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1、专题一基因工程单元测试B卷(时间:60分钟 满分:100分)一、选择题(每题只有一个正确答案,共40分)1基因工程中,切割目的基因和载体所用的限制酶及切口必备的特点是( )A可用不同的限制性内切酶,露出的黏性末端必须相同B必须用相同的限制性内切酶,露出的黏性末端可不相同C必须用相同的限制性内切酶,露出的黏性末端必须相同D可用不同的限制性内切酶,露出不同的黏性末端2下列关于基因表达载体构建的相关叙述,不正确的是( )A需要限制酶和DNA连接酶 B必须在细胞内进行C抗生素抗性基因可作为标记基因D启动子位于目的基因的首端3下图中有关工具酶功能的叙述,不正确的是( )A切断a处的酶为限制性内切酶 B连
2、接a处的酶为DNA连接酶C切断b处的酶为DNA解旋酶 D连接b处的酶为RNA聚合酶4下列不能作为基因工程受体细胞的是( )A动物的受精卵 B人的神经细胞 C大肠杆菌细胞 D酵母菌细胞5 以下是几种不同限制性核酸内切酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列的叙述中,错误的是( )A以上DNA片段是由4种限制酶切割后产生的B若要把相应片段连接起来,应选用DNA聚合酶C上述能进行连接的两个片段,其连接后形成的DNA分子是D限制酶和DNA连接酶作用的部位都是磷酸二酯键6腺苷脱氨酶(ADA)基因缺陷症是一种免疫缺陷病,对患者采用基因治疗的方法是:取出患者的白细胞,进行体外培养时转入正常ADA基因,再将这些
3、白细胞注射入患者体内,使其免疫功能增强,能正常生活。下列有关叙述中,正确的是( )A正常ADA基因替换了患者的缺陷基因B正常ADA基因通过控制ADA的合成来影响免疫功能C白细胞需在体外培养成细胞系后再注射入患者体内DADA基因缺陷症属于获得性免疫缺陷病7基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的,在基因操作的基本步骤中,不进行碱基互补配对的步骤是( )A人工合成基因 B目的基因与运载体结合C将目的基因导入受体细胞 D目的基因的检测与表达8抗虫棉品种是利用转基因技术,将外源Bt(苏云金芽孢杆菌)基因导入到棉花植株体中获得抗虫的棉花种质材料,再利用传统育种技术(杂交、回交等),将这些种质材料改良后
4、育成的携带Bt基因且其它性状优良的棉花品种。抗虫棉之所以抗虫,是因为外源Bt基因整合到棉株体中后,可以在棉株体合成一种叫-内毒素的伴孢晶体,该晶体是一种蛋白质晶体,被鳞翅目等敏感昆虫的幼虫吞食后,在其肠道碱性条件和酶的作用下,或单纯在碱性条件下,伴孢晶体能水解成毒性肽,并很快发生毒性。为检测实验是否成功,最方便的方法是检测棉花植株是否有( )A抗虫基因 B抗虫基因产物 C新的细胞核 D相应性状9 当前,蛋白质工程是发展较好、较快的分子工程。它将蛋白质与酶的研究推进到崭新的时代,为蛋白质和酶在工业、农业和医药方面的应用开拓了诱人的前景。蛋白质工程开创了按照人类意愿改造、创造符合人类需要的蛋白质的
5、新时期。那么,蛋白质工程中需要直接进行操作的对象是( )A氨基酸结构 B蛋白质空间结构C肽链结构 D基因结构 10关于蛋白质工程的说法,错误的是 ( ) A蛋白质工程能定向地改造蛋白质分子的结构,使之更加符合人类需要B蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作,定向改变分子的结构C蛋白质工程能产生自然界中不存在的新型蛋白质分子D蛋白质工程与基因工程密不可分,又称为第二代基因工程11下列有关基因工程中限制性内切酶的描述,错误的是( )A一种限制性内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列 B限制性内切酶的活性受温度的影响C限制性内切酶能识别和切割RNA D限制性内切酶可从原核生物中提取12下列
6、有关基因工程中运载体的说法中,正确的一项是( )A在进行基因工程操作中,被用作运载体的质粒都是天然质粒B所有的质粒都可以作为基因工程中的运载体C质粒是一种独立于细菌染色体外的链状DNA分子D作为载体的质粒DNA分子上应有对重组DNA进行鉴定和选择的标记基因13下列有关基因工程的叙述正确的是( ) ADNA连接酶和质粒都是构建重组质粒必需的工具酶B基因工程常以抗菌素抗性基因为目的基因C在畜牧业上主要目的是培育体型巨大、品质优良的动物 D蛋白质的结构可以为合成目的基因提供材料14下列关于基因工程的叙述,正确的是( )A基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因B细菌质粒是基因工程常用的运载体C通常用一
