酶法在中药提取中应用进展

1、酶法在中药提取中应用进展关键词：酶法；中药；提取；综述中图分类号：r284. 2文献标识码：a文章编号： 1005-5304 (2013) 09-0110-03酶的反应具有专一性高、催化活性强及作用条件温和等 特点。自20世纪以来，酶化学与多学科的相互渗透得到了 迅速发展，特别是在医药和食品领域发挥了巨大作用。酶法 早期被广泛应用于食品、饲料工业及天然产物的提取，20世 纪90年代，国内许多学者开始将酶的特性与生物细胞的结 构联系起来，陆续开展了将生物酶用于天然药物及中药的辅 助提取，以达到提高有效成分浸出率的目的，取得了一定的 效果1。笔者现就近年来酶法在提取中药各类有效成分中 的应用作一综

2、述。1酶法在中药有效成分提取中的应用1. 1多糖类在提取多糖的应用中，董氏等2选用纤维素酶提取首 乌藤多糖成分，有效地软化和溶胀细胞壁，从而改变细胞壁 的通透性，在不破坏首乌藤多糖成分结构的同时使其快速浸 出，且该工艺较为简单、耗能低、提取效率高，与传统水提 醇沉法多糖得率(4.7%)和多糖含量(24. 07%)相比，分别提高1.57%和6. 96%。廉氏等3采用超声波结合复合酶法提 取沙枣多糖，因沙枣为果实类药材，沙枣中的果胶会造成提 取液黏度增大，极大地影响有效成分的扩散。故在第一阶段 通过纤维素酶和果胶酶联用，酶解细胞表面结构及胞间连接 物，降低提取液的黏度，使溶于水的胞内多糖浸出率增加

3、； 第二阶段通过超声波空化效应对原料的破碎作用，加速欲提 取成分的扩散释放并充分与溶剂混合，有利于有效成分的溶 出。2种工艺的结合不仅提高了提取效果，且二者联用还能 弥补彼此间的不足。许氏等4通过采用纤维素酶和果胶酶 组成的复合酶法与热水浸提法提取竹节参中多糖成分的工 艺比较研究，得出复合酶法提取效果较好，多糖得率为 14. 3%,与热水浸提法多糖成分得率11.61%相比明显提高。 最佳工艺条件为料液比1 : 50,纤维素酶的质量分数1. 2%, 果胶酶的质量分数1.0%, ph值为5.0,温度为50 °c,酶解 时间2 h, 90 °c灭酶和浸提2 ho1. 2黄酮类化合

4、物许氏等5在用酶法提取银杏总黄酮的研究中，由于银 杏叶总黄酮在植物细胞中以昔元和昔的形式存在，故不宜以 醇水体系提取，而利用转昔酶和糖等糖基供体将极性低的黄 酮昔元、黄酮昔转为极性高的黄酮昔，提高了总黄酮在醇水 中的提取率。利用suhong475转昔酶强化银杏叶总黄酮提取 的结果表明：温度在5055 °c, ph值为6.06. 5,反应时 间为10h时，总黄酮的提取率比对照组增加44. 0%o欧氏等 6在用酶法辅助提取绞股蓝中总黄酮工艺优化中，通过响 应面法确定纤维素酶提取绞股蓝中总黄酮的最佳工艺条件 为：酶解温度为49 °c, ph值为3.9,酶解时间为2.5 h, 酶用

5、量为120 u/ml，总黄酮得率为0.357%,与传统溶剂浸 提法的总黄酮得率0. 266%相比提高了 25. 0%o旷氏等7经 单因素试验和正交试验考察ph、酶解时间、酶解温度、酶的 用量4个因素对水酶法与超声相结合提取连翘中总黄酮工艺 的影响，结果显示：在纤维素酶的用量为1.2%、ph值为6.0、 酶解温度为50 °c的条件下酶解4 h,连翘总黄酮的提取率 为10.54%。王氏等8采用纤维素酶和果胶酶组成的复合酶 法提取苦瓜叶中的总黄酮，苦瓜叶总黄酮的提取率可达到 3. 13%,与直接醇提工艺相比总黄酮提取率提高了 30. 0%以 上，提取工艺为：纤维素酶浓度为0.8 mg/ml

6、,果胶酶浓度 为0. 5 mg/ml,提取温度为55 °c,提取介质ph值为4. 5的 条件下酶解140 mino1.3昔类化合物郭氏等9利用基因工程菌甲醇毕赤酵母生产的漆酶提 取黄英总皂昔，经正交试验优化后，发现漆酶提取的最佳工 艺为：漆酶加入量1359 u/g （黄茂粗粉），ph值为4.0,在 40 °c的温度下酶解1.5 h,之后补水至总体积为50 ml,最 后在100 °c温度下提取1.5 ho结果显示，经过漆酶酶处理 后的提取率比未经酶处理的提取率提高65. 6%o郑氏等10 采用二次通用旋转试验研究苦杏仁酶水解梔子昔制备梔子 昔元的工艺，试验以ph值、

7、反应温度、反应时间和酶加入 量4个因素对工艺进行考察，在ph值为5.25、反应温度 50. 5 °c、反应时间90 min.酶加入量1 ： 10的条件下，采 用理化性质及核磁共振波谱鉴定产物结构，高效液相色谱峰 面积归一化法检测产物纯度。结果显示：产物梔子昔元得 率34. 5%,质量分数为99. 6%o樊氏等11用酶解法与微波 法相结合提取积雪草总昔，经正交试验表明，提取最佳工艺 条件为：酶解温度45 °c,液固比36,酶解时间30 min，微 波辐射110 so在此条件下积雪草总昔得率为27.10%,分别 是水煎煮、索氏提取的124%、183%o耗时分别为上述两方法 的

