小儿复方氨基酸注射液(19AA-I)细菌内毒素检查的可行性研究-儿科医学论文

1、小儿复方氨基酸注身寸液(19aa-i)细菌内毒素检查的可行性研究儿科医学论文小儿复方氨基酸注射液(19aai)细菌内毒素检查的可行性研究程春萍周树美山东齐都药业有限公司,山东淄博255400摘要目的对小儿复方氨基酸注射液(19aa-i)进行凝胶法干扰试验，建 立小儿复方氨基酸注射液(19aa-i)细菌内毒素的检查方法。方法按2010年 版中国药典(二部)细菌内毒素检查法，用不同厂家的蜜试剂对不同批 号的小儿复方氨基酸注射液(19aa-i)分别进行干扰试验。结果小儿复方氨基 酸注射液(19aa-i)进行16倍稀释的溶液对细菌内毒素检查无干扰作用。结论 小儿复方氨基酸注射液(19aa-i)进行细菌

2、内毒素检查是可行的。关键词小儿复方氨基酸注射液(19aa-i);细圉内毒素检杳法；干扰湖佥中图分类号r927文献标识码a文章编号16725654( 2013 )05 ( b ) -0115-02小儿复方氨基酸注射液(19aa-i)为静脉用胃肠外营养输液。用于早产儿、低体重儿及各种病因所致不能经口摄入蛋白质或摄入量不足的新生儿；各种创伤：如烧伤及外伤及手术后等高代谢状态的小儿；各种不能经口摄食或摄食不足的急、慢性营养不良的小儿，如坏死性小肠结肠炎、急性坏死性胰腺炎、化疗药 物反应等。笔者参照中国药典2010年版进行试验,建立该品种的细菌内毒 素检查法，报道如下。1仪器与试药160型电热恒温培养箱

3、（山东潍坊精鹰医疗器械有限公司）；xw-80a旋涡混合器（上海医大仪器厂x细菌内毒素工作标准品（规格:每支90eu/支，批 号：150601-201071 ）由中国药品生物制品检定所提供；细菌内毒素检查用水（bet水，规格：每支5 ml ,批号：1210110）;蜜试剂（tal ） a （规格：每 支 0.1 ml ,批号:1212241 ,灵敏度:0.25 eu/ml ;批号:1111221 ,灵敏 度:0.03 eu/ml ;批号:1205111 ,灵敏度:0.06 eu/ml ）购自湛江安度斯生 物有限公司，蜜试剂（tal ） b （规格:每支0.1 mlz批号：11041012 ,灵敏

4、 度:0.25 eu/ml ;批号:11060312 ,灵敏度:0.03 eu/ml ;批号:11020012 , 灵敏度：0.06 eu/ml ）购自福州新北生化工业有限公司z经灵敏度复核均符合 规走。小儿复方氨基酸注射液（19aa-i ）山东齐都药业有限公司,批号： c13012801. c13012802. c13012803o2方法与结果2丄细菌内毒素限值的确定根据注射剂安全性检查法应用指导原则要求大输液细菌内毒素限值为0.50 eu/ml02.2供试品干扰预试验用于药品检验的市售賞试剂灵敏度一般在0.25 0.03 eu/ml之间，根据公 式mvd二cl/入，供试品相对应的有效稀释倍

5、数为2倍、4倍、8倍、16倍。取 供试品用bet水按上述系列浓度稀释，取灵敏度为0.25 eu/ml上述两家的賞 试剂进行试验，每一稀释度做2管z同时做阴性对照z结果见表lo从表1可见，供试品在稀释8倍、16倍浓度下对试验均没有干扰作用。2.3供试品正式干扰试验为最终确认供试品在稀释8倍或16倍浓度是否存在干扰因素的影响,按现 行版中国药典方法进行试验。取3批供试品，分别加bet水8倍稀释，用bet水和供试品稀释液将细 菌内毒素工作标准品稀释成2入、入、0.5入、0.25a浓度的bet水系列细菌内毒素 溶液和供试品稀释液系列细菌内毒素溶液，用灵敏度为0.06 eu/ml蜜试剂进行 试验，结果见

