微血管计数与乳腺癌临床病理因素及预后的关系.

1、微血管计数与乳腺癌临床病理因素及预后的关系乳腺癌的生长、侵袭与转移依赖于血管形成。我们用因子相关抗原 对癌组织中新生血管进行免疫组化染色，探讨微血管计数 （MVC）与乳腺癌侵袭、 转移及预后的关系。一、材料与方法1. 临床材料：收集 19861988 年间辽宁省肿瘤医院乳腺科收治的女性乳腺 癌 56 例，年龄 29 72 岁 （ 平均年龄 46.2 岁）。手术方式为简化根治术或标准 根治术。术前未经任何治疗，术后均行化疗， 17 例行术后放疗。术后病理均为 侵袭性非特殊型癌。组织学分级： 1级 22例， 2级17例， 3级17例。临床病 理分期：期 8 例，期 40 例，期 8 例。 56例无

2、失访，最长随访 8年。以 乳腺癌术后石蜡块制作切片，另取乳腺良性病变及正常组织蜡块 10 例作为对照 组。2. 染色方法：免疫组化染色采用 S-P 法，切片经脱蜡、固定， 0.3%H2 O2加 非免疫性动物血清阻断后，依次加 1，2，3 抗体，分别孵育 30 min ，DAB染 色，苏木素复染，脱水透明、封片。以 PBS替代一抗作为阴性对照，用试剂盒 中已知阳性片作为阳性对照。兔抗人因子相关抗原多克隆抗体及广谱 S-P 染 色试剂盒均为福州迈新生物技术产品。3. 结果判定：微血管判定及计数参照文献 1。每张切片在低倍镜 （100 倍）视野中，选出血管最丰富的 3 个区域；然后，在 200倍视野

3、下，由两位经验 丰富的病理医师同时计数微血管，计数 3 次，取其均值。棕色染色的内皮或内 皮细胞簇作为是单个、可计数的微血管。4. 统计学处理：应用 2检验及 t 检验。二、结果 癌组织内微血管形态不规则，部分血管无明显管腔。新生血管可分布在肿 瘤的任何位置，以靠近癌组织的间质中居多。在导管原位癌向侵袭性导管癌过 渡型的 7 例 中，可见微血管呈环状包绕原位癌组织。 56例乳腺癌平均 MVC为 73.2 ±28.8 ，以 73.2 作为高血管计数组与低血管计数组的分界点 2，对照组 10例MVC平均值为 32.3 ±12.5 ，两组差异有显著性（ P<0.01） 。M

4、VC与乳腺癌 组织学分级、临床分期、淋巴结转移相关（ P<0.05 ），而与绝经状况、肿瘤直 径、 ER、 PR表达无明显关系 （P>0.05） 。随访 5年，存活 45 例，死亡 11例； 随访 8 年，存活 38例，死亡 18 例。死亡患者的 MVC平均值（ 90.4 ±39.5 ）较 存活患者（ 60.1 ±29.8 ）明显增高 （P< 0.01 ）。经 8 年随访，在腋淋巴结阴性 乳腺癌中， 23例存活， 8例死亡。其存活组 MVC为52.9 ±28.2 ，死亡组为 80.7 ±36.1 ，两组差异有显著性 （P<0.01

5、） 。在腋淋巴结阳性患者中， 15 例存 活,10 例死亡， MVC平均值分别为 86.3 ±32.3 和93.8 ±36.4 ，两组差异无显著 性（P>0.05 ） 。三、讨论 恶性肿瘤的生物学行为及预后与新生血管的关系已引起人们的关注。早在 1971年， Folkman 便提出肿瘤生长依赖于血管形成。实验证明，如果没有补充 新血管的能力，多数肿瘤会局限于原发部位，而一旦新生血管形成，供应肿瘤 的初始血压随着肿瘤体积的增大，呈幂级升高，肿瘤血供由弥漫式变为灌注 式，肿瘤组织营养丰富，增长迅速。因此，新生血管形成是肿瘤转移过程中的 关键环节。本实验观察到的围绕原位癌的

6、血管环，可能是对癌组织释放的血管 生成因子的一种反应。有人将肿瘤边缘区与中央区的微血管密度相比较，发现 周边区血管明显较中央区多，从而证明肿瘤组织血管的生成与其生长的关系密 切3。Horak 报道， MVC与肿瘤大小有关。但本组研究未发现其相关性，而发 现 MVC与乳腺癌的组织学分级、临床分期、及淋巴结转移呈正相关。组织学分 级常代表肿瘤细胞的增殖速度，癌细胞增殖速度可能与血管生成因子诱导微血 管生成的能力有关。由于新生的血管分化不成熟，内皮细胞中管样小体增多， 细胞间连接松散，血管壁基底膜厚薄不一，导致断裂或缺乏。因此，癌细胞极 易穿透血管壁，经新生血管、淋巴管向腋窝或远处转移。此外，肿瘤内

7、新生血 管的增多也增加了癌细胞进入血循环的机会。本组手术后 5， 8 年死亡患者的 MVC较存活患者明显增高，说明乳腺癌的血 管形成、微血管计数与血行转移密切相关。对腋淋巴结阴性患者生存状况比较 发现，死亡组 MVC明显高于存活组；而在腋淋巴结阳性患者中，死亡组的 MVC 虽较存活组高，但差异无显著性。 Weidner 的研究发现，肿瘤内微血管与转移 密切相关，并明显影响患者的预后。在放大 200 倍的肿瘤组织切片视野中，微 血管计数超过 100 时，所有患者均发生区域淋巴结或（和）远处转移。微血管 每增加 10 个，淋巴结转移的危险性就增加 1.59 倍，远处转移的危险性增加 1.17 倍。

8、因此，我们认为 MVC可用于判断患者预后，或作为筛选高危转移患者 的可靠指标。特别是对腋窝淋巴结阴性患者，如肿瘤组织内微血管计数明显增 高，应加强术后全身治疗，以提高长期生存率。李艳萍（辽宁省肿瘤医院乳腺科 沈阳， 110042） 徐惠绵（中国医科大学附属第一临床医院肿瘤科） 张斌（辽宁省肿瘤医院乳腺科 沈阳， 110042）参考文献1，Bosari S,Delellis RA, Heatley GJ. Microvessel quantitation and prognosis in invasive breast carcinoma. Hum pathol, 1992,23: 755-761. 2，Ogawa Y, Chung YS, Nakata B, et al. Microvessel quantitation in invasive breast cancer by staining for factor -