amd患者抗vegf治疗效果的相关因素研究

1、k康弘生迥kanghong biotech【实验设计】amd患者抗vegf治疗效果的相关因素研究负责人：尹晓光报告编号：撰写人：尹晓光签名审核/批准：日期部门负责人日期项口负责人日期关键词:kh902湿性amd基因检测免疫分析预测仅限康弘生物使用归档编号：归档人：h期：目录1. 研究目的地32. 缩写词33. 背景介绍34. 检测指标114外周血114.2眼科检测125. 可行性分析136. 文献131研究目的从amd发生和发展相关的易感基因、环境因索、炎症反应和vegf信号通 路等因素屮筛选出一些检测指标，并研究这些指标对kh902治疗湿性amd疗 效的预测潜力，为今后临床预测kh902的疗

2、效提供实验依据。2. 缩写词3. 背景介绍amd（老年性黄斑变性）是60岁以上老年人致盲的主要原因，临床分为干性 （非渗出性，或萎缩性）和湿性（渗出性，或血管新生性）2种类型。湿性amd 的临床进展期特征是脉络膜血管新生（cnv）,结果可导致病人视力快速丧失。amd疾病的具体发病机制尚不清楚，大量研究结果表明amd是由环境和 遗传等因索干预的一种综合病症。目前提出多种amd发病机制的假说，诸如氧 化应激假说、老年化、炎症免疫假说等。年龄是影响amd主要的因素z ，其 他危险因素有吸烟、肥胖、种族、家族史、性别及血压等。近年來，许多重要的 amd相关基因陆续被报道，包括补体因子h（cfh）、补体

3、因子b（cfb）c5、c3、 c2 和 vegf 等。临床上大多干性amd最终发展成湿性amd,导致疾病的快速进展。许多 因子参与amd的cnv的形成过程，其小vegf是引起cnv发生和发展的主 要细胞因子，抑制vegf是治疗眼底cnv疾病的新策略。kh902是一种抗vegf约物，被用于治疗cnv有关疾病。目前kh902治 疗湿性amd的临床试验己进入ii期，接受药物治疗的amd病人表现出不同程 度的视力恢复。silvia在avastin治疗cnv临床试验小，发现约45%病人出现了 对药物治疗无反应，目前原因还不清楚silvia bopp, 2007为揭示抗vegf 药物作用机理和amd发病机

4、理与疗效之间的内在关联，有必耍筛选一些具有潜 在疗效预测价值的牛物标记物，对它们进行检测和分析，并逐步应用到临床实践, 为今后kh902的临床试治疗供实验依据。我们拟定从影响amd发生和发展的基因、因子以及眼科检查技术等入手,筛选一些具有预测kh902疗效或并发症潜力的生物标志物和检测技术。3. 2.1补体系统 补体通过经典和旁路途径活化。经典途径由免疫复合物刺激 活化，以补体cl、c4、c2、c3、c5c9顺序发生连锁反应，旁路途径由微生物 和多糖活化，不需经过cl、c4、c2,在b因子参与下直接启动c5c9连锁反 应。补体活化可形成膜攻击复合物(mac,由c5bc9组成)，mac具有介导细

5、 胞裂解、炎症趋化因子的释放并引导炎性细胞趋化，以及增加毛细血管渗透作用。补体因子complement factor h, cfh) cfh是抑制补体活化的调节因了，通过干扰(旁路途径和经典途径)补体活化，促进活化的补体失活，保护细胞避 免受补体损害。同时，cfh也可结合c反应蛋口 (crp )并抑制crp介导补 体旁路活化。cfh表达在各种细胞表面，包括视网膜、脉络膜和rpe细胞，当 眼底细胞或全身cfh功能受损可引起眼底cnv的形成，其机制可能是异常cfh 蛋白降低对补体的调节能力，活化的补体引起细胞裂解，细胞裂解后释放vegf 和其它一些促炎性因子，这些因子乂会趋化炎性细胞，趋化的细胞乂

6、会释放大量 vegf等促血管生成因子，以上多个病理过程参与vegf的生成，最终导致cnv 的形成和发展。cfh功能异常主要病因是染色体突变。染色体lq32区被认为是amd易感 基因位点，edwards> haines和klein等3个研究团队通过对lq32区cfh的 snp分析表明在402 (y402h)位置的络氨酸被组氨酸替代后，增加amd的发病 危险【edwards,2005； haines, j.l.2005； klein, 2005 o thakkinstian 等研究也证 实了 y402hcfh在amd中的作用,表明近50%的amd病人的y402h基i大i具 有多态性。lain

