丹参水溶性化合物对肝硬化药理作用探究进展

1、丹参水溶性化合物对肝硬化药理作用探究进展关键词丹参水溶性化合物肝硬化药理作用文献综述 丹参为唇形科植物丹参salvia miltiorrhiza bge. 干燥根及根茎。有祛瘀止痛、活血通经、清心除烦之功。丹 参药理成分有水溶性成分和脂溶性成分1,脂溶性成分主 要为二菇醍类化合物。但中医传统采用水煎剂，即水溶性成 分，故研究其药理作用更有意义。现已分离获得了近20种单 体化合物，最早发现的是丹参素，化学名为3,4-二释苯乳 酸,是各种丹参酚酸的基本化学结构。丹参酚酸是一类含有 至少一个苯环和与苯环相连的轻基水溶性酚酸类化合物，是 丹参水溶性成分中最重要的活性部分，尤其以丹参酚酸 a(sa-a)

2、、丹参酚酸b(sa-b)含量最高，活性最强，它们的药理 作用相似，有很强的抗氧化、清除自由基及抑制细胞凋亡等 作用，对心、脑、肝、肾等多个器官有保护作用2。肝硬化属于中医学胁痛、积聚、臓胀等范畴，化瘀通络 是治疗肝硬化的方法之一3。随着分子生物学技术的应用, 近年来丹参水溶性成分对防治肝硬化的药理作用研究，有更 深入的发现，本文对其研究进展作一综述。1抗肝纤维化肝纤维化是进展至肝硬化阶段的必然环节。肝成纤维细 胞、肝星状细胞的增生及肝细胞内胶原的沉积是肝纤维化的 原因。其中肝星状细胞的活化、增殖和凋亡诱导的抑制，已 经作为抗肝纤维化治疗策略。转化生长因子-b 1(tgf-b 1) 是最重要的促

3、肝星状细胞活化的细胞因子。丹参酚酸类药物 抗肝纤维化作用大多通过这些环节起作用。张文炜等4发 现人肝星状细胞(h-hsc)能够表达肌细胞增强因子2 (mef2), 且随着h-hsc的活化而增加；经tgf-b 1刺激的h-hsc内a- 平滑肌动蛋白(a -sma)的表达、i型胶原启动子的活性和i 型胶原蛋白的生成均明显增加，同时mef2启动子的活性和 mef2的蛋白表达也明显增强。sa-b对以上这些物质的表达 均有明显的抑制作用。sa-b抑制h-hsc活化的作用与其抑制 tgf-b1在h-hsc内的信号传导与抑制转录因子mef2a、 mef2c的表达有关。薛冬英等5在体外以tgf-b 1或血小板

4、 衍生生长因子-册(pdgf-bb)刺激原代培养活化大鼠肝星状 细胞(hsc), sa-b能抑制tgf- b1诱导的hsc中丝裂原激活的 蛋白激酶(mapk)信号传导通路，抑制作用与hsc上tgf-b1 受体(tbr)的表达无关，也与pdgf-bb在hsc内的细胞外信 号调节激酶(erk)信号传导通路无关，说明sa-b对pdgf-bb 在hsc内的信号传导通路的抑制作用在于抑制了 hsc ± pdgf 受体的表达。成扬等6发现sa-b在体外能抑制大鼠hsc的 增殖、活化和erk的磷酸化。并发现sa-b能剂量依赖性地 抑制大鼠hsc-t6细胞的增殖和活性，随着细胞内信号调节激 酶的表达

5、抑制,hsc细胞内的i型胶原蛋白的表达减少7。氧化反应的产物可以引起肝损伤和肝纤维化,hsc活性 是肝纤维化的关键特性。lin yl等8发现sa-b可以减轻 tgf- 3 1刺激的大鼠原代培养活化肝细胞氧化损伤，减少氧 化反应的产物在肝细胞内累积，减低hsc活性,具有潜在保护 肝细胞活性和抗纤维化效果。zhao jf等9发现sa-b在体 外能减轻分离活化的hsc细胞tgf-b 1的分泌，影响tgf-b 1 刺激hsc对i型胶原和smad3蛋白的表达。2降低门脉高压肝硬化患者存在门脉高压，伴有高心输出量、高动脉血 流灌注、外周和内脏血管扩张、周围血管阻力下降等血流动 力学改变。高动力循环状态的发