8、1/4、 l/6o1.4生物碱类李氏等12研究不同提取法在提取川乌过程中对生物 碱的影响中发现，纤维素酶提取法具有明显的优势。纤维素 酶法：乌头碱、乌头总碱的提取率分别为0.002447%、 0. 244410%；半仿生提取法：乌头碱、乌头总碱的提取率分 别为0.001735%、0. 189340%；乙醇回流提取法：乌头碱、乌 头总碱的提取率分别为0.001869%、0. 200720%o其最佳酶解 提取工艺条件为：酶用量3 mg/g,温度为45 °c, ph值为 4.5,酶解时间为5 h。徐氏等13用超声-酶法联合技术提 取黄柏中小榮碱，与未经纤维素酶处理的对照组比较，具有 提取效

9、率高、省时、高效节能等优点。提取最佳工艺条件为: 水浴时间2.5 h,超声功率80%,加酶量20 mg/g,水浴温度 60 °co陈氏等14将白英药材经纤维素酶处理后用乙醇回 流提取总生物碱，通过正交试验优化酶处理工艺参数。结果 显示，温度50 °c.酶反应时间3 h、ph值为4.5、酶质量 浓度为1. 6 mg/l的条件下酶法提取率为传统提取法的5倍。4许彬，陈平，陈新酶法提取竹节参中多糖成分的工艺 研究j.中国中药杂志,2008, 33 (13)： 1549-1551.5许明淑，邢新会，罗明芳，等银杏叶黄酮的酶法 强化提取工艺条件研究j.中国实验方剂学杂志，2006,

10、12(4)： 2-4.6欧阳辉，田启建，余佶，等酶法辅助提取绞股蓝 中总黄酮工艺优化j.中草药,2011, 42 (5)： 886-889.7旷超阳，欧阳玉祝，陈实.水酶法协同超声提取连 翘总黄酮工艺条件优化j.食品与发酵科技，2012, 48 (1)： 49-51.8王文渊，周振华，龙红萍复合酶法提取苦瓜叶总 黄酮的研究j.中国食品添加剂,2011 (4)： 107-112.9郭梅，路福平，刘敏尧，等.基因工程菌漆酶用于 提取黄英总皂式的研究j.食品研究与开发,2008, 29(11)： 75-78.10郑礼胜，倪娜，刘向前二次通用旋转试验设计优 化梔子昔的酶解工艺j中草药，2012, 43

11、 (7)： 1340-1343.11樊亮，王承潇，陈惠丹，等用酶解预处理-微波 法提取积雪草总昔j.华东理工大学学报，2009, 35 (4)： 591-595.12李永生，林强，郑来丽，等.川乌的纤维素酶酶解 提取工艺研究j 中草药,2009, 40 (11)： 1735-1739.13徐艳，刘少霞，孙娟超声-酶法提取黄柏中小漿 碱的工艺研究j时珍国医国药，2007, 18 (6)： 1460-1462.14陈晓琳，张岩柏，邓振雪，等.酶解法提取白英中 总生物碱的工艺研究j.西北药学杂志，2012, 27 (4)： 291-293.l15张凌裳，王红连，杜郭君，等杜仲叶粉提取绿原 酸工艺的优

12、化j安徽农业科学，2009, 37(17)： 8162-8164.16张利，何林芯，冯喜文，等酶法提取车前草中熊 果酸的工艺研j安徽农业科学,2010, 38(11)： 5846-5847.17陈华，辛广，张兰杰，等.没药中挥发性成分的酶 提取及 gc/ms 分析j质谱学报，2007, 28 (3)： 153-158.18刘小草，丘泰球.酶解-亚临界水提取沙姜有效成 分的研究j食品科技，2010, 35 (3)： 215-21819马桔云，吕芳，于喜水，等.纤维素酶用于中药穿 心莲提取的初步研究j黑龙江医药，2000, 13 (1)： 16-17.20喻春皓，张萍，师静静响应曲面法优化银杏叶菇

13、内酯的纤维素酶辅助提取工艺j亚太传统医药，2009, 5 (11)： 20-23.21 苗敬芝，高淑云，曹泽虹，等酶解牛夢提取膳食 纤维工艺研究j食品科学,2008, 29 (10)： 199-202.22 杨义雄，王宫多酶体破壁提取蜂花粉中活性蛋白 的工艺研究j.福建中医学院学报，2009, 19 (3)： 24-26.23 郑玲玲，苗春雷，李志勇老鹳草酶解法提取工艺 优化j.延边大学医学学报，2010, 33 (2)： 111-113.24 刘亚南，张志胜，孙克岩，等中性蛋白酶酶解提 取牡蛎牛磺酸工艺条件研究j食品工业科技，2011, 32(10)： 308-309.25 徐明，岳喜庆酶解法制备鹿茸多肽的研究j食 品工业科技，2012,33 (5)： 205-207.26 徐大伦，欧昌荣，杨文鸽，等纤维素酶法提取浒 苔多糖的工艺条件j海洋渔业，2005, 27 (1)： 85-88.27崔艳丽,王培培，周军明,等.复合酶酶解法提取褐藻糖胶及其结构分析和抗氧化性研究j浙江大学学报,2011, 38 (5)： 536-540.28 刘红梅，李栋，樊梦丹，等灰树花多糖的复合酶-微