7、e研究i才i队也揭示了突变的cfh能减少其结合crp的亲和力和 降低抑制crp介导的补体活化能力，最终导致amd发病【laine, m., 20071除了 cfh基因夕卜，l0c387715是另一个重要的amd易感基因，它定位在染 色体10q26,其基因的功能还不明确。在德国2个不相关人群屮进行的连锁分析 和其它一些研究揭示,l0c387715的rs 10490924 snp与amd明显相关【rivera a, 2005,同时,它们之间的相关性也在高加索人yang z, 2006； yates jr, 2007l 日本人tanimotos, 2006； kondo n, 2007,俄罗斯人fi

8、sher sa, 2006 和印度人inderjeet kaur, 2008中得到进一步验证。cfh和l0c387715基因突变与amd发病相关，也可能与amd病人抗vegf的 疗效有关。从事抗vegf治疗amd的kim医生表示：“越來越多迹象表明不 同cfh y402h基因的表达与抗vegf治疗的反应相关”(来口互联网消息)。为 了确定cfh基因型是否对玻璃体内注射luccntis治疗湿性amd是否具有药物遗 传学影响，lee等采用冋顾性研究对156名注射lucentis的湿性amd病人进行 了研究。通过临床检查、视力、眼底照相、荧光血管造影以及cfh(y402h)的单 核甘酸多态性分析。结

9、果表明cfh y402h危险等位基因纯化了的病人增加了 37%的追加治疗危险。作者认为根据cfh基因型不同，amd病人对玻璃体内注 射luccntis治疗反应也不同，提议检测cfh基因型有助于将来湿性amd病人疗 效的判断aylee, 2009】。为调查cfh或loc387715基因型与湿性amd病 人对玻璃体注射lucentis的治疗反应之间是否存在相关性，milam等人通过回 顾性研究对单独用bevacizumab治疗的86名湿性amd病人进行调查。结果显 示具有cfh tt基因型的cfh y402h多态性amd病人的cnv面积较大(p = 0.02)o治疗后的cfh tt基因型病人的视力

10、从20/248提高到20/166, cfh tc 型从 20/206 提高到 20/170,而 cfh cc 型从 20/206 跌至 20/341 (p = 0.016)。与 cfh tt和tc型病人的53.7%的病人视力改善相比，cfh cc基因型病人只有 10.5%的视力得到改善，统计分析具有显著性菲异(p = 0.004)o loc387715基 因型对bevacizumab治疗无明显影响【milam a, 20070补体因子b (cbf)和补体组分2 (c2) cbf与c2基因定位在mhciiie,呈 基因紧密连锁，其基因突变可导致补体活化功能的异常。cbf是c3激活剂的前 体蛋白，

11、是补体旁路途径中的关键因子，它能促进补体活化。而c2作用于经典 补体途径，是活化途径中的关键因了，其基因突变对amd的发病有抵制作用。gold et等检测了 cbf和c2基因，发现amd病人的c2内含子10出现 2个单元型l9h cbf/e318d c2和r32q bf/a的突变体，提示了 amd病人的 补体参与了旁路、而非经典补体活化途径。mailer等研究显示cbf和c2的基因部位存在保护性和危险性的单倍型，位 于c2/bfh基因座最常见的单倍型h1可增加amd发病的危险性，属于危险性 单倍型，而h7和h10单倍型对amd右保护效应，属于保护性单倍型【mailer j,2006，为什么基因

12、突变会出现作用相反的保护性和危险性单倍体还不清楚。jakobsdottir 等研究表明白种人的 cfb (6p21, geneld 629)和 c2 (6p21, geneld 717),发现 c2rs547154 与 amd 显著和关jakobsdottir j, 2008】。andrea j等通过血dna分析对565名amd美国高加索人病人和204总种族对照进行 了研究，结果显示 amd 与 c2 rs547154 (ivs10)基因和 cbf 的 rs641153 (r32q) 明显相关【andrea j,2008】。另一些易感基因己被定位在染色体10q26,被称为 loc3877或位于

