皮肤科实验室检查技术操作常规

1、常见皮肤科实验室检查技术操作常规%1. 真菌（癣菌）直接镜检【方法】1. 取材部位：临床医师采取头癣，体癣，股癣，足癣，甲癣标木。2. 操作方法：将标本置于载玻片上，加一滴5-10%koh,加盖玻片，在酒梢灯火焰上过三 次以消化角质蛋白，普通光学显微镜f检查。【结果判断】可见真菌菌丝和/或他子，可判断为阳性。%1. 毛囊虫（蠕嚇）的检查【方法】临床医师采取，在扩张的毛囊口挤压出一点皮脂或用刀片刮出些皮脂，在载玻片加 i滴液体石蜡或廿汕，加盖片轻压使皮脂变薄，普通光学显微镜下检查。【结果判断】低倍镜下发现活的毛囊虫，可判断为阳性。%1. 疥!w虫镜检【方法】1. 取材部位：临床医师釆取标本。2.

2、 操作方法：将标本迸于载玻片上，加一滴5-10%koh （或加ns）,加盖玻片，在酒精灯 火焰上过三次以消化角质蛋口，普通光学显微镜下检查。【结果判断】见到以下任何一项均可判断为阳性。1. 成虫：低倍镜下看到完整或破碎的成虫。如用ns,有可能发现活动的成虫。2. 虫卵：可以见到虫体的同时见到成堆或散在的虫卵。%1. 头，体，阴虱检查【方法】1. 取材部位：临床医师夹取标本。2. 操作方法：将标木置于载玻片上，加一滴ns,加盖玻片，普通光学显微镜下检杳。【结果判断】见到以下任何一项均可判断为阳性。1. 成虫：低倍镜下看到完整或破碎的成虫。如用ns,冇可能发现活动的成虫。2. 虫卵：可以见到虫体的

3、同时见到成堆或散在的虫卵。%1. 阴道毛滴虫直接镜检【方法】在载玻片上加一滴温ns,用不涂润滑油的阴道窥器暴露子宫颈，在后穹隆，子宫 颈等部位拭取分泌物混入温盐水中，立即在低倍镜下镜检。或用棉拭子蘸取阴道分泌娶后置 于2ml温盐水小瓶屮，混匀示取一滴在玻片上镜检。也可取男性尿道分泌物，前列腺液或尿沉渣同法镜检。【结果判断】及镜下见到呈波状移动的毛滴虫为阳性。有吋可见到毛滴虫周围的白细胞被推 移。%1. 念珠菌涂片检查【方法】根据病变部位的不同收集不同的标本。如果检查体液标本（如尿液或脑脊液）应在 离心后去沉淀物。其他固体标木或分泌物标木可以直接涂片。如为分泌物或休液沉渣，可将受检标本放迸在载玻

4、片上，加一滴无菌ns,加盖玻 片后总接镜检。如果为固体标木（皮霄，甲霄），可加一滴10%koh,加盖片后轻微加热， 然后镜检。必要时可以进行革兰染色或刚果红染色检杳念珠菌孑包子与菌丝，提高阳性率。【结果判断】镜下见到成群卵圆形砲子和山芽砲延伸成的假菌丝可判断为阳性。如果见到大 量菌丝说明念珠菌处于致病状态。%1. 细菌性阴道病（bv）检查（一）细菌性阴道病线索细检查【原理】患此病时，阴道正常菌群发生变化，杆菌减少或消失，而阴道加特纳菌、厌氧菌等 主长。此外，加特纳菌和厌氧菌吸附在阴道鳞状上皮细胞表面，使细胞边缘模糊不清呈锯齿 状，有特殊外观的线索细胞。对阴道分泌物作湿片涂片革兰染色，在显微镜下

5、町观察线索细 胞以及阴道菌群的变化。【方法】湿片法：在i载玻片上加一滴牛理盐水，将阴道分泌物与主理盐水混合成悬液，加 上盖玻片后，在高倍（400倍）镜下检查。革兰染色：取阴道分泌物，涂片，作革兰染色，油镜（1000倍）下检查。【结果】线索细胞为阴道鳞状上皮细胞表面覆盖着许多球杆菌（主耍是加特纳菌，有时合并 有厌氧菌），使细胞呈斑点状、颗粒外观，细胞边缘模糊不清呈锯齿状。【临床意义】当线索细胞占全部上皮细胞的20%以上时，一般认为可诊断bvo湿片法诊断 bv的敏感性在8（）%以上，特异性在90%以上。革兰染色镜检观察阴道上皮细胞屮线索细 胞的敏感和特异性高于湿片法，分别89%和93%。（二）细菌

