各种缓冲液的配制方法之欧阳地创编

1、各种缓冲液的配制方法时间：2021.03. 04创作：欧阳地na2hp0厂柠檬酸钠缓冲液ph 0.2mol/lna2hpo4(0lmol/l柠檬酸钠(ml)ph0.2mol/lna2hp04(ml)0lmol/l柠樣酸钠 (ml)ml)2.20.419.65.210.729.282.41.2418.765.411.158.852.62.1817.825.611.608.402.83.1716.835.812.097.913.04.1115.896.012.637.373.24.9415.066.213.226.783.45.7014.306.413.856.153.66.4413.566.61

2、4.555.453.87.1012.906.815.454.554.07.7112.297.016.473.534.28.2811.727.217.392.614.48.8211.187.418.171.834.69.3510.657.618.731.274.89.8610.147.819.150.855.010.309.708.019.450.55na2hp04,2h20 ,分子量=178. 050. 2mol/l溶液含35. 61g/l柠檬酸.h2o,分子量二210. 140. 1mol/l溶液含21.01g/l柠様酸柠樟酸钠缓冲溶液(o.lmol/l )pho.lmol/ltrw 酸0l

3、mol/l柠様酸ph0imol/l柠樣酸0lmol/l柠樣酸钠(ml)钠(ml )(ml )(ml)3.018.61.45.08.211.83.217.22.85.27.312.73.416.04.05.46.413.63.614.95.15.65.514.53.814.06.05.84.71534.013.16.96.03.826.24.212.37.76.22.817.24.411.48.66.42.018.04.61039.76.61.418.64.89.210.8柠檬酸.h2o,分子量二210. 140.1mol/l溶液含21.01g/l柠檬酸钠.2h20 ,分子量二294. 12;

4、0. 1mol/l溶液含ph0.2mol/lnaac(ml)0.2mol/lhac(ml)ph0.2mol/lnaac(ml)0.2mol/lhac(ml)3.60.759.254.85.904.103.81.208.805.07.003.004.01.808.205.27.902.104.22.657.355.48.601.404.43.706.305.69.100.904.64.905.105.89.400.6029. 4g/l醋酸缓冲液(o.2mol/l , 18°c )0. 2moi/l溶液含naac. 3h20,分子量二136. 0927. 22g/l(1)醋酸盐溶液的配制

5、：醋酸一醋酸钠缓(ph3. 6)取醋酸钠5. 1g,加冰醋酸20ml ,再加水稀释至醋酸一醋酸钠缓冲液250mi,即得。(ph3. 7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加渙酚蓝指 示液1ml及冰醋酸6080ml,至溶液从蓝色转变为纯绿 色，再加水稀释至1000ml,即得。醋酸一醋酸钠缓冲液 (ph3. 8)取2moi/l醋酸钠溶液13ml与2moi/l醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0. 5ml,再加水稀释至1000ml ,即得。醋酸一醋酸钠缓冲液(ph45)取醋酸钠18g,加冰醋酸9. 8ml,再加水稀释至1000ml,即得。醋酸一醋酸钠缓冲液(ph4. 6)取醋

6、酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸 调节ph值至4.6 ,再加水稀释至100m i ,即 得。醋酸一醋酸钠缓冲液(ph6. 0)取醋酸钠54. 6g,加1 mo i /l醋酸溶液20ml溶 解后，加水稀释至500ml,即得。用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的 ph=pka+1gc(naac) /c(hac)(在此，c(hac)指醋酸的浓 度，c(naac)指醋酸钠的浓度，ka是醋酸的解离常数 =1.8*10-5 (1.8 乘 10 的-5 次方),pka=-lgka=4. 75, 将ph=5. 5代入，可得c(naac)/c (hac) =5. 6通常我们配 制时会使 c (hac)=0.

7、1mol/l,或是 c (hac) =0. 2mo i /l 等。 若是配制 c(hac)=o. 1mol/l,则 c(naac)=0. 56mol/l 称 量醋酸钠固体质量为82*0. 56=46克量取冰醋酸体积为 0.1*1000/17. 5=5. 7mlo将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸 加入1000ml水中溶解、搅拌均匀即可。当然若想配制其 它的浓度，也可照公式计算即可，通常缓冲溶液不能配 的太稀，否则缓冲能力要下降，太浓的话又浪费试剂。苯甲酸氢钾氢氧化钠缓冲液ph0.1mol/lnaoh(ml)0.2mol/l®_甲酸氢钾(ml )加水至(ml)4.00.4025.00100.

