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文档简介

1、一、果酒制作一、果酒制作1 1、酵母菌:真菌、出芽生殖、兼性厌氧、酵母菌:真菌、出芽生殖、兼性厌氧、2020度度3 3、流程:选果、流程:选果冲洗冲洗榨汁榨汁发酵发酵酒精酒精2 2、原理:、原理:c c6 6h h1212o o6 62c2c2 2h h5 5oh+2cooh+2co2 2+2atp+2atp4 4、检验:酸性条件酒精遇重铬酸钾呈、检验:酸性条件酒精遇重铬酸钾呈灰绿色灰绿色例:有酿制葡萄酒的两个简易装置,请分析回答例:有酿制葡萄酒的两个简易装置,请分析回答(1)果酒的制作离不开酵母菌,酵母菌在有氧无氧)果酒的制作离不开酵母菌,酵母菌在有氧无氧条件下都能生存,所以,它属于条件下都

2、能生存,所以,它属于_微生物。微生物。(2)在葡萄酒的自然发酵过程中,酵母菌的来源)在葡萄酒的自然发酵过程中,酵母菌的来源是是 。(3)制作果酒,需将温度严格控制在)制作果酒,需将温度严格控制在_。制。制作果酒后制果醋,应将温度控制在作果酒后制果醋,应将温度控制在_。 (4)葡萄汁装入发酵瓶时,要留有大约)葡萄汁装入发酵瓶时,要留有大约1/3的空的空间,这是因为间,这是因为_。既为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气,又防止发酵旺盛时汁液溢出既为酵母菌大量繁殖提供适量的氧气,又防止发酵旺盛时汁液溢出兼性厌氧型兼性厌氧型附着在葡萄皮上的野生型酵母菌附着在葡萄皮上的野生型酵母菌 18253035(5)甲装

3、置中,)甲装置中,a液体是液体是_,nahco3溶液的作用溶液的作用是是 ;葡萄汁葡萄汁若用乙装置,在发酵过程中,必须进行的操作若用乙装置,在发酵过程中,必须进行的操作是是 。与乙装置相。与乙装置相比,甲装置的优点是比,甲装置的优点是 。(6)果汁发酵后是否有酒精产生,可用)果汁发酵后是否有酒精产生,可用 来检来检验。在酸性条件下,该试剂与酒精反应呈现验。在酸性条件下,该试剂与酒精反应呈现 。在果酒酿造过程中,如果果汁灭菌不严格,含有醋在果酒酿造过程中,如果果汁灭菌不严格,含有醋酸杆菌酸杆菌 ,在酒精发酵旺盛时,醋酸杆菌能否将果汁,在酒精发酵旺盛时,醋酸杆菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸中的糖发酵

4、为醋酸? ? 。灰绿色灰绿色不能不能吸收酵母菌酒精发酵产生的吸收酵母菌酒精发酵产生的co2每隔每隔12小时左右(一定的时间)将瓶盖拧松一次小时左右(一定的时间)将瓶盖拧松一次既能及时吸收(发酵产生的)既能及时吸收(发酵产生的)co2,又能减少被杂菌污染的机会,又能减少被杂菌污染的机会重铬酸钾重铬酸钾二、果醋制作二、果醋制作1 1、醋酸菌:原核、分裂生殖、异养需氧、醋酸菌:原核、分裂生殖、异养需氧、3030度度3 3、流程:选果榨汁、流程:选果榨汁酒精发酵酒精发酵醋酸发酵醋酸发酵2 2、原理:、原理: (2 2)c c6 6h h1212o o6 62c2c2 2h h5 5oh+2cooh+2

5、co2 2(1 1)c c6 6h h1212o o6 6+2o+2o2 22ch2ch3 3cooh+2cocooh+2co2 2+h+h2 2o oc c2 2h h5 5oh+ooh+o2 2chch3 3cooh+hcooh+h2 2o o三、腐乳制作三、腐乳制作1 1、毛霉:真菌、孢子生殖、异养需氧、毛霉:真菌、孢子生殖、异养需氧、1818度度3 3、流程:、流程:豆腐长毛豆腐长毛加盐腌制加盐腌制瓶装卤汤瓶装卤汤密封腌制密封腌制 2 2、原理:毛霉的、原理:毛霉的蛋白酶蛋白酶、脂肪酶脂肪酶分解豆腐分解豆腐 小分子肽、氨基酸小分子肽、氨基酸、甘油、脂肪酸甘油、脂肪酸4 4、盐与酒精:抑