13、临近的启动区的基因称为ge htra1【yang z,2006】。与cfh、 cfb和loc3877 htra1突变和关的amd人群归因危险度至少达50% mailer j, 20060补体组分3(c3)和5 (c5) c3补体经典途径和旁路途径的核心补体，是c5 转化酶的组分，基因定位于5号染色体上。c5是形成mac的第1补体分子， 基因位于9号染色体上。c3a和c5a是补体c3和c5的活化形式。mullins等人发现在amd病人眼底黄斑区屮有c5和mac(c5b-9)的存在， 在眼底黄斑区、rpe细胞和bruch膜部位有c3a和c5a存在【mullins rf, 2000】。 ambati

14、等研究表明眼底的c3a和c5a可直接或间接(形成的mac)攻击局部 细胞，导致视网膜色素上皮(rpe)等眼底细胞的损伤ambati j, 2003】。nozaki和ambati等通过对amd病人和cnv动物的视网膜和脉络膜组织检 测发现，活化补体能上调局部组织屮vegf的表达，其途径可能通过裂解细胞 导致和细胞内vegf的释放【nozaki m,2006； ambati j, 2003】。reynolds等人为评价外周血中补体的活化和调节水平与amd表型或基i大i型 之间的关系，对58名干性amd和62名湿性amd病人以及60名对照进行了 研究。结果表明血清中c5a和c3a的水平与loc387

15、715/arms2和c3基因型 之间相关reynolds r, 2009。除了活化外，c3和c5的编码或调解基因突变后可诱发amd的发生。yates 等对c3 (19pl3, geneld 718)和c5上的13个snp进行了基因扫描，发现在 英格兰和苏格兰人群组中c3rs2230199 (arg80gly)与amd均具有显著性联系 yates jr,2007】。dominiek等为研究c3基因与amd z间的和关性，通过基 因检测对6418名鹿特丹55岁以上amd病人的c3 (r102g和p314l)基因进 行分析。结果发现c3的r102g和p314l等位基因能明显增加早期amd和晚期amd

16、各亚类发病的危险。【dominiekd.g, 2009oc反应蛋白(crp) crp是补体旁路途径活化物，它不仅是心血管疾病 发病的危险因素tsimikas s, 2006,也是amd发病的危险因素，大量文献表 明crp参与amd的发病过程。andrew等研究揭示血清中crp浓度提高可增加amd的发病危险andrew k. vine, 2005o schaumberg等在女性amd发病机理研究中，对血液中crp、可 溶性细胞间粘附分子(cam1)和纤维蛋白原等检测发现上述3种蛋白标志物升 高可出现在女性amd发病的前期，证实了 amd发病与炎症有关的推断 【schaumberg da, 200

17、7 kikuchi等对口本amd病人研究发现病人crp中位 数水平显著高于对照组，而冃随着crp水平的增加，amd发病风险有增加的趋 势(p<0.01) kikuchi m,2007ocrp参与amd形成的机制可能是通过慢性炎症反应导致细胞氧化功能的 损伤、玻璃膜疣的形成或bruch膜变性等。crp也能通过诱发补体激活，在amd 发生中发挥直接作用。同时，cfhy402h变异可以降低了 cfh的结合crp的能 力，加剧了 crp介导的补体损伤作ffl schaumberg da,2006o johnson等研究结 果表明cfhy402h纯合了能增加crp在脉络膜上的沉积，这种作用可能会促

18、进 amd 发生和发展johnson pt,2006。白细胞介素6 (il-6),白细胞介素2 (il-2)和肿瘤坏死因子(tnfa ) 包括白细胞介素和肿瘤坏死凶子等炎性细胞因子在各种视网膜nv疾病中起关 键作用。rojas等研究显示il6的表达可诱导视网膜组织中vegf的表达，白 细胞的粘附和血管的重构rojas m, 2009campochiaro对40名视网膜静脉阻塞黄斑水肿病人、11名糖网病黄斑水肿 病人、8名血管新生性amd病人的房水vegf进行分析。结果显示糖网病黄斑 水肿房水vegf水平中央静脉阻塞病人分支静脉阻塞病人，注射ranibizumab 后一个月，39名中央静脉阻塞或

19、分支静脉阻塞病人中27名病人水肿消失。该研 究提议房水标本可用于检测疾病进展、约代和药效学研究相关的生物靶分子 campochiaro pa, 2009 roh等研究了不同病程湿性amd病人玻璃体内注射 avastin (bevacizumab)后房水中炎性因子浓度变化。结果表明复发组病人房水中 tnf-a和il-2水平明显低于对照纽.(p值分别为0.036和0.019), cnv活动组 (复发组和初次发病组)病人房水中il6和il8与cnv大小相关。该研究表明 房水h1 il-2, il-6, il-8,和 tnf-a 可能与 cnv 活动相关rohmi, 2009】。除crp外，il6和t

