量的变化培养液中酵母菌种群数量的变化1.1.酵母菌酵母菌单细胞单细胞真核真核生物；生物；生长周期生长周期短短，增殖速度，增殖速度快；快；还可以用酵母菌作为实验材料研究还可以用酵母菌作为实验材料研究 探究酵母菌的呼吸方式探究酵母菌的呼吸方式 判断细胞的死活（探究膜的通透性）判断细胞的死活（探究膜的通透性）知识回顾知识回顾2.2.种群数量的变化种群数量的变化 种群数量的变化包括增长、稳定、波动、下降等。种群数量的变化包括增长、稳定、波动、下降等。 “S”S”型曲线有一个型曲线有一个K K值，即环境容纳量。值，即环境容纳量。 种群数量的增长也受到许多环境因素（如温度、培种

2、群数量的增长也受到许多环境因素（如温度、培养液的养液的pHpH、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等）、培养液的养分种类和浓度、代谢产物等）的影响。的影响。1实验原理：实验原理：（1）在含糖的液体培养基（培养液）中酵母菌繁）在含糖的液体培养基（培养液）中酵母菌繁殖很快，迅速在容器内形成一个封闭的酵母菌种殖很快，迅速在容器内形成一个封闭的酵母菌种群，通过显微计数法（血球计数板计数）可以测群，通过显微计数法（血球计数板计数）可以测定酵母菌种群随时间而发生的数量变化。定酵母菌种群随时间而发生的数量变化。（2）酵母菌种群受养分、空间、温度和有毒排泄）酵母菌种群受养分、空间、温度和有毒排泄物等的影响。物等

3、的影响。2实验目的：实验目的：（1）通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化，）通过探究培养液中酵母菌种群数量的变化，尝试建构种群增长的数学模型。尝试建构种群增长的数学模型。（2）用数学模型解释种群数量的变化。）用数学模型解释种群数量的变化。（3）学会使用血球计数板进行计数。）学会使用血球计数板进行计数。探究过程探究过程1.1.提出问题：提出问题：2.2.作出假设：作出假设：3.3.设计实验：设计实验：4.4.进行实验：进行实验：5.5.分析结果和分析结果和 表达交流：表达交流：6.6.得出结论：得出结论：培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？酵母

4、菌在开始一段时间呈酵母菌在开始一段时间呈“J”J”型增长，随着时间型增长，随着时间的推移，由于资源和空间有限，呈的推移，由于资源和空间有限，呈“S”S”型增长。型增长。 连续培养连续培养5 5天，每天用显微镜和血球计数板计天，每天用显微镜和血球计数板计数出酵母菌种群密度。数出酵母菌种群密度。各小组汇报实验结果，结合前各小组汇报实验结果，结合前4 4天的结果，画天的结果，画出酵母种群增长的出酵母种群增长的曲线图曲线图并进行分析。并进行分析。 酵母菌在开始一段时间呈酵母菌在开始一段时间呈“J”J”型增长，但随着型增长，但随着时间的推移，由于资源和空间有限，将呈时间的推移，由于资源和空间有限，将呈“

5、S”S”型增长，并最终将全部死亡。型增长，并最终将全部死亡。 3 3设计实验：设计实验：将将10mL10mL无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管无菌马铃薯培养液或肉汤培养液加入试管中；中；将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀；将酵母菌接种入试管中的培养液中混合均匀；将试管在将试管在2828条件下连续培养条件下连续培养7d7d；每天取样计数酵母菌数量；每天取样计数酵母菌数量；分析结果，得出结论。分析结果，得出结论。如何取样计数如何取样计数？记录表怎样设计记录表怎样设计？计数时有哪些注意事项计数时有哪些注意事项？血球计数板血球计数板 血球计数板是一种专门用于计算血球计数板是一种专门用于计算较大单

6、细胞微生物较大单细胞微生物数量数量的仪器，由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中的仪器，由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中有四条下凹的槽，构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网。间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网。 大方格中方格小方格计数室计数室计数室分为计数室分为25中格中格（双线边双线边）每一中格又分为每一中格又分为16小格小格计数室是由计数室是由_个小格组成个小格组成2516=400如何计数？如何计数？五点取样法五点取样法样方法样方法每每mL培养液中酵母菌数量培养液中酵

7、母菌数量= =A ( (平均每个中格酵母细胞数平均每个中格酵母细胞数) )25104稀释倍数稀释倍数A1A2A5A3A4A=(AA=(A1 1+A+A2 2+A+A3 3+A+A4 4+A+A5 5)/5)/5A1A2A3A4计数室分为计数室分为16中格中格（双线边双线边）每一中格又分为每一中格又分为25小格小格= =A ( (平均每个中格酵母细胞数平均每个中格酵母细胞数) )25104A=(AA=(A1 1+A+A2 2+A+A3 3+A+A4 4)/4)/4稀释倍数稀释倍数第第 1 1 天天第第 4 4 天天第第 6 6 天天第第 7 7 天天死亡死亡酵母菌数量变化记录表酵母菌数量变化记录

8、表计数时有哪些注意事项？计数时有哪些注意事项？ 从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻轻震荡几次轻轻震荡几次； 如果酵母菌浓度过大，应先如果酵母菌浓度过大，应先稀释稀释。 对于压在中格界线上的酵母菌，一般只取对于压在中格界线上的酵母菌，一般只取相邻两边及夹角相邻两边及夹角计数；计数；对于已经出芽的酵母菌，对于已经出芽的酵母菌，芽体达到母细胞大小一半芽体达到母细胞大小一半时，即可时，即可作为两个菌体计算；作为两个菌体计算；已死亡的酵母菌不计数已死亡的酵母菌不计数。每个样品一般计数三次，取其每个样品一般计数三次，取其平均值平均值。培养液中酵母菌种群数量的

