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文档简介
1、十七常用培养基配方17.1营养琼脂培养基成分蛋白月东10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂1520g蒸馆冰looornl制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸徭水内,加入15%氢氧化钠溶液约2ml,校正ph7.27.4,加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化。分装在三角锥瓶屮,在121°c h咼压灭菌15分钟。17.2乳糖胆盐发酵管培养基(单料)成分蛋口腺20g猪胆盐5g乳糖10g0.04%漠甲酚紫水溶液25ml蒸馅水1000mlph7.4制法将蛋东,胆盐及乳糖溶于水中,校1e ph值,加入指示剂分装,每支管10ml,并放入一个小倒管(产气管),在115°c下高压灭菌15分钟。注:双料乳糖胆盐
2、发酵管培养茶除蒸憎水外,其他成分加倍。17.3乳糖发酵管培养基(单料)成分蛋白腺20g乳糖10g0.04% 71t酚紫水溶液25 ml蒸馅水1000mlph7.4制法将蛋白腺及乳糖溶于水中,校正ph,加入指示剂分装,每支管3ml,并放入一个小倒管(产生气),在 115°c下高压灭菌15分钟。注:双料乳糖发酵管培养基除蒸憎水外,其他成分加倍。17.4伊红美琼脂(emb)培养基成分蛋口腺10g乳糖log磷酸蛍二钾2g琼脂2g2%伊红溶液20ml0.65%美兰溶液10 ml蒸馆冰1000mlph7.1制法将蛋白豚,磷酸盐和琼脂溶解于蒸憎水屮,校正ph,分装于三角锥瓶内,在121°
3、c f高压灭菌15分钟后备用。临用时加入乳糖并加热熔化琼脂,冷却至50600 加入伊红和美蓝溶液摇匀,浇注平板。17.5远藤氏培养基配方:蛋白栋lo.og乳糖lo.og磷酸氯二钾3.5g亚硫酸氢钠2.5g碱性品红0.4g琼脂lo.og蒸憎水100ml制备:配料放入蒸憎水屮,搅拌15分钟,使其溶解,分装到三角瓶或试管,121°c灭菌20分钟,冷却后贮于暗处,最佳温度为4-8°c以保持浅粉红色。17.6 uba培养基酵母浸膏6.1g蛋白月东15g番茄汁(244ml)12.2g葡萄糖16gk2hpo40.31gkh2po403.1gmgso 7h2o0.12gnacl0.006g
4、fes04 7h2o0.006gmnso4 h2o0.006g琼脂12g蒸係水750ml啤酒250g将上述配料加入水中,加热至沸,搅拌至完全溶解,趁热加入未脱气的啤酒,轻轻搅拌混合,用hci 或naoh调ph为6.0+0,分装于三角瓶中,121°c蒸汽灭菌20min。待冷却后,放置在36±°c培养24h 小吋备用。17.7乳酸杆菌培养基uba+abp抑制剂溶液(uba见前)abp抑制剂溶液配料放线菌酮o.lg漠甲酚绿0.15g无离子水80ml2 苯乙醇20ml配制把浪屮酚绿放入5()毫升水中,煮沸至完全溶解,把放线菌駙溶于3()毫升水中,将两种溶液混合,分装于带螺
5、旋盖的瓶中,每瓶20毫升,在l2l°c蒸汽灭菌10分钟,冷却后,每个瓶内加5毫升2-苯乙醇,并 拧紧瓶盖。该溶液会分成两层,使用前须用力摇匀。17.8 kot培养基配方胰肮酶蛋白豚5.0g麦汁浸出生2.5g酵母浸出物2.5g肝浓缩物l.og麦芽糖5.0g超萄糖5.0g苹果酸0.5g吐温801mlk2hpo40.5gmgso4 7h2o025gmnso4 5h2o0.025g盐酸半光氨酸0.5g胞昔0.2g胸昔0.2g啤酒800ml放线菌酮100mlnan350mg琼脂20g蒸馆冰至1 oomiph25.417.9日本kl-2b培养基配方:唳蛋豚20.0g麦汁浸牛物lo.og酵母浸出牛
6、5.0g麦芽糖lo.ogk2hpo43.0gmgso4 7h2ol.ogmnso4 5h2o0.25g柠檬酸2.75g吐温80l oomgnan350mg琼脂20g蒸馆冰至i ooomiph5.217.10 mrs麦芽糖琼脂培养基没有一种单独的方法能够检测所有的乳酸细菌,这些细菌对各种糖的利用能力是有差别的,许多菌株能 在好氧条件下在琼脂培养基上生长,而另-些菌株则更容易在厌氧条件下生长。卜面列出的培养基,能检测出许多种的乳酸细菌。但是,这些培养基不是绝对的,使川者可根据自己的 经验进行修正后采用。原理:液体样品培养在含有介适的不同种类琼脂培养基的培养wl屮,计算活菌落数。麦芽糖5.0g蛋白豚
