下载本文档
版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
1、基因组dna的提取和电泳(实验五)实验报告一、实验目的了解dna提取的方法,以及琼脂糖凝胶电泳分析dna技术。二、器材和试剂1器材水平琼脂糖电泳仪,离心机,水浴锅,研钵,离心管、移液枪、水稻幼苗等2.试剂1. lmol/l tris.cl(ph8.o)的配制:称取12.11g的tris,置于80 ml的创出0,加入浓盐酸 (约4.2 ml),调节ph值至8.0,定容至100 ml。2. 0.5 mol/l edta(ph8.0)的配制:18.61g na2edta-2h2o,加入 80 ml 的 ddh2o,用 naoh颗粒调ph值至8.0 (约需2g),定容至100 ml。3. 提取缓冲液的
2、配制:100 mmol/l tris.ci(ph8.0), 20 mmol/ledta, 500 mmol/l nacl, 1.5%sds4. 80/4/16氯仿:异戊醇:乙醇5. 6xloading buffer : 0.15%漠酚蓝,0.15%二甲苯青 ff , 5 mmol/ledta , 50%甘油6. 5xtris-硼酸(tbe)缓冲液成分及终浓度配制il溶液各成分的用量445 mmol/l tris 碱 445 mmol/l硼酸盐10 mmol/l edta 水54g27.5g硼酸20 ml 的 0.5 mol/l edta (ph 8.0)补足il三、实验步骤1. 在15汕的禽心
3、管屮加入5ml的提取缓冲液,60°c水浴预热。2. 植物叶l-2g,剪碎,在钵体中加入石英砂,加入预热的提取缓冲液,磨成粉末状, 6(tc水浴保温20 min,其间不时缓慢摇动。3. 5000 rpm离心5分钟,仔细吸取上清液至另一离心、管中,4. 加入5 ml氯仿/戊醇/乙醇溶液,颠倒混匀(需带手套,防止皮肤损伤),室温下静置 5-10分钟,使水相和有机相混匀。5. 室温下离心5000 rpm离心5分钟。6. 仔细吸取上清液至另一离心管中,加入一倍体积异丙醇,混匀,室温下放置片刻即出 现絮状沉淀。7. 离心5000 rpm,离心5 min,弃去异丙醇,室温晾干。&视沉淀多少,加入iml左右ddhzo溶解,可在60°c水浴中放置15分钟以上助溶。9.取dna样品5 pl,加入1 ml6xloading buffer,混匀,加入0.7%的琼脂糖凝胶加样孔 中,电泳,检测dna的分子大小。4、实验结果和讨论实验分析:本次实验由于种种原因我是和植保102班的同学一起做的,我们组3人,实验 过程比较严谨,受到了老师的表扬,实验结果也很令人满意。下面是实验过程中的注意点:1、研磨不能太久太用力,会导致dna片段断掉。2、实验 室的某些试剂,如氯仿,有毒性,应带手套进行。电泳的时候不知是时间的原因还是都做得不错,结果相差不是很远(如上图),第五组
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 《认识几分之一》教学设计
- 税收筹划:理论、实务与案例(第4版)课件 第九章 利润分配的税收筹划
- 食品类生产安全事故综合应急预案
- GB1级公用燃气管道直接检验方案
- 广东省深圳市五年级上学期英语期中试卷七(含答案)
- 药学技能复习试题附答案
- 新教材同步系列2024春高中化学第二章烃同步微专题1有机物分子中共线共面问题课件新人教版选择性必修3
- 综合管廊运维数据采集技术规范
- 外研版八年级英语下册期末试题及答案
- 外研版英语必修2课文翻译
- 学习任务群下大单元教学的实施路径:以语文四上第七单元为例
- GB/T 35877-2018粮油检验动植物油脂冷冻试验
- GB/T 21835-2008焊接钢管尺寸及单位长度重量
- 医院中药部门质控检查表(绩效考核)
- GA 884-2018公安单警装备催泪喷射器
- 小学数学思想方法(课件)
- 校园突发事件应急领导小组成员与职责
- 《燃料电池的实验探究》说课课件(全国大赛获奖案例)
- 品质控制计划(QC工程图)
- 2022年-2023安全生产专业实务(化工安全)考试题
- 黑龙江省牡丹江市各县区乡镇行政村村庄村名居民村民委员会明细
评论
0/150
提交评论