6、表2。tal供试品批号溶液供试品怖释倍数2侑4 倍“et水供试品溶液 1212241ci3oi28oi供试品阳性 + + + +供试品溶液 11041012(13012801供试品阳性 »2供试品（8倍秫释）干扰试验结果tal供试品批号内总董浓nr（ev mu2aa0.5x0.25ancbet水+ + + w1供试品干忧预试验结果c13o128o11205111cbo12so2ci5012803hi t水11021112c13012801c13012s02c13o128o?从表2结果可见,2入管均为阳性，入、0.5入、0.25a管均为阴性，说明8倍 稀释具有一定的干扰作用z因此进行1

7、6倍稀释干扰实验。3批供试品用bet水进行16倍稀释，用灵敏度为0.03 eu/ml賞试剂按23.1进行试验，结果见表3o从表3结果可见，2入、入管均为阳性，0.5入、0.25入管均为阴性，对于入二0.03eu/ml的2组蜜试剂的es和et均在0.5入2.0入范围内，说明供试品在16倍稀释后的浓度对上述两个不同厂家的愛试剂无干扰影响。2.4供试品检查试验供试品在16倍稀释后，按现行中国药典细菌内毒素检查法分别用两个厂家蜜试剂考察其内毒素限值,结果见表4。«4 供试品细菌内毒素检查结果tal供试品批号供试品ppc阳性阴杵c13012801+ + +1111221c13012802+ +

8、 +c130i2803+ +c13012801+ + +11060312c13o128o2十十+ +<'13012803十+ + bet水+ + + + + + + 0.03c13o128o1+ + +令 + + +0.031111221c13o128o2 + + + * *0.03ci3oi28o3 + + + 0.03bet水 4 * * + * 0.03c13o128o1 + + +十+ +0.0311060312c13o128o2 +0.03c13o128o3 + + 4 4-440.03«3 供试品（16借稀x）干扰试盼结果供试品批号taj,o.25aa内寿素

9、浓度（eu/mu0.5ao.25anc结果表明,用两个厂家蜜试剂对3批供试品进行细菌内毒素检查，供试品每1 ml中含细菌内毒素量均小于0.50eu。3讨论小儿复方氨基酸注射液（19aa-i）是目前为止临床应用氨基酸种类最多的复 方氨基酸注谢液；国际公认的小儿氨基酸先进配方，最佳的必需氨基酸/总氮比 值,生物利用度高,保证氨基酸被充分利用；最佳小儿人体利用率，迅速促进患 者康复；副作用少，安全性高；渗透压低，对血管刺激性小，耐受性好。目前国 家药品标准中该品种采用家兔热原法,在产品的生产工艺验证及中间产品控制过 程中，由于该法检验约耗时4 h左右，不能及时出具检测结果，从而影响生产及 验证的正常

10、进行,另由于该法存在生物学差异,不易标准化,检测成本高,灵敏度差等原因，采用细菌内毒素检查法取代家兔法可解决这些问题。我们用不同厂 家、不同批号的壷试剂进行的系列干扰试验，验证了方法的可靠性。因方法简便、 灵敏准确、检测成本低，已作为我公司小儿复方氨基酸注射液(19aa-i)细菌 内毒素检查中间产品控制及产品工艺验证细菌内毒素检查控制标准，经多次验证 方法安全可靠。本试验在参考中国药典2010年版细菌内毒素检查法的基础上，建立了 小儿复方氨基酸注射液(19aa-i)细菌内毒素检查法为：取原液作1:16稀释z 按中国药典2010年版二部附录xi e检查，每1 ml中含内毒素量应小于0.50eu。参考文献1国家药典委员会中华人民共和国药典2010年版(二部)s.北京：中国 医药科技出版社，2010 :附录xi e.2范志云，国明眼用平衡盐溶液细菌内毒素检查标准的制定j齐鲁药事,