7、种限制酶处理含目的基因的DNA,用另一种限制酶处理运载体DNADDNA连接酶的主要功能是将黏性末端碱基之间的氢键连接起来15用基因工程可使大肠杆菌合成人的蛋白质,下列叙述不正确的是 ( ) A常用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒BDNA连接酶和RNA聚合酶是重组质粒形成过程必需的工具酶C可用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒D导人大肠杆菌的目的基因不一定能成功表达16 菊花的紫花和白花性状是由一对等位基因控制的,紫色(R)对白色(r)显性。现已克隆到控制紫色的基因R,如果你打算利用上述材料开展研究,那么下表选项中,合理的是( )选项实验方案实验目的A用白花植株与紫花植株杂交判
8、断显隐性 B将控制开紫花的基因转入其他植物中 改变受体植物花的颜色C将R基因转入大肠杆菌并大量表达紫色蛋白生产紫色蛋白用作染料D用紫花杂合子的嫩芽组织培养获得纯合子植株用于育种17(2008全国卷)已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点,如图中箭头所指。如果在该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断,则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子,若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经该酶酶切后,这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是 ( ) A3 B4 C9 D1218下图是获得抗虫棉的技术流程示意
9、图。卡那霉素抗性基因(kanr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下列叙述正确的是 ( )A构建重组质粒过程中需要限制性内切酶和DNA连接酶 B愈伤组织的分化产生了不同基因型的植株C卡那霉素抗性基因(kanr)中有该过程所利用的限制性内切酶的识别位点D抗虫棉有性生殖后代能保持抗虫性状的稳定遗传二、非选择题(共60分)19(13分)科学家已经将鱼的抗冻蛋白基因成功的导入到番茄体内,培育出具有很强耐寒能力的番茄。请回答下列有关问题:要获得该抗冻蛋白基因,可采用 等方法。从鱼的体内切割该抗冻蛋白基因所用的工具是 ,其特点是 。某种细菌中的一种叫做EcoRI的限制
10、酶,能够专一识别GAATTC的序列,并在G和A之间将这段序列切开。假如用限制酶EcoRI处理以下的DNA序列片段,请先写出下面DNA的互补链,然后在图的右边画出限制酶EcoRI处理后的黏性末端。G A T T G G C C T T A A G C T C G A切割完成后,采用 酶将运载体和该抗冻蛋白基因连接,连接后得到的DNA分子称为 。然后,一般采用 法将其导入番茄细胞内。可以利用植物组织培养技术从而培养出的符合要求的植株,则其中所依据的原理是 。将鱼的抗冻蛋白基因“嫁接”到番茄上,并不影响番茄体内其他基因的表达,这说明 。20(10分)为扩大可耕地面积,增加粮食产量,黄河三角洲等盐碱地
11、的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。获得耐盐基因后,构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的 处,DNA连接酶作用于 处。(填“a”或“b”)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和 法。由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用 技术。该技术的核心是 和 。为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功,既要用放射性同位素标记的 作探针进行分子杂交检测,又要用 方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。21(12分) DNA亲子鉴定测试原理是:从被测试者的血滴或口腔黏膜细胞或者培育的组织内提取DNA,用限制性内切酶将DNA样本切成特定的小片段,放进凝胶内
