实训一 微量移液器的使用

1、实验室安全及管理1.实验室守则2.实验室安全操作规程3.主要物质的危险，有害性4.卫生PPT模板下载： 行业PPT模板： 节日PPT模板： PPT素材下载： PPT图表下载： 优秀PPT下载： PPT教程： Word教程： Excel教程： 资料下载： PPT课件下载： 范文下载： 试卷下载： 教案下载： 实验目的实验目的掌握微量移液器的操掌握微量移液器的操作技术作技术实验原理实验原理 操作操作按钮、控制螺杆和活塞纵向连按钮、控制螺杆和活塞纵向连成一体，活塞腔内活塞的上下移动控制成一体，活塞腔内活塞的上下移动控制移液过程。压下操作按钮时，带动控制移液过程。压下操作按钮时，带动控制螺杆并使活塞向

2、下移动，排出活塞腔内螺杆并使活塞向下移动，排出活塞腔内的气体；松开按钮的同时，复位弹簧使的气体；松开按钮的同时，复位弹簧使活塞恢复原位，吸头内吸入一定量的液活塞恢复原位，吸头内吸入一定量的液体；再次按钮，排出吸头内的液体，完体；再次按钮，排出吸头内的液体，完成一次移液操作成一次移液操作仪器材料仪器材料微量移液器；吸头；酶标仪；96孔板；考马斯亮蓝；G250染色液；蛋白质标准溶液；样品溶液；稀释液移液器移液器移液器移液器手动手动电动电动种类种类移液器移液器常量常量微量微量种类种类结构结构按钮、体积调节轮、手柄、按钮、体积调节轮、手柄、体积显示窗、控制螺杆、弹体积显示窗、控制螺杆、弹簧、活塞、密封

3、圈、套筒簧、活塞、密封圈、套筒（又称吸头连接圆锥）以及（又称吸头连接圆锥）以及吸头弹射器吸头弹射器操作规程操作规程正向移液正向移液反向移液反向移液正向移液法正向移液法 1）操作按钮按至第一停点。）操作按钮按至第一停点。 2）移液器吸头尖插入液体样品液面下）移液器吸头尖插入液体样品液面下23mm处，慢慢松开按钮吸入液体。待吸入液处，慢慢松开按钮吸入液体。待吸入液体平衡后，移出加样器。体平衡后，移出加样器。 3）移液器吸头放入容器内，尽可能使吸头尖）移液器吸头放入容器内，尽可能使吸头尖下伸至容器最低处，并贴住容器内壁，轻轻下伸至容器最低处，并贴住容器内壁，轻轻压下操作按钮至第一停点，排出液体。约压

4、下操作按钮至第一停点，排出液体。约1秒秒钟后，继续下压操作按钮至第二停点，待吸钟后，继续下压操作按钮至第二停点，待吸头内液体彻底排出后，撤出加样器。头内液体彻底排出后，撤出加样器。 4）松开按钮，使操作按钮回复至起点。）松开按钮，使操作按钮回复至起点。反向移液法反向移液法 1）操作按钮按至第二停点。）操作按钮按至第二停点。 2）移液器吸头尖插入液体样品液面下）移液器吸头尖插入液体样品液面下23mm处，慢慢松开按钮吸入液体。待吸入处，慢慢松开按钮吸入液体。待吸入液体平衡后，移出加样器。液体平衡后，移出加样器。 3）移液器吸头放入容器内，尽可能使吸头）移液器吸头放入容器内，尽可能使吸头尖下伸至容器

5、的最低处，并贴住容器内壁尖下伸至容器的最低处，并贴住容器内壁，轻轻压下操作按钮至第一停点，排出液，轻轻压下操作按钮至第一停点，排出液体，撤出加样器。（吸头内的液体可以随体，撤出加样器。（吸头内的液体可以随吸头弃去或放回原样品管内）吸头弃去或放回原样品管内）反复移液法反复移液法对于相同的样品、相同体积的对于相同的样品、相同体积的液体，可以采用重复移液法液体，可以采用重复移液法保养维护保养维护应用应用考马斯亮蓝蛋白质含量的测定考马斯亮蓝蛋白质含量的测定原理根据蛋白质的理化性质根据蛋白质的理化性质，考马斯亮蓝，考马斯亮蓝G-250G-250是是比色法与色素发结合的复合方法。考马斯亮蓝比色法与色素发结

6、合的复合方法。考马斯亮蓝G-250G-250是一种染料，在游离状态下呈是一种染料，在游离状态下呈棕红色棕红色，当与蛋白质结合后呈当与蛋白质结合后呈蓝青色蓝青色。在一定范围内，。在一定范围内，也就是蛋白质含量在也就是蛋白质含量在01000ug01000ug范围内，蛋白质范围内，蛋白质- -色素结合物色素结合物595nm595nm下的吸光度与蛋白质含量成下的吸光度与蛋白质含量成正比，所以可用比色法测定正比，所以可用比色法测定标准孔样品孔12345678916稀释液（l）20191816128400蛋白质标准溶液 （l）01248121620-样品溶液（l）-20考马斯亮蓝蛋白质含量的测定考马斯亮蓝蛋白质含量的测定2. 2. 各孔加入各孔加入200200l G250l G250染色液