白芷香豆素类成分的提取分离和鉴定

1、白芷香豆素类成分的提取分离和鉴定二、实验目的1. 淫习用冇机溶剂捉取香豆素类成分的方法。2. 学习用柱层析色谱分离香豆素类化合物的方法。三、实验操作（一）总提取物的制备取口芷生药粗粉200g,用石油瞇内酮（4:1）冋流提取3次，毎次250ml,分别 捉取2,l,lh,合并捉取液，回收溶剂至干，得总捉取物月2.5go（-）柱层析色谱分离取总提取物1.5g,用5g硅胶吸附，在25x4cm的色谱柱上干法上样，进行低压 柱层析色谱。色谱条件：吸附剂：硅胶h20g （薄层色谱用）洗脱剂:石油醛丙酮8:1, 6:1, 4:1, 3:1各80mlo压力:0.50.7 kg/cm2收集：58ml/份用下述薄层

2、色谱条件进行检识，将相同斑点的流分合并，用石油瞇乙酸乙酯（&2）的溶剂重结品12次，分别得到单体化合物，测定熔点。（三）鉴定1 薄层色谱吸附剂：硅胶（薄层色谱用）展开剂:（1）石油醛丙酮8:2； （2）苯乙酸乙酯8:2样品：白芷总提取物，异欧前胡素，欧前胡素标准品：异欧前胡素，欧前胡素显色：紫外灯（365nm）下观察荧光。2.光谱测定'h-nmr谱:用cdcb作为溶剂。一、实验目的1.掌握连续回流提取法的原理和方法；2.掌握重结晶的原理和方法二、实验原理白芷为伞型科植物白芷的干燥根。具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓的功能。 白芷屮的冇效成分为香豆素类化合物。用单位白芷的提取物（

3、英屮主要是香豆素 类化合物）制成的制剂对功能性头痛、口瘢风的临床疗效较好。异欧丽胡素和欧 前胡索为片芷的主要有效成分。常'见的提取方法有：溶剂提取法、水蒸气蒸谓法、升华法。其屮，溶剂提取 法应用最广。溶剂提取法的原理：根据相似相溶原理，选择与化合物极性相当 的溶剂将化合物从植物组织屮溶解出来，同时，由于某些化合物的增溶或助溶作 用，其极性与溶剂极性相羌较大的化合物也可溶解出来。溶剂提取法一般包括浸 渍法、渗漉法、煎煮法、回流提取法、连续回流提取法等，其实用反胃和特点各 有所不同。连续回流提取法具有提取效率高、溶剂用量少等优点。本实验利用连续冋流提取法提取口芷中的香豆素。三、试剂与仪器试

4、剂：乙醇，白芷粗粉，石油瞇，乙瞇，蒸馆水，内酮。 仪器：烧杯，圆底 烧瓶，三角烧瓶，索氏捉取器，电子天平，恒温水浴，硅胶薄层板，色谱缸，球 形冷凝管，真空泵。四、实验步骤与记录（1）. 口芷中香豆素的提取 取口芷粗粉30g,置于索氏提取器中，加入95% 的乙醇300ml, 80°c恒温水浴凹流2h,捉取液减压浓缩至糖浆状。用丙酮溶解并 转移至50ml三角烧瓶中，放置结晶，抽滤后，再重结晶，所得产品干燥称重， 计算得率。（2）.产品的薄层色谱鉴定色谱材料：硅胶薄层板点样：产品，欧前胡素和异欧而胡素标准品。展开剂：右油醯乙醸1:1显色：置紫外光灯（365nm） f,观察斑点颜色。展开方式

5、：预饱和后，上行展开。五、实验数据处理及结果%1 .索氏提取两个小吋后得到棕色的澄明液体，真空抽提后得到深棕色的糖浆状 浓稠液体。丙酮转移静置后析出淡黄色晶体，精制后得到白色晶体。香豆素样晶中含有欧前胡素和异欧前胡素两种物质，并且还含有其他两种未知物 质，在紫外光照射下显紫色%1 .产品为无色晶体。六、注意事项抽滤操作要小心，以免倒吸。七、问题讨论1）连续回流提取法的原理是什么？有何特点？答：原理：将装好药材粉末的滤纸袋屮药粉高度应低于虹吸管顶部，自冷凝 管家溶剂入烧瓶内，水浴加热。溶剂受热蒸发，遇冷后变为液体冋滴入提取器中, 接触药材开始进行浸捉，待溶剂液而高于虹吸管上端时，在虹吸作用下，浸

6、出液 体流入烧瓶，溶剂在烧瓶内因受热继续气化蒸发，而被提取的药物被溶剂带入烧 瓶内逐渐累积。特点：不断循环利用提取药物的溶剂，可使溶剂的利用率提高2）对比浸渍法、渗漉法、煎煮法、冋流提取法和连续冋流提取法的使用范围和 特点答：浸渍法适用于对热不稳定的成分及含大量淀粉、树胶、果胶、黏液质中药 的提取特点：本法简单可行，但浸出率低，如用水注意防腐渗漉法适用丁贵重药材、毒性药材及高浓度制剂；也可用于冇效成分含量较低的药材 提取。 特点：溶剂利用率高，有效成分浸出完全，可直接收集浸出液，该法常用不同浓度的乙醇或白酒做溶剂，故应防止溶剂的挥发损失。煎煮法 煎煮法适用于有效成分能溶于水，且对湿、热均稳定的

7、药材。特点：该法浸提成分范围广，但往往杂质较多，给精制带來不利，且煎出液易霉 败变质。 冋流提取法适用于对热稳定的成分。特点：提取效率高；溶剂消 耗量大。 连续冋流提取法适用于对热稳定的成分。特点：提取效率最高; 节省溶剂；提取时间较长。回流提取法是用乙醇等易挥发的冇机溶剂提取原料成分，将浸出液加热蒸镭，其 屮挥发性溶剂锚出后又被冷却，重复流回浸出容器屮浸提原料，这样周而复始， 直至有效成分冋流提取完全的方法。冋流法提取液在蒸发锅中受热时间较氏， 故不适用于受热易遭破坏的原料成分的浸出。回流的a的是为了节省溶剂。乙醇是易挥发的液体，如果不采用回流提取法的话, 在提取的过程中乙醇会因为蒸发消耗。这吋候就需要不断地补充乙醇的量，不仅 操作繁琐而且浪费。冋流提取的好处就是可以使乙醇蒸汽冷凝后再冋到烧瓶内达 到反复循环的作用