20、nfa受体2、细胞间粘附分子1、血管细胞粘附分子 -1,以及脂蛋白(a)和载脂蛋白b等均属于炎性心血管疾病危险因素。amd和心 血管疾病可共享一些危险因素，seddon等为研究上述因素与amd发病是否和 关，对251名60以上的老年人进行研究。结果表明il-6与amd的进展有关。 细胞粘附分子1和脂蛋白载脂蛋白b也表现出促进作用，但没有统计学意义。 crp和il6水平与体重和吸烟状态明显相关。该研究表明血液中的crp和il-6 水平与amd的发生和发展有关【seddon jm, 2005l campochiaro等对40名中 央静脉阻塞(crvo)或分支静脉阻塞(brvo)引起的黄斑水肿病人、

21、11名糖网 病黄斑水肿(dme)病人和8名血管新生ft amd (nvamd)病人的前房水标本进 行了分析。结果显示dme病人前房屮vegf水平明显高于crvo病人的,crvo 病人的前房中vegf明显高于brvoen病人。第二次注射ranibizumab后一个月， 39名crvo和brvo病人中的27名病人水肿消失，水肿消退组病人房水中il-6> il-lp和tnf-a水平不高于未消退组(残留水肿)病人campochiaro pa, 2009o3. 2. 2炎症细胞除了补体和炎性因子外，炎性细胞在amd发病过程也起重要作用。hageman 和penfold等通过对amd病人眼底组织研究

22、显示drusen的形成与炎症有关， 巨噬细细在炎症反应中起主要作用【brantley ma, 2007； penfold pl, 20011 grossnicklaus等通过组织学研究也显示了在cnv组织屮炎症细胞屮巨噬细胞占 主导地位【grossniklaus he, 2002c由于amd病人的眼组织标本來源困难，cousins等研究了 amd病人外周 血中单核细胞(dc)的功能状态与发病的关系,通过体外分析dc表达和分泌tnf a的能力，显示來口 amd 和对照组外周dc分泌tnf-a能力不同，dc分泌 高浓度tnf-a的病人具有较高amd的患病率，表明外周血屮活化dc可做为 cnv发病高

23、危险状态的生物标志物cousins sw, 20043. 2. 3抗体除了补体、炎性因了和细胞外，抗体也参与amd的发病过程。patel通过直 接免疫组化和western blot方法对amd病人和对照组人群血清中抗视网膜抗体 进行了分析，结果表明93.75%的黄斑变性和82.27%的cnv病人血清屮有明显 (p = 0.02)高滴度的视网膜自身抗体，而对照组只有8.69%的比例出现。表明在 amd早期有抗体免疫过程参与【patel n, 2005】。3.2.4 vegf信号通路蛋白与相关蛋白血管内皮生长因子(vegf)是血管新生的主要调节蛋白因子，参与cnv 的形成，与湿性amd的发生和发展

24、密切相关。roh等对不同病程amd病人房水中vegf的浓度变化与cnv疾病进展关 系进行立了分析。结果表明与对照组相比,cnv初次发病组(66.8 +/- 35pg/ml) 和复发组(55.7 +/- 63.0 pg/ml)病人房水vegf浓度明显高于cnv退化组(9.8 +/12.8 pg/ml, p值分别为0.025和0.004),表明房水中vegf水平与与amd 病人的cnv活动密切相关【roh mi, 2009o campochiaro等对40名中央静脉 阻塞(crvo)或分支静脉阻塞(brvo)引起的黄斑水肿病人、11名糖网病黄斑 水肿(dme)病人和8名血管新生性amd (nvam

25、d)病人的前房水标木进行了分 析。结果显示dme病人前房屮vegf水平明显高于crvo病人的，crvo病人 的前房小vegf明显高于brvocn病人。该研究提议房水标本可用于检测与疾 病进展、药代和药效学研究相关的生物靶分子【campochiaro pa, 2009o tsai 等研究血液中vegf和no(氧化氮)对amd和pdr(增殖性糖网病)病人cnv 的影响，通过elisa检测血清中vegf,通过化学发光检测了血清中no。结果 显示amd组病人血清中vegf水平(平均值为256.0 pg/ml,浓度范围为146.4- 375.3 pg/ml)明显高于 pdr 组病人 vegf (124.