6、生和持续变化是复杂的病理 生理过程，不仅可加速肝硬化的进展，而且是一些并发症的 重要原因。目前发现肝硬化的血流动力学改变与体内一系列 体液因子如血管内皮素、一氧化氮、前列腺素、肿瘤坏死因 子、心钠素等产生有关，这些血管活性物质可能参与了门脉 高压的形成。有报道，经丹参治疗后门、脾静脉内径减小及 血流量明显减少，但是内毒素及血管活性物质水平下降不明 显：10 o表明丹参并非通过调节血管活性物质水平而降低肝 硬化的门脉压力，而是对肝硬化患者血流动力学指标有影响, 从而降低门、脾静脉的内径，减少门、脾静脉血流量。刘星 等11发现通过复方丹参的干预，在肝硬化大鼠模型治疗组 中门静脉压力、门静脉血流量、

7、肠系膜上动脉血流量、腹主 动脉压力均呈梯度性降低，延长丹参的用药时间则降低更有 效。田甜等12观察了 sa-b对血管内皮素(et-1)诱导门脉 高压老鼠微循环的影响，发现sa-b可以减少et-1引起门脉 高压老鼠肝内平均血流灌注量和微循环流速。周扬等13观 察到et-1诱导的大鼠门脉压显著升高，经sa-b事先干预后 的大鼠变化轻微，可以减轻由et-1诱导的门脉压升高。3促进肝细胞再生肝脏具有较强的再生能力。原发性肝癌及肝内胆管结石 合并肝硬化，肝切除术是主要的治疗措施，但肝硬化患者的 肝功能储备不足，肝切除术后因肝功能衰竭的死亡率较高。 因此，促进肝硬化肝切除术后的肝细胞再生和肝功能的恢复 具

8、有重大的意义。naqasue n等14观察了 28例慢性肝炎和 肝硬化患者肝切除术后的再生情况，其中21例伴原发性肝 癌,4例肠癌转移，1例膀胱癌转移，1例肝门胆管癌(klatskin 肿瘤),1例先天性肝内胆管囊状扩张症(carolij s病)，再生 情况由肝脏大小、肝功能和组织学来评价，所有具有器质性 病变的肝脏在3、6个月剩余残肝都增大，胆红素血症持续时 间比正常肝脏的患者更长，血清甲胎蛋白未随着再生而升 高。提示肝硬化肝细胞术后可以再生，与正常肝脏术后再生 相比较，肝功能恢复较慢，再生组织较少。朱清静等15在观 察丹参、大黄水煎制剂对大鼠的肝切除模型干预实验中发现, 药物通过对再生模型

9、大鼠肝组织pc3mrna、c-fosmrna的表 达而促进肝细胞的增殖。kong r等16在肝脏缺血再灌注损 伤大鼠模型中发现.sa-b的预处理可以减少肝细胞的凋亡。 sa-a治疗四氯化碳诱导的急性肝损伤大鼠，可以减少肝内肿 瘤坏死因子的浓度和凋亡基因caspase-3的活性，可见丹参 水溶性成分在动物实验研究中可以促进肝脏再生17。韩振 国等18在观察丹参素和泮托拉哩对肝硬化大鼠肝部分切 除术后肝再生的影响，丹参素的术后干预可以提高肝组织有 丝分裂指数、增生细胞核抗原阳性染色细胞量、细胞核dna 含量，提示对肝再生有促进作用。4提高抗氧化能力在慢性肝病患者血清中超氧化物歧化酶(sod)和谷胱

10、甘 肽过氧化物酶(gsh-x)活性明显降低，总超氧化物歧化酶 (t-s0d)和gsh-x活性降低造成机体氧自由基清除障碍，堆积 在体内的自由基攻击肝细胞中的不饱和脂肪酸引起脂质过 氧化作用，导致肝细胞进一步的损伤19 o肝硬化患者手术 损伤并发上消化道出血等造成肝组织缺血-再灌注损伤，诱 发氧自由基、脂质过氧化反应，可以导致肝脏损伤加重，疾病 恶化进展，甚至肝衰竭而死亡，因此抗氧化治疗是治疗肝脏 疾病的有效策略之一。和水祥等20研究提示，在肝硬化患 者并发上消化道出血时，经丹参注射液的干预，血中过氧化 脂质含量升高和sod活性的降低幅度较小，恢复较快，改善预 后。wu zm等17报道经sa-a