8、004.23.6525.00100.004.47.3525.00100.004.612.0025.00100.004.817.5025.00100.005.023.6525.00100.005.229.7525.00100.005.435.2525.00100.005.639.7025.00100.005.843.1025.00100.006.045.4025.00100.006.247.0025.00100.000. 2mol/l苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥 过24小时的苯二甲酸氢钾20. 44g溶于水中，稀释至 500mlo磷酸缓冲液(o.2mol/l )ph 0.2mol/l

9、na2hpo4( 0.2mol/lnah2po4( ph0.2mol/lna2hpo4(ml)0.2mol/lnah2po4(ml)ml)ml)5 8.0q92.07.061.039.0o6.012.387.77.272.028.06.218.581.57.481.019.06.426.573.57.687.013.06.637.562.57.891.58.56.849.051.08.094.753na2hp04. 2h20 ,分子量= 78. 05,0. 2mo 1 /l溶液含35. 61g/lnah2p04. 2h20 ,分子量= 56. 03,0.2mo1/l溶液含31.21g/lnah

10、2p04. h20,分子量=138. 03,0. 2mo 1 /l溶液含27.6g/lna2hp04. 12h20,分子量二358. 22,0.加ol/l溶液含71.64g/l磷酸盐缓冲液(pbs)配制方法0. 01m pbspbs (135 mm naci, 2.7 mm kci, 1.5 mm kh2p04, and8 mm k2hp04, ph 7. 2)pbs 缓冲液（ph7. 2 7. 4） : naci 137mmo i /l , kci 2.7mmol/l, na2hp04 4. 3mmol/l, kh2p04 1.4mmol/l 称 7.9g naci , 0.2g kci ,

11、 0.24g kh2p04（or 1.44g na2hp04）和 1.8g k2hp04,溶于 800 ml 蒸镭水中，用 hci调节溶液的ph值至7.4,最后加蒸镭水定容至1 lo 保存于4°c冰箱中即可。需要注意的是，通常所说的浓度0.01 m指的是缓冲溶液 中所有的磷酸根浓度，而非na离子或k离子的浓度， na离子和k离子只是用来调节渗透压的。母液的配制：0.2m na2hp04 :称取 71.6g na2hp0412h20 , 溶于 1000mi 水0. 2m nah2p04：称取 31.2g nah2p04-2h20,溶于 1000ml 水各种浓度pb （ph二7. 4）的

12、配制:先配 0.2m pb （ph二7.4, 100ml）:取 19ml 0. 2mol/l 的 nah2p04, 81ml 0.2mol/l 的 na2hp04,即可。然后只需将0.2m pb （ph二7. 4）按相应比例适当稀释即 可，如：0. 1m pb （ph二7.4）:取 500ml 0. 2m pb,加水稀释至 1000mi 即可。0. 01m pb (ph二7.4):取 50ml 0. 2m pb,加水稀释至 1000mi 即可。0. 02m pb (ph=7.4):取 100ml 0. 2 m pb,加水稀释至 1000mi 即可。若需要naci的话，加入naci至0.9% (

13、g/100ml )即 可。另：其它各种另ph值的0. 2m pb (100ml)配方：ph0.2m nah2p04 (ml) 0. 2m na2hp04 (ml)5.7 93.56.55.8 9285.9 90106. 087. 712.36. 185156.281.518.56. 377. 522.56. 473. 526.56. 568. 531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627. 133677.228727.323777.419ml81ml7.516847.613877.710.590.57.88.591.57.97938.05.

14、394.70. 01m磷酸盐缓冲液（pbs）配制方法称取 8g naci、0.2g kci、1.44g na2hp04 和 0.24g kh2p04,溶于800ml蒸镭水中，用hci调节溶液的ph值 至7.4 ,最后加蒸徭水定容至1l即可。在 15lbf/in2（1034x 105pa）高压下蒸气灭菌（至少20分 钟），保存存于室温或4°c冰箱中。需要注意的是，通常所说的浓度0. 01m指的是缓冲溶液 中所有的磷酸根浓度，而非na离子或k离子的浓度， na离子和k离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免 疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青 霉素和链霉素之后再调ph