6、制微生物生长、盐与酒精:抑制微生物生长 1 1腐乳制作有多种微生物参与,其中起主要腐乳制作有多种微生物参与,其中起主要作用的是作用的是。 2 2豆腐发酵主要利用了微生物产生的豆腐发酵主要利用了微生物产生的,通,通过发酵,豆腐中营养物质的种类过发酵,豆腐中营养物质的种类,且更易于消化和,且更易于消化和吸收。吸收。 3 3在腐乳制作过程中,抑制微生物的物质有在腐乳制作过程中,抑制微生物的物质有盐、盐、 、等。等。 4 4含水量为含水量为左右的豆腐适于制作腐乳,若左右的豆腐适于制作腐乳,若你完成了腐乳制作,可以从你完成了腐乳制作,可以从等方面评价乳腐的质量。等方面评价乳腐的质量。毛霉毛霉 蛋白酶等酶

7、类蛋白酶等酶类 增多增多 酒酒 香辛料香辛料 7070 色泽、口味、块形等色泽、口味、块形等实例:就腐乳制作回答下列问题:实例:就腐乳制作回答下列问题:四、泡菜制作四、泡菜制作1 1、乳酸菌:原核、分裂生殖、异养厌氧、乳酸菌:原核、分裂生殖、异养厌氧3 3、流程:菜叶、盐水、装坛、密闭、流程:菜叶、盐水、装坛、密闭2 2、原理:、原理:c c6 6h h1212o o6 62c2c3 3h h6 6o o3 3+2atp+2atp4 4、测定亚硝酸盐:、测定亚硝酸盐:nono2 2- -+ +对氨基苯磺酸对氨基苯磺酸玫瑰红玫瑰红专题专题2:微生物的培养与应用:微生物的培养与应用如图所示的接种方

8、法如图所示的接种方法为为 ,在此接种过程中,在此接种过程中接种环在火焰上灼烧接种环在火焰上灼烧 次。次。一、培养基:一、培养基:3 3、种类:液体培养基、固体培养基(琼脂)、种类:液体培养基、固体培养基(琼脂)4 4、选择培养基:、选择培养基: 青霉素培养基:杀细菌、留真菌青霉素培养基:杀细菌、留真菌1 1、概念:微生物生长的营养物质、概念:微生物生长的营养物质2 2、成分:水、无机盐、碳源、氮源、成分:水、无机盐、碳源、氮源二、无菌技术二、无菌技术1 1、消毒:温和方法杀死表面部分有害微生物、消毒:温和方法杀死表面部分有害微生物巴氏消毒、煮沸、药剂、(巴氏消毒、煮沸、药剂、(如:如:75%7

9、5%酒精)、酒精)、紫外线紫外线2 2、灭菌:强烈方法杀死一切微生物、孢子和芽孢、灭菌:强烈方法杀死一切微生物、孢子和芽孢 (1 1)灼烧灭菌:接种环、试管口)灼烧灭菌:接种环、试管口 (2 2)干热灭菌:玻璃器皿、金属用具)干热灭菌:玻璃器皿、金属用具 (3 3)高压蒸气灭菌:培养基、无菌水)高压蒸气灭菌:培养基、无菌水三、微生物培养技术三、微生物培养技术1 1、步骤:、步骤:(1 1)配制培养基)配制培养基(2 2)灭菌:高压蒸气灭菌)灭菌:高压蒸气灭菌(3 3)倒平板:把培养基分装培养皿)倒平板:把培养基分装培养皿(4 4)接种:分散菌种、形成菌落)接种:分散菌种、形成菌落 方法:平板划

10、线法、稀释涂布平板法方法:平板划线法、稀释涂布平板法 2 2、应用:、应用:( (1)1)土壤中分解尿素的细菌的分离和计数土壤中分解尿素的细菌的分离和计数 11选择培养基:氮源选择培养基:氮源-尿素尿素 22步骤:土壤溶液步骤:土壤溶液稀释稀释 接种接种菌落计数菌落计数 (2 2)土壤中分解纤维素的微生物的分离)土壤中分解纤维素的微生物的分离 11选择培养基:碳源选择培养基:碳源-纤维素纤维素 22原理:纤维素原理:纤维素 纤维二糖纤维二糖 葡萄糖葡萄糖 c1c1酶、酶、c cx x酶酶 葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶 纤维素纤维素+ +刚果红刚果红红色物红色物纤分解纤分解透明圈透明圈 khkh2 2p