26、8 pg/ml, 75.7-215.3 pg/ml, p = 0.004)和对照组 vegf(120.3 pg/ml, 82.8-168.2 pg/ml, p =0.001)。pdr 组病人血 清 no 水平(137.4 microm, 63.7-240.1 mm)明显高于 cnv/amd 组(71.8 mm,42.4- 113.3 mm; p = 0.004)和对照组(62.6 mm, 39.0-114.9 mm; p = 0.002)。vegf 与no的增殖没有相关性，表明血液循环屮的vegf和no在nv形成过程屮 可能起不同作用【tsai, 2006o除了外周血和房水中vegf浓度与am

27、d相关外，其外周血中vegf基因 多态性与amd发病有关联。目前vegf snps已被用于预测个体发生口腔肿瘤 的生物标志物【ku, 2005和乳腺癌存活预后指标【lu, 20050 amanda等对 45名湿性amd的vegf基因启动区和编码区14 snps (启动区8个、非编码区 1个和编码区5个)进行分析。结果表明snp +674 cc基i大i型明显与amd相关 (or=2.40, 95%ci 1.09-5.26, p=0.027)。对 snps +674, +4618, +5092, +9162 和 +9512 分析表明 ctcct 和 tcacc 与 amd 和关(or=15.77,

28、 95% ci 1.91130.24, p=0.0161 和 or=9.95, 95%ci 3.22-30.74, p=0.000053)o 启动区 snps 分析揭示-460t, -417t, -172c,-165c,-160c,-152g, -141a, -116a, +405c 单倍体与 amd 明显相关(or=18.24, 95%ci 2.25-148.25, p=0.0074) amanda j, 2006o3. 2. 5眼科检查技术oct被用于预测dr(糖网病)的治疗结果，也可考虑用于的预测amd的治 疗结果。为预测糖网病玻璃体内注射曲安西龙后视力恢复结果,gibran等对93名

29、糖网病病人和25对照进行了冋顾性研究。结果表明较低视网膜内部oct反射 率与视网膜的萎缩程度相关，萎缩的视网膜可导致病人治疗后视力恢复的失败， 來口视网膜内部oct反射强度可提供客观的标准，去预测糖网病病人对玻璃体 内注射曲安西龙的疗效反应(视力恢复)【gibran sk, 2007】。通过类推，oct 也可用于预测湿性amd病人对玻璃体内注射kh902的治疗反应。例如，通过 oct nj 诊断息肉性脉络月莫血管病(polypoidal choroidal vasculopathy, pcv), 一 些资料研究显示pcv是amd病人玻璃体内注射lucentis和avastin失败的常见 原因。

30、眼底镜是眼科另一常用的检测设备，可检查眼底荧光和眼底自发荧光 (autofluorescence, af), britta 等为 了评价 af 显像在预测湿性 amd 抗 vegf 治疗中的诊断价值，对95只玻璃体内注射bevacizumab的湿性amd眼进行了 分析，结果表明，af的并别可代表rpe代谢紊乱的不同种类，它们对抗vegf 治疗有很大的影响，af值高的amd眼对抗vegf治疗，使病人对治疗无明显 反应，表现为视力无明显改善【britta, 2008】。scungbum kang等报道了玻璃体 内注射 ranibizumab治疗amd有关的cnv疾病近1年临床结果，0的是识别 可影

31、响韩国病人视力恢复结果的预测因素。通过对60名（64只眼，玻璃体注射 0.5 mg lucentis）进行12个月的追踪调查，结果表明视力恢复或保持12个月稳 定的病眼为71.9% （46/64）,通过对个亚组病眼分析显示治疗前视力和cnv大 小影响lucentis治疗结果（p = 0.039和p = 0.042）。研究者提hh治疗前的视力 和cnv人小可做为lucentis治疗后视力恢复的预测因mseungbum kang, 2009】。3.2.6临床调查影响amd发病的环境因素环境因素和遗传因素相结合可影响amd的发病【antoniak, 高血压、高 胆固醇血症和肥胖症和高脂肪饮食等常见影

32、响心血管疾病的因素也影响amd的 发生和发展。尽管一些研究提出心血管疾病与amd无相关性。但ruth e等研 究显示心血管疾病在老年人amd发病过程中起病原学作用，提出控制血压和胆 同醇（经常食用许多饱合脂肪酸可影响视网膜脂类代谢）、避免吸烟（长期吸烟 增加视网膜黄斑变性的机会）和维持正常体重可减少amd发病【scddon jm, 2005o此外年龄、遗传因素（amd家族史）和职业性光线暴露也是影响amd 发病的主要因索c amanda等对45名湿性amd研究发现vegf的snps与amd 的发病和关，但吸烟、高脂肪饮食和高血压与amd发病无关，饮食中加入抗氧 化剂可起保护作用amanda j