15、、定容、灭菌消毒。ph7.67.47.27.0h201000100010001000naci8.58.58.58.5na2hp042.22.22.22.2nah2p040. 10.20.30.4根据经验来看，新鲜配置的pbs搅匀后其ph值约在7. 2-7.4之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常 数发生了改变，在经过昼夜的时间后，ph值会明显改变 （我亲自测过偏酸）。所以做实验的同学可要注意了， ph值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性。所以务 必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题。每 次使用前最好用试纸测一下过夜了的pbs,如果发生偏酸 或偏碱，注意重新换新液。pbs缓冲液

16、称取 naci 8g , kci 0.2g , na2hp04?12h20 3.63g, kh2p04 0. 24g,溶于900ml双蒸水中，用盐酸调ph值至 7.4,加水定容至1l,常温保存备用。pbst缓冲液取300 i tween-20加入pbs 100ml中，混匀后即刻使 用。现用现配。如果是把所有固体加大十倍，配置为浓缩液，工作时候 十倍稀释，那么，在刚配好浓缩液时，ph在6.5左右， 明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒 调，但是有更方便的方法。十倍稀释以后，ph自动升高到所需要的值。不需要其它 任何处理。这个可以先取少量试一试，配好之后再测一 次ph8. 0的pbs配方

17、详细1. naci 137mmoi/l , kci 2.7mmol/l , na2hp044. 3mmol/l, kh2p04 1.4mmoi/l2. 向烧杯中加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶 解。3. 滴加浓盐酸将ph值调节至8.0,然后加入去离子水将 溶液定容至1 lo4. 高温高压灭菌后，室温保存。注意：上述pbs buffer中无二价阳离子，如需要，可在 配方中补充 1 mm caci2 和 0. 5 mm mgci2o0.05mo l/l pbs （磷 酸 缓 冲 液 phosphate buffer solution, pbs）的配制：甲液：0. 05mol/l na2hp

18、04溶液：称取磷酸氢二钠9. 465g7. 099g,加蒸徭水至 1000ml ;乙液：0. 05mol/l kh2p04溶液：称取磷酸二氢钾，9. 07g6. 803g,加蒸镭水至 1000"。将甲乙液分装在棕色瓶内，于4°c冰箱中保存，用时甲、 乙两液各按不同比例混合，即可得所需ph的缓冲液，见 下表：ph甲液m i乙液m i5. 292.597.55.595.095.05.9110.090.06. 2420.080.06. 4730.070.06. 6440.060.06.8150.050.06. 9860.040.07. 1770.030.07. 3880.020.

19、07. 7390.010.08. 0495.05.0你要配制ph=6. 8的pbs,可用甲、乙液各50ml混合即可。硼酸缓冲液（o2mol/l硼酸盐）ph005mol/l硼砂( ml )02mol/l硼酸(ml )ph005mol/l硼砂( ml )02mol/l硼酸(ml)7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08.08.76.04.0&03.07.09.08.02.0硼砂 nabxk 10h20,分子量=381.43, 0. 05mo i /l 溶液=0. 2mo i /l 硼砂含 19. 07g/l硼酸，分子量=61.84, 0. 2m

20、ol/l溶液含12. 37g/l硼砂易失去结晶水，必须在带塞得瓶中保存；硼砂溶液也可以用半中和的硼酸溶液代替o.lmol/lhci(0.02mol/lkcl(m加pho.lmol/lhci(0.02mol/lkcl(mml)1)水 至（ ml）ml)1)94.562.701001.723.7638.1075.1012.451001.818.6840.6059.6820.151001.914.9842.5047.4026.301002.011.9044.05ph盐酸氯化钾缓冲液100100100100m水(加至i)1.537.6431.201002.19.4645.031001.629.9035

21、.001002.27.5246.251000.02mol/lkci溶液：溶7.455g氯化钾于水中，稀释至500ml苯二甲酸氢钾盐酸缓冲液pho.lmol/lhci0.02mol/ls2z加pho.lmol/lhci0.02mol/l加水(ml)甲酸氢钾（ml水(ml)甲酸氢钾（ml至（n)至 ()i)mi)2.246.6025.001003.214.8025.001002.439.6025.001003.49.9525.001002.633.0025.001003.66.0025.001002.826.5025.001003.82.6525.001003.020.4025.001000. 02mol/l苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24小时额苯二甲酸氢钾20.44g溶于水