12、,用电泳推动DNA小片段分离,再使用特别的“探针”去寻找基因。相同的基因会凝聚在一起,然后利用特别的染料在X光下,便会显示由DNA探针凝聚于一起的黑色条码。每个人的条码一半与其母亲的条码吻合,另一半与其父亲的条码吻合。反复几次过程,每一种探针用于寻找DNA的不同部位并形成独特的条码,便可得到超过999的分辨概率。 请回答:限制性内切酶能将DNA样品切成特定的小片段,这主要体现了酶的 ( )A专一性 B高效性 C多样性 D作用条件温和“探针”是指 ( )A某一个完整的目的基因 B目的基因片段的特定DNAC与目的基因相同的特定双链DNA D与目的基因互补的特定单链DNA条码一半与其母亲的条码吻合,
13、另一半与其父亲的条码吻合。为什么?。样品DNA经PCR技术扩增,可以获取大量DNA分子克隆。在试管中进行DNA的人工复制(如图)。在很短的时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需的遗传物质不再受限于活动的生物体。PCR技术的原理是 ,图中A过程表示 。某样品DNA中共含3000个碱基对,碱基数量满足:(A+T):(G+C)=1/2,现欲得到100个与样品相同的DNA,至少需要向试管中加入 个腺嘌呤脱氧核苷酸。A过程也称为DNA的变性,此过程在温度高达9095时才能完成,说明DNA分子具有 性。利用PCR技术获取目的基因的前提是 。由图中信息分析可知,催化C过程的酶是 ,它与正常细
14、胞里的酶区别是 。22(14分)利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术。2005年我省青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目通过鉴定,该项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点,可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶等医药产品,造福人类健康。下图为利用生物技术获得生物这一新品种和抗虫棉的过程,据图回答:在基因工程中,A表示 ,如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因,过程使用的酶区别于其他酶的特点是 ,B表示 。在研究过程中,研究人员首先从相关基因组中获取了目的基因,并采用_ 技术对目的基因进行了扩增,然后将目的基因与质粒等载体组合形成了重组载体。在重组载体的构建过
15、程中需要的工具酶有_。基因表达载体的构建是基因工程的核心,一个完整的基因表达载体至少包括哪些部分? 。将目的基因导入受体细胞的过程中,在过程中一般是采用 方法,在过程中一般采用 方法,受体细胞一般是 。由于转基因表达产物存在于山羊的乳汁中,检测其体内是否出现药用蛋白,在分子水平上的检测方法及结果是什么? 。23( 11分)天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类,用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转人酿酒酵母菌,获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题:将淀粉酶基因切割下来所用的工具是 ,用 将淀粉酶基因与载体拼接成新的DN
16、A分子,下一步将该DNA分子 ,以完成工程菌的构建。若要鉴定淀粉酶基因是否插人酿酒酵母菌,可采用的检测方法是;若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶,可采用 检测。将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上,培养一定时间后,加入碘液,工程菌周围出现透明圈,请解释该现象发生的原因。如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小?。微生物在基因工程领域中有哪些重要作用?。【参考答案】1C 解析:目的基因和载体需要用同一种限制性内切酶切割,露出相同的黏性末端两者才能连接在一起。2B 解析:基因表达载体是目的基因与载体结合,在此过程中需用同一种限制酶切割目的基因与载体,用DNA连接酶将相同的末端连接
17、起来;基因表达栽体的构建是在细胞外进行的;基因表达载体包括启动子(位于基因首端使转录开始)、终止子、目的基因和标记基因(鉴别受体细胞中是否含有目的基因,如抗生素抗性基因)。3D 解析:DNA解旋酶作用的部位是碱基对之间的氢键,限制性内切酶切割DNA分子的部位的是磷酸二脂键从而露出黏性末端或平末端,而DNA连接酶是通过磷酸二脂键连接起来,RNA聚合酶是把核糖核苷酸连接起来,作用的部位也是磷酸二酯键。4B 解析:动植物的受精卵均可以作为基因工程的受体细胞,以培育成转基因动物。大肠杆菌细胞和酵母菌细胞是人们最常用的受体细胞之一,它们具有很强的繁殖能力,是利用微生物来生产某些药品的良好实验材料。人的神