7、lo.og牛肉浸骨;粉8.0g酵母浸汕物4.0g葡萄糖20.0gpi.温-801.0mlk2hpo42.0g醋酸钠5.0g柠檬酸桜2.0gmnso4 5h2o0.2gmgso4 7h2o0.05g琼脂15g在蒸饰水中溶解,并定容至1l°用1.0nhc1或o.lnnaoh调至4.7。蒸汽灭菌121°c, 20分钟。17.11 ra-ra y 培养基nbb培养基是德国进行啤酒有害菌检查常用培养基,止如大家所知徳国在有害菌研究领域处于领先 地位,所以很多文献中提到使用nbb培养基有必要讲清楚。nbb培养基是prof.back专门为检查啤酒有害菌而开发的。nbb培养基分三种,nbb
8、-a (琼脂型)、nbb-b (试液型)、nbb-c (浓缩型),最近又推出nbb-am, 是在nbb-a的基础上开发的。nbb培养基是专利产品,山徳国doher公司制造销售。nbb-a适用于刷洗水、啤酒为样品的细菌检查。nbb-b适用于酵母(回收酵、培养酵母)的细菌检查。nbb-c适用于有酵母的混浊啤酒(发酵液、未过滤啤酒)。培养温度:25-28 °c培养时间:严垂污染样品,1天可以检出。污染轻微或生长缓慢的菌5天左右。培养条件:厌氧二氧化碳充气下。注:虽然nbb有很高的检出率,但由丁样品过滤或残有空气都可能使pectinatus菌、megashaera菌不能检出。17.12 lm
9、da培养基番茄汁固形物蛋白月东2%泛酸钙0.2%酵母浸膏1%葡萄糖1%碳酸钙0.5%柠檬酸0.11%磷酸盘二钾0.05%磷酸二氢钾0.05%硫酸镁0.02%硫酸猛0.001%氯化钠().001%硫酸铁0.001%漠甲酚红绿0.0022%叶温800.05%放线菌酗0.0007%琼脂1.5%配制加水溶解,分装三角瓶,121°c蒸汽灭菌10分钟,冷却后,避光保存。17.13日本pectinatus属菌检出培养基配方:lo.og8.0g4.0g2.0g5.0g0.2g().05g蛋白月东 麦芽浸出物 酵"浸出物k2hpo4naclmgso4 7h2omnso4 5h2o吐温80lm
10、ll-cystine-hclcmonnhydrate0.5gresazurin 钠盐i mgerythromycin5 mg琼脂20g蒸佛水至1000mlph6.017.14麦汁液体培养基取原麦汁(头滤麦汁),用单层滤纸过滤后,冷却至40°c以下。过滤后的原麦汁800-1000ml屮加一个蛋清,(加蛋清之前,往蛋清里加少许蒸惚水或麦汁充分搅匀, 产沫为止,然后加入麦汁里)混匀。加热煮沸(最好间接加热)20-30分钟,然后冷却至70°c左右厉用双层滤纸过滤。把过滤后的麦汁冷却至20°c后,测糖度,然后稀禅至糖度为12° po调整ph值为5.45.7,然后分
11、装(试管加6ml,小三角锥瓶加50ml,中三解瓶加200ml),用牛皮纸 包扎。在高压火菌锅里110°c压力下,火菌20分钟。17.15麦汁固体培养基步骤同上调整ph值为5.45.7后,加1.52.0%的琼脂粉,加热(最好间接加热)溶化琼脂,分装,包扎。 在高压灭菌锅里11()°c下,灭菌20分钟,冷却至6()°c左右后,摆斜面或倒平板。17.16 wln琼脂培养基酵"浸膏4.0g干酷素酮5.0g葡萄糖50.0g磷酸二氢钾0.55g氯化钾0.425 g氯化钙0.124g氯化铁0.0025g硫酸镁0.125g硫酸猛0.0025g琼脂20.0g浣甲酚绿0.0
12、22g蒸钢水1.0l上述组分除琼脂外溶解于蒸缁水中,调整溶液ph为5.5,加琼脂,很好混合,加热,使琼脂溶解,高压斧121 ”c蒸汽灭菌不少于15min,冷却至4045°c,分装于无菌培养皿屮o17.17 ypd培养基配方:酵母浸出物蛋白月东 葡萄糖 琼脂10g20g20g20g蒸憎水1000ml溶解后121°c灭菌15分钟,冷却,制成平皿固体培养基。17.18 ttc琼脂培养基溶液a:三苯基四醴氯2.0g磷酸缓冲液100.0ml(磷酸缓冲液浓度为0.134mol/l, ph7.2)(无水nah2po41.26g,无水na2hpo41.16g加水溶解 至 100ml)溶液b:
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