33、, 2006o病人的问诊在预测抗vegf疗效可能起 参考作用,seungbum kang领导的韩国一个研究小组对60名cnv病人的64只 眼（玻璃体注射0.5 mg lucentis）进行12个月的追踪调查，通过对病人的视力 恢复程度、性别、年龄、cnv大小和类型、以及是否伴有全身疾病和光动力治 疗等数据进行了比较分析。结果表明病人性别、年龄、cnv类型、以及无全身 疾病和先前进行的光动力治疗对治疗结果无影响【seungbum kang, 2009o4.检测指标4.1外周血考虑临床房水标木來源困难，木设计针对血液检测，检测标木包括细胞和 血清，检测指标包括细胞活性分析、视网膜抗体、crp和基因

34、多态性，检测技 术包括elisa/化学发光、细胞培养，以及pcr和电泳等。4.1.1血清检测（按重要性排序） vegf （含p1gf）:外周血或房水屮vegf浓度与湿性amd发病和cnv面 积相关，拟通过elisa法检测外周血vegf浓度水平。 crp:外周血和玻璃体内crp与湿性amd发病明显相关，拟采用elisa方 法分析外周血中crp浓度。 视网膜口身抗体：外周血中抗视网膜抗体与湿性amd发病和关，拟采用 elisa方法分析血清中抗体浓度。 il-6:血液和房水屮il6浓度与湿性amd发病和cnv而积相关，拟采用 elisa分析血清中il-6浓度。 tnf-a：与amd的复发等，研究者多

35、检测房水中tnf-a,本研究拟检测外 周血中tnf-ao4.1.2基因多态性（按重要性排序） cfhy402h基因多态性：通过荧光pcr （taqmanmgb,需多通道的荧光定 量pcr）或测序分析方法检测病人的基因表型。 vegf基因多态性分析：vegf质和量与湿性amd发病相关。血液中vegf 浓度反映其量的改变，其基因突变反应其质的改变。拟采用单核甘酸多态性 和测序方法对vegfsnp +674 cc基因突变进行分析。 cbf和c2基因多态性：拟采用单核昔酸多态性技术分析单倍型h1 （危险性 单倍型）以及h7和h10单倍型（保护性单倍型）,还包括c2 rs547154 （ivs10） 基

36、因和cbf的rs641153 （r32q）基因。 c3 基因多态性：拟分析 c3rs2230199>c3r102g 和 c3p314l。单核细胞活性：外周血屮单核细胞活化状态与湿性amd有关，休外分析细 胞分泌的tnf-a的量，推测病人体内单核细胞的活性状态。4.2眼科检测oct可用于预测湿性amd病人对玻璃体内注射kh902的治疗反应。通过 检测排除已知的一些可能对治疗无反应的疾病，像息肉性脉络膜血管病等有资料 研究显示pcv是amd病人玻璃体内注射lucentis和avastin失败的常见原因。 眼底镜可检查眼底荧光和眼底口发荧光。视网膜代谢紊乱的状态可根据眼底口 发荧光结果进行推测

37、，af值高amd眼可能对抗vegf治疗无明显反应。眼底 cnv的位置和而积可通过眼底荧光确定，cnv面积大小可影响抗vegf治疗效 果。视力丧失程度可影响抗vegf的治疗结果，amd病人治疗前的基础视力可 通过视力表检测，做为预测疗效指标。5. 可行性分析标本来自病人的外周血，易获得，需临床组配合采血。细胞培养可在公司内完 成。困难是需要止常老年血做对照，可考虑不做或委托其他单位完成。血清靶蛋 白和抗体口j在公司内完成，需要视网膜组织标本和购买相应的试剂。基因型的检 测可在公司内(测序法)或与其它单位合作完成(多色荧光pcr或其它snps 检测方法)。6. 文献a y lee,et al.ph

38、armacogenetics of complement factor h (y402h) and treatment of exudative age-related macular degeneration with ranibizumab.br j ophthalmol 2009;93:610-613amanda j. churchill, james g. carter 1, helen c. lovelll,ct al.vegf polymorphisms arc associated with neovascular age-related macular degeneration

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