9、变化培养液中酵母菌种群数量的变化 死亡死亡血球计数板的使用方法步骤血球计数板的使用方法步骤 计数：计数：稍待片刻（约稍待片刻（约5min5min），待酵母菌细胞全部沉降到计数室），待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下找到底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下找到计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。计数室所在位置后，再转换高倍镜观察、计数并记录。 镜检计数室：镜检计数室： 在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数。则需清洗，吹干后才能进行计数。 加样品：加

10、样品： 将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片，片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防止产生让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防止产生气泡，气泡，充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片之间的矩形边缘为宜之间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去。多余培养液可用滤纸吸去。血球计数板的使用注意事项血球计数板的使用注意事项 从试管中吸出培养液进行计数之前，要将试管轻从试管中吸出培养液进行计数之前，

11、要将试管轻轻轻震荡震荡几下，这样使酵母菌分布均匀，防止酵母凝聚几下，这样使酵母菌分布均匀，防止酵母凝聚沉淀，提高计数的代表性和准确性，求得的培养液中沉淀，提高计数的代表性和准确性，求得的培养液中的酵母菌数量误差小。的酵母菌数量误差小。 如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培养液进行对培养液进行稀释稀释以便于酵母菌的计数。具体方法以便于酵母菌的计数。具体方法是：摇匀试管，取是：摇匀试管，取1mL1mL酵母菌培养液，加入成倍的酵母菌培养液，加入成倍的无菌水稀释，稀释无菌水稀释，稀释n n倍后，再用血球计数板计数，所倍后，再用血球计数板计数，所得数值

12、乘以稀释倍数。以每小方格内含有得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有4 45 5个酵个酵母细胞为宜。特别是在培养后期的样液需要稀释后母细胞为宜。特别是在培养后期的样液需要稀释后计数。计数。 对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数，一般可采取两边上的菌体数，一般可采取“数上线不数下线，数数上线不数下线，数左线不数右线左线不数右线”的原则处理，另两边不计数。的原则处理，另两边不计数。 对每个样品可计数三次，再对每个样品可计数三次，再取其平均值。取其平均值。 计数时应不时计数时应不时调节焦距调节焦距，才能观察到不同深度的，才能观察到不同深度的

13、菌体。菌体。 血球计数板使用后，用自来水冲洗，血球计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬切勿用硬物洗刷物洗刷，以免损坏网格。，以免损坏网格。 计算公式计算公式 设平均每个中格酵母细胞数为设平均每个中格酵母细胞数为A A，菌液稀释倍数为，菌液稀释倍数为B B，每，每 一大方格的容积为一大方格的容积为0.1mm0.1mm3 3，因，因1mL=1cm1mL=1cm3 3=1000mm=1000mm3 3。 (1)16(1)16格格2525格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式: : 1ml 1ml菌液中的总菌数菌液中的总菌数=1000=1000* *1010* *A A* *1616* *B=3

14、2000AB=32000A* *B(B(个个) ) (2) 25 (2) 25格格x16x16格的血球计数板计算公式格的血球计数板计算公式: : 1ml 1ml菌液中的总菌数菌液中的总菌数=1000=1000* *1010* *A A* *2525* *B=50000AB=50000A* *B(B(个个) )1.1.怎样进行酵母菌的计数？怎样进行酵母菌的计数？ 对一支试管中的培养液对一支试管中的培养液( (可定为可定为10ml)10ml)中的酵母菌中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于

15、先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸盖玻片边缘，让培养液自行渗入，多余培养液用滤纸吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底吸去，稍待片刻，待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内部，将计数板放在载物台的中央，计数一个小方格内的酵母菌数量，再以此为根据，估算计算中的酵母菌的酵母菌数量，再以此为根据，估算计算中的酵母菌总数，盖玻片下，培养液厚度为总数，盖玻片下，培养液厚度为 0.1mm0.1mm，可算出，可算出10ml10ml培养液中酵母菌总数的公式：培养液中酵母菌总数的公式：2.52.510104

16、4x(xx(x为小方格内为小方格内酵母菌数酵母菌数) )2.2.从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻从试管中吸出培养液进行计数之前，建议你将试管轻轻振荡几次。这是为什么？振荡几次。这是为什么？3.3.本探究需要设置对照吗？如果需要请讨论对照组应怎样本探究需要设置对照吗？如果需要请讨论对照组应怎样设计和操作；如果不需要，请说明理由。设计和操作；如果不需要，请说明理由。4.4.需要做重复实验吗？需要做重复实验吗？ 目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，以保目的是使培养液中的酵母菌均匀分布，以保证估算的准确性，减少误差证估算的准确性，减少误差。 不需要，本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定不需要，本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化，只要分组实验，获得平均数条件下的种群数量变化，只要分组实验，获得平均数值即可。值即可。 不用重复，只要分组实验获得平均值即可。不用重复，只要分组实验获得平均值即可。5.5.怎样记录结果？记录表怎样设计？怎样记录结果？记录表怎样设计？6.6.如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应采取怎样如果一个小方格内酵母菌过多，难以计数，应采取怎样的措施？的措施？第第1 1天天第第2 2天天第第3 3天天第第4 4天天