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文档简介
1、3胞嘧啶脱氧核苷酸胞嘧啶脱氧核苷酸 参与的组分参与的组分 在在DNA复制中的作用复制中的作用 解旋酶解旋酶 翻开翻开DNA双链双链 DNA母链母链 提供提供DNA复制模板复制模板 4种脱氧核苷酸种脱氧核苷酸 合成子链的原料合成子链的原料 DNA聚合酶聚合酶 催化合成催化合成DNA子链子链 引物引物 使使DNA聚合酶可以从引物的聚合酶可以从引物的3端开端开 始衔接脱氧核苷酸始衔接脱氧核苷酸DNA复制所需求的条件:复制所需求的条件:细胞内细胞内DNA的复制的复制PCR不不同同点点解旋解旋解旋酶,边解旋边复制解旋酶,边解旋边复制80100高温解旋,双链完全高温解旋,双链完全分开分开酶酶DNA解旋酶,
2、解旋酶,DNA聚合酶,聚合酶,DNA衔接酶衔接酶TaqDNA聚合酶聚合酶引物引物RNADNA或或RNA能量能量ATP不加不加温度温度体内温暖条件体内温暖条件高温高温子链子链合成合成一条链延续先导链,另一一条链延续先导链,另一条链不延续,先合成片段,再条链不延续,先合成片段,再由由DNA衔接酶衔接滞后链衔接酶衔接滞后链两条子链均延续合成两条子链均延续合成一一样样点点需求提供需求提供DNA复制模板复制模板四种脱氧核苷酸作为原料四种脱氧核苷酸作为原料子链延伸的方向都是从子链延伸的方向都是从5端到端到3端端细胞内细胞内DNA的复制与的复制与PCR的比较的比较DNA聚合酶与聚合酶与DNA衔接酶的异同衔接酶的异同DNA聚合酶聚合酶DNA衔接酶衔接酶不不同同点点作用作用单个核苷酸加到已有的单个核苷酸加到已有的单链片段的单链片段的3羟基上羟基上衔接两条衔接两条 DNA片段片段的缺口的缺口能否需能否需求模板求模板需求需求不需求不需求一样点一样点 都是构成磷酸二酯键都是构成磷酸二酯键NoImagePCR三步曲三步曲 预变性预变性保温保温 变变 性性延伸延伸 721min复性复性 5530s PCR的突出优点的突出优点
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