6、性阴道炎病快速检测（脯氨酸氨基肽酶试验）该试验间接检测细菌性阴道炎相关的病原体产生的化学物质，国内冇商品化试剂。阴道 加特纳菌和游动钩菌属能产生脯氨酸氨基肽酶，而乳酸菌不产生该酶。将阴道分泌物与底物 35.5°c相互作用4小时，加入指示剂后，观察颜色变化。呈现红色或者产牛粉红色为阳性反 应，黄色或者橘黄色为阴性。该试验的頌感性和特界性均为93%o%1. 梅毒实验室诊断（一）梅毒螺旋体暗视野检查（一期梅毒硬下疳和二期梅毒扁平疣）（二）快速血浆反应素环状卡片试验（rpr）（主要用于初筛和二期梅毒患者或治疗后随访，进行定量实验）（三）不需要加热血清反应素试验（usr）（二期梅毒患者或治疗后

7、随访，应进行定量实验）（四）梅毒螺旋体血凝试验（tpha）（主要用于确证试验）（五）梅毒螺旋体明胶凝集试验（tppa）（主要用于确证试验，分定性与定量试验）%1. 淋球菌检查（一）淋球菌直接镜检（淋涂）【方法】1. 男性患者：先用ns拭尽尿道口，手指挤出尿道内脓液，用无菌棉拭子沾取脓液涂在载 物玻片上。2. 女性患者取宫颈ii脓液，用无菌棉拭了沾取脓液涂在载物玻片上。3. 自然干燥后，革兰染色或美兰染色待检。【结果判断】涂片屮见人量多形核白细胞，细胞内有革兰氏阴性球菌，呈卵圆形或圆形，成对排列。 为阳性结果。（二）淋球菌培养（淋培）【方法】临床取材后，立即接种于培养基屮，不得冷藏后再接种。在5

8、-10% co2, 37度培 养24-48小时后观察结果。（市场上可见试剂盒）【结果判断】在血平皿可见圆形，平滑，透明或灰白色菌落，直径0.5-1.0mm,革兰氏染色 阴性。必要时，做生化检查确定菌种。十.衣原体检查（-）免疫荧光法【方法】临床取材示，立即涂片，无水乙醇室温固定15分钟，室温凉干，加荧光抗体标记 的抗衣原体单克隆抗体，37度温育30分后，pbs洗涤三次。封片后在荧光显微镜下观察。【结果判断】阳性标本可以见到亮绿色包涵体。敏感性可达70-90%o（二）细胞培养法（三）快速酶分析法【方法】临床取材。市场上有沙眼衣原体快速试剂盒供应。【结果判断】显色带肉眼观察。简便，快速，不足z处在

9、于敏感性鮫低。h支原体检查（一）培养检查法【方法】临床取材示，取材示立即放到lml支原体肉汤培养基屮。37°c孵箱培养18小时示 观察结果。阴性结果者连续观察七天。【结果判断】解腺支原体阳性：肉汤培养基由淡红变为红色（与接种管对比），但无明显浑 浊现彖。（二）支原体抗体（igm, igg）【方法】临床取材后，用快检卡方法检。现有三种支原体可致菲淋病性尿道炎。即解眠，人 型，生殖支原体。市场上有单一的或三合一的试剂盒。【结果判断】显色带肉眼观察。简便，快速。（三）支原体药敏试验十二.爱滋病抗体检测十三.尖锐湿疣（ca）检查【概述】 尖锐湿疣乂称尖圭湿疣、生殖器疣（genital warts,gw）、性病疣（venereal warts,vw）o由人乳头瘤病毒（hpv）感染引起，主要是hpv6、hpv11、hpv16、hpv18 型与本病有关。hpv通过皮肤粘膜的微小糜烂而进入人体，感染人体后，对潜伏在上皮基底细胞间，在表皮细胞层复制，然后hpv侵