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1、专专 业:业: 口腔正畸学口腔正畸学导导 师:师: 王小琴王小琴 教授教授研研 究究 生:生: 赵赵 华华mp有家族聚集倾向mp可能为常染色体显性遗传病 局部因素有一个影响mp的主基因且符合孟德尔遗传 多因素影响 gheriani marazita 许多学者ricardo silviene 20032003年年 20072007年年1919世纪世纪国内研究现状国内研究现状snpsnp位点位点基因基因gc蛋白质蛋白质glu asp 天冬氨酸谷氨酸研究目的研究目的材料与方法材料与方法实验试剂与仪器实验试剂与仪器对照组(正常):sna 、snb、 anb、上颌长、 上颌位置、mp-fh 在正常范 围
2、之内, 2anb4实验组( mp ) :sna、上颌长、上颌位置、 mp-fh在正常范围之内, anb0。实验组实验组6060人人对照组对照组4545人人采静脉血采静脉血5ml5ml提取全部提取全部dnadna设计相应目的基因的引物设计相应目的基因的引物pcrpcr扩增目的基因扩增目的基因hinfhinf 酶切酶切统计学分析统计学分析实验步骤实验步骤dna提取50lpcr50lpcr反应体系反应体系 试剂名称剂量10buffer5lmgcl2(25mm)4ldntp(10mm)1l上游引物(10m)1l下游引物(10m)1ltaq酶0.4l模板dna10l三蒸水28lpcrpcr反应参数反应参
3、数 温度(温度()时间时间预热预热94942min2min变性变性949420s20s退火退火565630s30s延伸延伸727230s30s循环次数循环次数3636次次 酶的确定酶的确定 hinf 5 g a n t c 3 3 c t n a g 5 统计学分析统计学分析结结 果果电泳结果电泳结果目的基因扩增产物目的基因扩增产物200bpmarker目的基因实验组酶切后凝胶电泳图实验组酶切后凝胶电泳图 100bp200bpgggg型酶切后片段长度:型酶切后片段长度:83bp83bp、134bp134bp;cccc型酶切后片段长度:型酶切后片段长度:217bp 217bp gcgc型酶切后片
4、段长度:型酶切后片段长度:83bp83bp、134bp 134bp 、 217bp217bp对照组酶切后凝胶电泳图 100bp200bpgggg型酶切后片段长度:型酶切后片段长度:83bp83bp、134bp134bp;cccc型酶切后片段长度:型酶切后片段长度:217bp 217bp gcgc型酶切后片段长度:型酶切后片段长度:83bp83bp、134bp 134bp 、 217bp217bp组别等位基因x2p基因频数频率实验组g410.67c190.33对照组g280.620.4260.514c170.38 注:p0.05,即实验组与对照组之间等位基因频率差异无显著性。 组别基因型频数频率
5、x2p实验组gg320.52gc180.30cc100.18对照组gg230.511.8350.400gc100.22cc120.27 注:p0.05,即实验组与对照组之间的基因型分布差异无显著性。 讨讨 论论nell-1nell-1基因的特点基因的特点结果分析结果分析由于实验组与对照组的病例有限,对由于实验组与对照组的病例有限,对nell-1nell-1基基因与因与mpmp患者的内在联系需增加样本量做进一步患者的内在联系需增加样本量做进一步的研究,对其它位点及二者之间的内在联系仍的研究,对其它位点及二者之间的内在联系仍需深入探讨。需深入探讨。nell-1nell-1基因的基因的rs61150458rs61150458多态性位点在中国汉族多态性位点在中国汉族mpmp人群与正常人群之间的等位基因频率及基因人群与正常人
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