11、opo4 41.4 g1.4 gnana2 2hpohpo4 42.1 g2.1 gmgsomgso4 47h7h2 2o o0.2 g0.2 g葡萄糖葡萄糖10 g10 g尿素尿素1 g1 g琼脂琼脂15 g15 g将上述物质溶解后,用蒸馏将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到水定容到100 100 mlml(4 4)转为固体培养基时,常)转为固体培养基时,常 的方法接种的方法接种. .(5 5)下列材料或用具:)下列材料或用具:培养细菌用的培养基与培养皿,培养细菌用的培养基与培养皿,玻棒、试管、锥玻棒、试管、锥形瓶和吸管,形瓶和吸管,实验操作者的双手。其中需实验操作者的双手。其中需要灭菌的是:要

12、灭菌的是: ;需要消毒的是:;需要消毒的是: 。(填序号)。(填序号)(6 6)在进行分离分解尿素的细菌实验时,)在进行分离分解尿素的细菌实验时,a a同学从培养基上筛选出大约同学从培养基上筛选出大约150150个个菌落,而其他同学只选择出大约菌落,而其他同学只选择出大约5050个菌落。个菌落。a a同学的实验结果产生的原因可能同学的实验结果产生的原因可能有有 (填序号)(填序号)由于土样不同由于土样不同 由于培养基污染由于培养基污染 由于操作失误由于操作失误 没有设置对照没有设置对照(7 7)实验结束后,使用过的培养基应该进行)实验结束后,使用过的培养基应该进行 处理后,才能倒掉。处理后,才

13、能倒掉。(1)右表所示的培养基不能用于植物组织培养的)右表所示的培养基不能用于植物组织培养的理由是理由是 。(2)培养基中加入尿素的目的是筛选)培养基中加入尿素的目的是筛选 。 (3)“目的菌目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的培养基中的 和和 ,实验需要振荡培,实验需要振荡培养,原因是养,原因是 。缺少植物激素缺少植物激素 目的菌目的菌尿素尿素葡萄糖葡萄糖为目的菌提供氧气为目的菌提供氧气 稀释涂布平板法或平板划线法稀释涂布平板法或平板划线法和和 灭菌灭菌 实例:分解尿素的细菌的分离与计数实例:分解尿素的细菌的分离与计数一、菊花组织的培养一、菊花组织的培养

14、1 1、原理:植物细胞的全能性、原理:植物细胞的全能性2 2、步骤:、步骤:(1 1)制备)制备msms固体培养基固体培养基(灭菌)(灭菌) 无机盐、维生素、无机盐、维生素、蔗糖蔗糖、激素、激素 (2 2)外植体消毒)外植体消毒(未开花新生侧枝)(未开花新生侧枝) (3 3)接种、培养、移栽)接种、培养、移栽 脱分化脱分化-愈伤组织愈伤组织-再分化再分化-从芽从芽-诱导生根诱导生根 ph5.8ph5.8、温度、温度18-2218-22、每日光照、每日光照12h12h专题专题3 植物的组织培养技术植物的组织培养技术二、月季花药培养二、月季花药培养1 1、花药选取:初花期、未开放花蕾、单核期、花药

15、选取:初花期、未开放花蕾、单核期2 2、培养过程:、培养过程: 花粉花粉(脱分化)(脱分化)愈伤组织愈伤组织 (脱分化)(脱分化) (再分化)(再分化) 胚状体胚状体(分化)(分化) 丛芽丛芽诱导生根诱导生根3 3、花粉发育检查:、花粉发育检查:(1 1)醋酸洋红法(细胞核红色)醋酸洋红法(细胞核红色)(2 2)焙花青)焙花青- -铬矾法(细胞核蓝黑色)铬矾法(细胞核蓝黑色)接种和培养接种和培养植物体植物体选取水稻花药选取水稻花药对花蕾消毒对花蕾消毒实例:就水稻花药培养的步骤,请回答下列问题:实例:就水稻花药培养的步骤,请回答下列问题: 1. 1.选取的水稻花药应为选取的水稻花药应为期期,此时

16、细胞核由中央移向细,此时细胞核由中央移向细胞一侧,花药培养成功率最高胞一侧,花药培养成功率最高 2.2.通过花药培养产生单倍体植株一般有两种途径:一种通过花药培养产生单倍体植株一般有两种途径:一种是花粉通过是花粉通过阶段阶段发育为植株,另一种是在诱导培养基上先发育为植株,另一种是在诱导培养基上先形成形成再将其诱导分化成植株再将其诱导分化成植株 3.3.试管苗形成过程中,必须从培养基中获得无机盐或矿试管苗形成过程中,必须从培养基中获得无机盐或矿质元素和小分子有机物质等营养物质要促进花粉细胞分裂质元素和小分子有机物质等营养物质要促进花粉细胞分裂和生长,培养基中应有和生长,培养基中应有和和两类激素两

