反相高效液相色谱法测定关节克痹丸中大黄素的含量(精)

1、关键词】 反相高效液相色谱法； , 关节克痹丸； , 大黄素摘要：目的建立反相高效液相色谱（RP-HPLC 法测定关节克痹丸中大黄素 的含量。方法采用 Zobax C18 色谱柱（4.6 mmX150 mm 5 卩 m ,以甲醇 0.1%磷酸溶液（70： 30）为流动相，流速 1.0 ml/min，检测波长 282 nm,柱温 40C。结果大黄素在 0.010.2 mg/ml 范围内线性关系良好（r=0.999 9 ），平 均回收率为 97.56%, RSD为 1.51%。结论该法操作简便，结果准确、可靠，可 作为关节克痹丸的质量控制标准之一。关键词：反相高效液相色谱法； 关节克痹丸； 大黄素

2、Determination of Emodin in Guanjiekebi Pill by RP-HPLCAbstract：ObjectiveAn RP-HPLC method was established for the determinationof emodin content in Guanjiekebi pill.MethodsZobaxC18(4.6 mmX150 mm 5 卩 m) was used with a mobile phase consisted of methanol-0.1% phosphoric acid(70：30).The detection wavel

3、ength was 282 nm,the flow ratewas 1.0 ml/min,and the temperature of the column was 40 C .ResultsThe linearrange of emodin was 0.010.2 mg/ml(r=0.999 9),while the average recovery was97.56%(RSD=1.51%).ConclusionThe method is simple,sensitive and accurate.It canbe applied in quality control of Guanjiek

4、ebipill.Key words ： RP-HPLC; Guanjiekebi pill;Emodin关节克痹丸由川乌（制）、草乌（制）、虎杖、独活、秦艽、麻黄等15 味中药组成，具有祛风散寒、活络止痛功效 1 。临床主要用于关节炎，四肢酸 痛，伸展不利。其质量标准中缺少含量测定方法。本文采用反相高效液相色谱 法2测定该中成药虎杖中大黄素的含量。现将结果报道如下。1 仪器与材料1.1仪器 Agilent 1100 LC 系统（美国惠普公司）：四元泵、在线真空脱气机、可变波长紫外检测器（ VWD）、 Agilent ChemStation 工作站； FA2004电子分析天平（上海天平仪器厂）、

5、BP211D 电子分析天平（德国Starforias 公司）；HS2005D 超声波洗涤器（天津鑫洲科技公司）。所用仪器 和量具均经校正和检定。1.2材料大黄素对照品（中国药品生物制品鉴定所，批号 110756200110）；关节克痹丸及其空白制剂（江苏天士力制药有限公司提 供）；甲醇为色谱纯，水为纯净水，其它试剂为分析纯。2 方法与结果2.1色谱条件色谱柱为 Zobax C18(4.6 mmX150 mm 5 卩 m);流动相为 甲醇0.1%磷酸溶液(70 : 30);检测波长 282 nm ;柱温 40C；流速 1.0 ml/mi n ;进样量 10 卩l (定量环)。2.2溶液的制备2.

6、2.1 对照品溶液的制备精密称取以五氧化二磷为干燥剂减压干燥 24 h 的大黄素对照品 11.02 mg ,置 50 ml 容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇 匀，精密量取 5ml ，置 10 ml 容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得浓度为 0.110 2 mg/ml 的对照品溶液。2.2.2供试品溶液的制备取样品 3 g ，研细，精密称定，置 250 ml 具塞 三角瓶中，精密加入甲醇 100 ml ，密塞，称定重量，置水浴加热回流 30 min ， 放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密吸收续滤液 50 ml 置蒸发皿中，蒸干，残渣加 5 mol/L 盐酸 30 ml

7、 及氯仿 30 ml ，水浴加热回 流 30 min ，冷却，移至分液漏斗中，用少量氯仿洗涤容器，洗液并入分液漏斗 中，分取氯仿液，酸液再用氯仿提取 4 次，20 ml/ 次。合并氯仿液，蒸干，并 转移至 10 ml 容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用 0.45 卩 m 的滤膜滤过， 作为供试品溶液。2.3标准曲线 3精密称取以五氧化二磷为干燥剂减压干燥 24 h 的大黄素对照品 10 mg 置 50 ml 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。用甲醇 配成浓度为： 0.01 ， 0.02 ， 0.05， 0.10， 0.15 ， 0.20 mg/ml 的标准液，按上述 色谱条件分别进样 1

8、0 卩 l，测定峰面积。以对照品浓度(mg/ml)为横坐标(C),峰面积为纵坐标(A)绘制标准曲线，得大黄素的回归方程为：A=10.439 02+51 608.214 27C (r=0.999 9) ;大黄素浓度在 0.010.2 mg/ml 范 围内呈良好的线性关系。2.4精密度实验取浓度为 0.1 mg/ml 的对照品溶液在上述色谱条件下重 复进样 5 次，10 卩 1/次，测定峰面积，结果 RSD 为0.15% ( n=5)。2.5稳定性实验取同一样品溶液分别于峰面积，结果 RSD 为 0.4%(n=6)，表明样品在2.6重复性实验取同一样品(批号 0601002) 6 份，分别精密称定，按 上述供试品溶液制备方法和色谱条件测定，计算含量，RSD 为 1.36%。防止处方调配差错是一项任重而道远的工作 , 是药剂人员必须时时提高 警惕的重要日常工作。它的发生不是单一的某方面 , 而是医院各个环节的综合表 现,对于涉及儿童健康生命大事的职业 , 每一位药学专业技术人员都应具有高尚 的思想品质、严谨的工作作风和高度的责任心 , 杜绝一切差错发生 ,真心实意为 病人提供优质的药0， 0.5， 1， 3， 5， 8 h 进样测定 8 h 内稳定。学服务。【参