实验二抗菌药物敏感性试验

1、实验二 抗菌药物敏感性试验张卫军张卫军 赵赵 卓卓顾顾 江江 曾曾 浩浩TELTEL：753591753591临床微生物学和微生物检验实验验证性实验验证性实验 临床微生物学教研室临床微生物学教研室1. 纸片扩散法2. 稀释法3. E试验4 .联合药敏实验药敏试验常用方法 临床微生物学教研室临床微生物学教研室v了解：了解： 1 1稀释法、稀释法、E-TESTE-TEST的原理、方法的原理、方法 2 2联合药敏试验的结果判读和临床意义联合药敏试验的结果判读和临床意义v理解：理解： 纸片扩散法（纸片扩散法（K-BK-B法）原理和注意事项法）原理和注意事项v掌握：掌握： 纸片扩散法（纸片扩散法（K-B

2、K-B法）的操作方法、结果的判读和临法）的操作方法、结果的判读和临床意义床意义 目的要求 临床微生物学教研室临床微生物学教研室实验材料菌株菌株大肠埃希菌大肠埃希菌培养基培养基水解酪蛋白琼脂（水解酪蛋白琼脂（MHMH琼脂）琼脂）纸片纸片环丙沙星、头孢唑啉、万古霉素环丙沙星、头孢唑啉、万古霉素其他其他载玻片、无菌生理盐水、镊子、无菌棉签、游载玻片、无菌生理盐水、镊子、无菌棉签、游标卡尺（毫米尺）标卡尺（毫米尺） 临床微生物学教研室临床微生物学教研室CIZ50ug/ml CIZ50ug/ml实验原理贴药敏纸片贴药敏纸片药物扩散药物扩散形成抑菌圈形成抑菌圈 临床微生物学教研室临床微生物学教研室实验内容

3、一、操作方法一、操作方法挑混比涂贴量 临床微生物学教研室临床微生物学教研室实验内容二、纸片扩散法结果判读及临床意义二、纸片扩散法结果判读及临床意义用游标卡尺量取抑菌圈直径用游标卡尺量取抑菌圈直径参照标准解释结果，按抗菌药物敏感性分为敏感、参照标准解释结果，按抗菌药物敏感性分为敏感、中介和耐药。中介和耐药。抗菌药物抗菌药物含药量含药量抑菌直径（抑菌直径（mmmm） 耐药耐药中介中介敏感敏感头孢唑林头孢唑林30ug30ug1414151715171818庆大霉素庆大霉素10ug10ug1212131413141515环丙沙星环丙沙星50ug50ug1515162016202121 临床微生物学教研

4、室临床微生物学教研室实验内容三、注意事项三、注意事项1 1、培养基的质量，如、培养基的质量，如pHpH、厚度、表面湿度和保存等均会、厚度、表面湿度和保存等均会影响抑菌圈大小；影响抑菌圈大小；2 2、药敏纸片的药量、吸水性、直径、保存等会影响测定、药敏纸片的药量、吸水性、直径、保存等会影响测定结果；结果；3 3、接种菌量也是影响结果的重要因素；、接种菌量也是影响结果的重要因素；4 4、采用标准菌株同时进行药敏试验作为质控；、采用标准菌株同时进行药敏试验作为质控；5 5、操作因素、操作因素 临床微生物学教研室临床微生物学教研室24mm15mm 临床微生物学教研室临床微生物学教研室思 考 题1.1.

5、如何评价抗生素的敏感性？如何评价抗生素的敏感性？2.2.常用体外药敏试验方法的比较。常用体外药敏试验方法的比较。 临床微生物学教研室临床微生物学教研室稀释法 临床微生物学教研室临床微生物学教研室稀释法 临床微生物学教研室临床微生物学教研室结合稀释法和扩散法原理对微生物药敏试验直接定量的技术结合稀释法和扩散法原理对微生物药敏试验直接定量的技术E-TEST 临床微生物学教研室临床微生物学教研室E-TEST 临床微生物学教研室临床微生物学教研室联合药敏试验 临床微生物学教研室临床微生物学教研室联合药敏试验 临床微生物学教研室临床微生物学教研室联合药敏试验 临床微生物学教研室临床微生物学教研室抗菌药物

6、敏感试验的意义v可预测抗菌治疗的效果可预测抗菌治疗的效果; ;v指导抗菌药物的临床应用指导抗菌药物的临床应用; ; v监测细菌耐药性监测细菌耐药性, ,分析耐药菌的变迁分析耐药菌的变迁, ,掌握耐药菌感掌握耐药菌感染的流行病学染的流行病学, ,以控制和预防耐药菌感染的发生和流以控制和预防耐药菌感染的发生和流行。行。 临床微生物学教研室临床微生物学教研室 将定量抗菌药敏纸片贴在已接种的测试菌将定量抗菌药敏纸片贴在已接种的测试菌的的MHMH琼脂平板上，纸片所含药物吸收琼琼脂平板上，纸片所含药物吸收琼脂水分溶解并不断向纸片周围扩散形成递脂水分溶解并不断向纸片周围扩散形成递减的梯度浓度，在纸片周围抑菌范围内测减的梯度浓度，在纸片周围抑菌范围内测试菌生长被抑制而形成的无菌生长抑菌圈，试菌生长被抑制而形成的无菌生长抑菌圈，抑菌圈大小反应测试菌对测定药物的敏感抑菌圈大小反应测试菌对测定药物的敏感性