17、类激素单核单核胚状体胚状体愈伤组织愈伤组织细胞分裂素细胞分裂素生长素生长素一、果胶酶在果汁生产中的应用一、果胶酶在果汁生产中的应用1 1、作用:分解细胞壁、胞间层的果胶,形成半乳糖醛酸、作用:分解细胞壁、胞间层的果胶,形成半乳糖醛酸2 2、种类:、种类:多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶、果胶酯酶3 3、水果泥、水果泥+ +果胶酶果胶酶保温混合保温混合过滤记录果汁量过滤记录果汁量二、加酶洗衣粉的洗涤效果二、加酶洗衣粉的洗涤效果1 1、种类:碱性蛋白酶、碱性脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶、种类:碱性蛋白酶、碱性脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶2 2、作用:分解污渍(蛋白质、脂肪

18、、淀粉、纤维素)、作用:分解污渍(蛋白质、脂肪、淀粉、纤维素)3 3、酶制剂:用特殊化学物质包裹酶,使之耐酸碱、耐高、酶制剂:用特殊化学物质包裹酶,使之耐酸碱、耐高 温、忍受表面活性剂温、忍受表面活性剂专题专题4:酶的应用:酶的应用三、固定化酶三、固定化酶1 1、原理:把酶固定在不溶水的载体上,易于催、原理:把酶固定在不溶水的载体上,易于催化回收、重复使用化回收、重复使用2 2、高果糖浆生产:、高果糖浆生产:(1 1)原理:葡萄糖)原理:葡萄糖果糖(葡萄糖异构酶)果糖(葡萄糖异构酶)(2 2)固定化酶:酶固定在载体上、装入反应柱)固定化酶:酶固定在载体上、装入反应柱(3 3)生产过程:上端注入

19、葡萄糖,柱内酶催化,)生产过程:上端注入葡萄糖,柱内酶催化,下端生产果糖浆下端生产果糖浆固定化酶和固定化细胞固定化酶和固定化细胞是利用理化方是利用理化方法,把酶或细胞固定在一定空间内发法,把酶或细胞固定在一定空间内发挥作用的技术。挥作用的技术。四、固定化细胞四、固定化细胞2 2、方法:、方法:(1 1)包埋法:包埋在多孔载体里)包埋法:包埋在多孔载体里(2 2)化学结合法:结合到载体上)化学结合法:结合到载体上(3 3)物理吸附法:吸附到载体表面)物理吸附法:吸附到载体表面1、概念:、概念: 3 3、固定化酵母细胞、固定化酵母细胞(1 1)酵母细胞活化:)酵母细胞活化:1g1g干酵母干酵母10

20、ml10ml水水(2 2)配制)配制caclcacl2 2溶液:溶液:0.05m0.05m(3 3)配海藻酸钠溶液:)配海藻酸钠溶液:0.7g0.7g海藻酸钠海藻酸钠10ml10ml水水(4 4)海液与酵母细胞混合成)海液与酵母细胞混合成a a液液(吸入注射器)(吸入注射器)(5 5)固定化酵母细胞:把)固定化酵母细胞:把a a液滴入液滴入caclcacl2 2形成凝胶珠形成凝胶珠(6 6)冲洗凝胶珠(蒸馏水)冲洗凝胶珠(蒸馏水)(7 7)酒精发酵:凝胶珠)酒精发酵:凝胶珠+ +葡萄糖液葡萄糖液酒精(酒精(2525度)度)专题专题5 dna和蛋白质技术和蛋白质技术 dnadna的粗提取与鉴定的

21、粗提取与鉴定一、实验原理一、实验原理 1.1.血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过度而导致细胞膜和细血细胞在蒸馏水中会渗透吸水过度而导致细胞膜和细胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有dna的溶液。的溶液。2.2.dna在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度在氯化钠溶液中的溶解度,是随着氯化钠的浓度的变化而改变的。的变化而改变的。dna在在物质的量浓度为物质的量浓度为0.14 moll的氯化钠溶液中的溶解度最低,的氯化钠溶液中的溶解度最低,利用这一原理,可以使利用这一原理,可以使溶解在氯化钠溶液中的溶解在氯化钠溶液中的dna析出析出。 3.3.dna不溶于酒精溶液不溶