11、治疗可以显著减轻四氯化碳诱 导的急性肝损伤大鼠肝毒性，不仅减少血清丙氨酸氨基转移 酶水平，还减轻组织学改变及氧化应激反应。wang cy21等 在四氯化碳诱导的急性肝损伤sd大鼠中发现,sa-a可以降低 肝组织中sod、过氧化氢酶、gsh-x和丙二醛活性及肝内线 粒体02的比例。说明sa-a对四氯化碳诱导的急性肝损伤大 鼠有抗氧化机制的保护作用。在肝损伤动物实验研究中发 现,sa-a可以抑制大鼠肝内线粒体脂质过氧化反应，阻止线 粒体膜的通透性改变及线粒体肿胀，抑制与线粒体膜通透性 有关的线粒体蛋白硫醇的氧化。这些研究表明丹参酚酸类化 合物对抗氧化应激相关的病理过程具有潜在药理作用22。5防治内

12、毒素血症肝硬化患者存在免疫功能及门脉高压血症血流动力学 的紊乱，肝脏内kupffer细胞对内毒素的清除能力减退，内毒 素水平浓度较正常人高23,肠血流缓慢，粘膜下毛细血管 和静脉扩张淤血,肠粘膜充血、水肿、糜烂，削弱了肠道屏障 功能，使通透性增加，肠道微生态系统失衡，肠道菌群失调使 细菌移位，并发肠源性内毒素血症，进一步加重肝功能的恶 化。丹参抗内毒素血症的机制可通过以下环节:降低血浆 中炎症因子水平。一些炎症因子对内毒素血症的发生、促进 起重要作用，是介导脂多糖(lps)肝损伤的主要因素24,其 中最主要是肿瘤坏死因子-a (tnf-a)及细胞因子如白介素 -kil-1)及白介素-6(il-

13、6)o多项实验研究表明丹参可以降 低血浆tnf-a的水平25 o wang jm等26在大鼠实验中发 现丹参可以抑制经由lps诱导的tnf-a释放，阻断内毒素的 毒性损害。秦长春等27在大鼠盲肠结扎穿孔(clp)复制脓 毒症模型造成的急性肝损伤中发现，丹参对脓毒症肝细胞损 伤保护与抑制tnf-a的生成有关。改善肠粘膜血液循环 28 o动物实验显示丹参水溶性酚酸类化合物可以改善肠系 膜血管的微循环、抗肠道炎症。guo j等29发现sa-a的治 疗明显改善lps诱导的大鼠肠系膜微循环紊乱，可以抑制由 lps刺激的大鼠中性粒细胞cdllb和cd18的表达及02和 h202的产生。kim js等30发

14、现丹参水溶性提取物(sme)可 以阻断在移植小肠和原始肠上皮细胞由lps诱导的增强绿色 荧光蛋白(egfp)的表达ikappab磷酸化。表明sme可以阻断 由lps诱导的nf-kappab信号途径，通过肠上皮细胞i kappab 激酶复合体靶位，说明细菌产物介导的nf-kappab信号可以 由天然植物药调节，提示对肠道炎症的预防和治疗产生新的 策略方向。维持肠上皮细胞完整性，减少肠粘膜通透性。 ding m等31研究了 sa-b对肠上皮细胞完整性的保护作用。 tnf-a可以增加肠上皮细胞的通透性,tnf- a产生的生物学 效应可以增加总细胞磷酸化水平，使连接蛋白酪氨酸酶改变, 导致细胞与细胞之

15、间连接功能的丢失,sa-b可以消除这些导 致细胞磷酸化的因素，有助于维持肠上皮细胞的完整性。6小结近年来，丹参单体成分研究和开发是热点，有效的水溶 性成分在丹参的药理作用中占重要地位，对肝硬化有多方 面、多环节、多途径保护作用，显示良好的应用前景,但是目 前的研究基本局限于小范围的体外细胞实验和动物实验，缺 少大规模、系统性的研究，更缺少大规模临床随机对照研究， 需要从基因水平、分子水平上深入阐述作用机制，为临床应 用打好理论基础研究工作。7参考文献l li yg,song l,liu m,et al. advancement in analysis of salviae ndltiorrhi

16、zae radix et rhizoma(danshen)j jchromatoqra,2009,1216(11)：1941-1953.2 陈小is,朱晰，何加，等.丹参注射液对大鼠酒精性 肝损伤组织学影响观察j.浙江中医杂 志,2003, (4):172-173.3 易善华，李永福黄英注射液合丹参注射液治疗慢性 肝炎肝硬化45例j 浙江中医杂志，2007,42 (4): 243.4 张文炜，毛子旭,徐列明丹参酚酸b盐对人肝星状细 胞内肌细胞增强因子2的影响j.自然科学进 展,2008,18(5):573-578.5 薛冬英，洪嘉禾,徐列明丹参酚酸b对转化生长因子 b1和血小板衍生生长因子-b