22、于酒精溶液,但细胞中的但细胞中的某些物质则可以溶某些物质则可以溶于酒精。于酒精。利用这一原理,可以进一步利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少提取出含杂质较少的的dna。 4.4.dna遇二苯胺(沸水浴)会变成蓝色,因此,遇二苯胺(沸水浴)会变成蓝色,因此,二苯胺二苯胺可以作为鉴定可以作为鉴定dna的试剂的试剂。 二、二、pcrpcr技术技术1 1、反应体系:、反应体系:(1 1)模板、原料、酶、)模板、原料、酶、atpatp、缓冲液、缓冲液 (2 2)耐高温的)耐高温的dnadna聚合酶(聚合酶(taqtaq酶)酶)(3 3)引物:一小段)引物:一小段dnadna或或rnarna2 2、过

23、程:、过程:(1 1)变性:)变性:9595dnadna解旋解旋(2 2)复性:)复性:5555引物与模板配对引物与模板配对(3 3)延伸:)延伸:7272合成子链合成子链例:例:pcrpcr技术技术( (多聚酶链式反应多聚酶链式反应) ) 在在dnadna半保留复制的前提下,半保留复制的前提下,利用热变性原理,在试管中进行利用热变性原理,在试管中进行dnadna的人工复制。很短的时的人工复制。很短的时间内,将间内,将dnadna大量扩增,使实验室所需要的遗传物质不再受大量扩增,使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。限于活的生物体。(1)pcr(1)pcr每次循环可分为每次循环可分为

24、、 、 三个步骤。三个步骤。(2)(2)当温度降低时,引物与模板当温度降低时,引物与模板 端结合,在端结合,在dnadna聚合酶聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成两的作用下,引物沿模板延伸,最终合成两dnadna分子,此过程分子,此过程中原料是中原料是 ,遵循的原则是,遵循的原则是 。(3)pcr(3)pcr技术的必要条件,除了模板、原料、技术的必要条件,除了模板、原料、atpatp、酶外以至、酶外以至少还需要三个条件,即:液体环境、适宜的少还需要三个条件,即:液体环境、适宜的 、 ,前者由前者由pcrpcr仪自动调控,后者则靠仪自动调控,后者则靠 维持。维持。(4)dna(4)dna的

25、复制需要引物,其主要原因的复制需要引物,其主要原因是是 。变性复性延伸3碱基互补配对原则碱基互补配对原则 四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸温度温度酸碱度酸碱度缓冲液缓冲液dna聚合酶只能从聚合酶只能从3端延伸端延伸dna链链三、血红蛋白的提取和分离三、血红蛋白的提取和分离1 1、提取:、提取: (1 1)红细胞的洗涤:生理盐水)红细胞的洗涤:生理盐水-除杂蛋白除杂蛋白 (2 2)血红蛋白的释放:蒸馏水)血红蛋白的释放:蒸馏水-40%-40%甲苯甲苯 (3 3)分离血红蛋白溶液:离心分层)分离血红蛋白溶液:离心分层 第第3 3层红色透明液体层红色透明液体 (4 4)透析:磷酸缓冲液除杂(离子小分子)

26、透析:磷酸缓冲液除杂(离子小分子) 维持血红蛋白正常特性维持血红蛋白正常特性2 2、分离:、分离:(1 1)凝胶色谱法)凝胶色谱法原理:根据分子量大小分离蛋白质原理:根据分子量大小分离蛋白质 不同蛋白质通过多孔凝胶通道时:不同蛋白质通过多孔凝胶通道时: 大分子路程短、流动快大分子路程短、流动快先收集先收集 小分子路程长、流动慢小分子路程长、流动慢后收集后收集 (2 2)电泳)电泳法法 原理:根据带电性质、分子大小形状不同,电原理:根据带电性质、分子大小形状不同,电 场下迁移速度不同,分离蛋白质场下迁移速度不同,分离蛋白质 电荷性质电荷性质- -移动方向、移动方向、电荷量电荷量- -移动速度移动

27、速度 分子大小分子大小- -阻力大小阻力大小(4)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体 (填(填“相同相同”或或“不同不同”)洗脱时洗脱时对洗脱液的流速要求是对洗脱液的流速要求是(3)装填凝胶色谱柱时,色谱柱内不能有气泡存在,原因装填凝胶色谱柱时,色谱柱内不能有气泡存在,原因是是 。(2)自己制作凝胶色谱柱时。在色谱柱底部自己制作凝胶色谱柱时。在色谱柱底部d位位置相当于多孔板的结构可由置相当于多孔板的结构可由 替代。替代。a相对分子质量较大,无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快尼龙网和尼龙纱气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序降低分离效果相同保持稳定实例:凝胶色谱技术,据图回答问题

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