17、b在肝星状细胞内信号传导的 影响j中国中西医结合杂志,2006,26 (5): 439-442.6 成扬，平键，刘成，等，丹参酚酸b和姜黄素抑制大鼠 肝星状细胞细胞外信号调节激酶的磷酸化j.中国现代应 用药学杂志，2007,24(2): 96-100.7 成扬，平键，刘成，等.study on effects of extracts from salvia miltiorrhiza and curcuma longa in inhibiting phosphorylated extracelluar signal regulated kinase expression in rat，s hep

18、atic stellate cells j.中国结合医学杂志(英文 版),2006,12(3):207-211.8 lin yl,wu ch,luo m, et al. in vitro protectiveeffects of salvianolie acid b on primary hepatocytes andhepaticstellatecelljjethnopharmacol,2006,105 (1-2):215-222.9 zhao jf,liu ch,hu yy,et al.effect of salvianolic acid b on smad3 expression in

19、hepatic stellate cellsj hepatobiliary pancreat dis int. 2004,3(1)： 102-105.10 孔德润，胡乃中，许建明，等.丹参对肝硬化门脉髙 压血流动力学及血管活性物质影响的相关性j.安徽医科 大学学报,2006,41 (2): 166-168.11 刘星，鲍万国，牛俊奇，等.复方丹参对门脉高压症 大鼠血流动力学的影响j.吉林大学学报(医学 版),2006,32(6):232-237.12 田甜,徐列明丹参及其组分丹参酚酸b盐对门静脉 高压小鼠肝脏微循环的影响中西医结合学 报,2009,7(2):151-156.13 周扬，顾杰，徐

20、列明丹参酚酸b盐抑制内皮素-1所 致大鼠门静脉压力升高的药效及其作用机制j.中西医结 合学报,2007,5(1):61-64.14 naqasue n,yukaya h,oqawa y. human liver regenetation after major hepatic resection a study of nomal liver and liver with chroc hepatitis and cirrhosisj. ann surg,1987,206(1):30-39.15 朱清静，杨玲，黎远呈，等丹黄方对大鼠肝再生过 程中pc3、c-fos、lrf-1影响的实验研究j.中西

21、医结合肝 病杂志,2008,18(1):32-37,16 kong r,gao y,sun b, et al. the strategy of combined ischemia precondition and salvianolic acid b pretreatment to prevent hepatic ischemia reperfusioninjury in ratsj.diq dis sci,2009,54(12)：2568-2576.17 wu zm, wen t,tan yf. effects of salvianolic acid a on oxidative stres

22、s and liver injury induced by zarbon tetrachloride in ratsj. basic clin pharmacol toxicol,2007,100(2):115-120.18 韩振国，赵浩亮，苗青旺丹参素和泮托拉吐对肝硬 化大鼠肝部分切除术后肝再生的影响研究j中国药物与 临床,2004,4 (12):940-942.19 张剑平，魏红山，孙静媛，等脂质过氧化在乙型肝 炎后肝硬化、急性乙型肝炎、重型乙型肝炎的损伤作用j. 世界华人杂志,2005,13(12): 1465-1466.20 和水祥，徐俊丽，赵刚，等.丹参对肝硬化上消化道 大出血患者提

23、内脂质过氧化状态的影响j世界华人杂 志,2007,15(2):181-184.21 wang cy,ma fl,liu jt,et al. protective effectof salvianic acid a on acute liver injury induced by carbon tetrachloride inratsj biolpharmbull,2007,30 (1):44-47.22 wang xj, wang zb, xu jx effect of salvianic acid a on lipid peroxidation and membrane permeabili

24、ty in mitochondriaj j ethnopharmacol,2005,97(3):441-445.23 张雪，袁惠芳.肝病内毒素血症中医辨证初探j浙江中医杂志,2007,42(1):18.24 朱建红，廖x，朱丽佳丹参对内毒素肝损伤及肝 脏微循环障碍大鼠的保护机制研究j.微循环学杂 志,2008,18(4):14-15.25 郑晓丙，韩德五，马学惠，等.tnf-a在肠源性内毒 素血症中的作用及丹参防治机制研究j.中国病理生理杂 志,1999,15(1):51-53.26 wan jm,sit wh,lee cl,et al. protection of lethal toxicity of endotoxin by salvia miltioirhiza bunge is via reduction in tumor necrosis factor alpha releaseandliverinjuryjintimmunopharmacol,2006,6 (5):750.27 秦长春，吴新民.tnf-a在大鼠脓毒症肝损伤发病 机制中的作用及丹参的干预影响j.青海医学院学 报,2006,