18、经细胞高度分化,已失去了分裂能力,作为基因工程的受体细胞已经没有任何意义。5B 解析:一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且在特定的切点上切割DNA分子。由此可知,以上DNA片段是由4种限制酶切割后产生的。按照碱基互补配对原则,用的DNA连接酶连接起来的相应片段是和,作用的部位是磷酸二酯键。6B 解析:基因治疗是将正常的基因导入到有基因缺陷的细胞中,正常的ADA基因可以控制合成正常的ADA来影响免疫功能:细胞系阶段的细胞一般都发生了基因突变,故不能培养到细胞系,只是将增殖得到的细胞(株)注射到患者体内;ADA基因缺陷症是先天性免疫缺陷病。7C 解析:人工合成目的基因时, DNA的单链与互
19、补链之间发生碱基互补配对;目的基因与运载体结合时黏性末端的碱基互补配对;目的基因的检测是利用DNA分子杂交的原理(即碱基互补配对原则),表达中DNA的转录和翻译均有碱基互补配对;只有目的基因导入受体细胞时不经过碱基互补配对。8D 解析:目的基因的鉴定与检测有四种方法,其中从个体水平进行抗虫或抗病的接种实验是最简单的办法。即在抗虫棉花植株上放养少量的棉铃虫,一段时间后,观察棉铃虫的存活状况和棉花叶的受损情况。若棉铃虫不存活、棉花叶受损很轻,则实验成功。9D 解析:蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基N修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造或制造一种新的蛋白质,以
20、满足人类的生产和生活的需求。其目标是根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质结构进行分子设计,但因为基因决定蛋白质,因此对蛋白质的结构进行设计改造,归根到底,还需对相应的基因进行操作,按要求进行修饰加工改造,使之能控制合成人类需要的蛋白质。10B 解析:蛋白质工程是对基因进行修饰或基因合成,对现有的蛋白质进行改造,或产生新的蛋白质。11C 解析:主要考查了基因工程中工具酶的有关知识。大部分酶的成分是蛋白质,少数酶的成分是RNA。酶的活性受到温度和pH的影响;限制性内切酶的特点是一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的位点进行切割DNA分子。限制性内切酶主要是从原核生物体内分离出来的。
21、12D 解析:质粒是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点和一些特殊的遗传标记基因。在进行基因工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行人工改造的。13D 解析:基因工程的工具有限制性内切酶、DNA连接酶和载体,但载体(如质粒)不是酶;基因工程中抗生素抗性基因常作为标记基因;在畜牧业上不是为了培育体型巨大的动物而是为了培育品质优良的动物;蛋白质的氨基酸序列可以反映目的基因的脱氧核苷酸序列。14B 解析:培育的转基因生物不同,选用的目的基因就不同,不一定以抗茵素抗性基因为目的基因。只有用同一
22、种限制酶分别处理含目的基因的DNA和运载体,才能切割出互补的黏性末端,才可以用 DNA连接酶将目的基因与运载体连接起来。DNA连接酶连接的是 DNA片段的“边框”,形成磷酸二酯键,不能用于连接氢键。15B 解析:用相同的限制性内切酶处理目的基因和质粒是为了获得相同的黏性末端;DNA连接酶和限制性内切酶是重组质粒形成过程必需的工具酶;作为载体必须具备的条件是含有标记基因。质粒上常舍抗生素抗性基因,所以可以用含抗生素的培养基检测大肠茵中是否导入了重组质粒若导入重组质粒,大肠杆菌能生活;目的基因导入大肠杆菌后不一定能成功表达基因的表达受一些因素的影响。16B 解析:此题考查基因工程及遗传方案。关键是
23、理解生物性状与某一蛋白的关系,植物组织培养在育种中的优缺点。已知白花为隐性性状,则A为测交实验,可判断杂交个体的基因型;利用基因工程将R基因导入其他生物内就可以控制相关性状一一紫花的出现;紫花性状并不一定是紫色蛋白体现的;植物体细胞组织培养属于无性繁殖,并不改变遗传物质的组成。17C 解析:从这三个切点进行酶切,可得到片段种类有四种(即a、b、c、d四种);从其中二个切点进行酶切,可得到不同于前面的片段种类有三种(即a+ b、b+ c、c+d三种);只有一个切点,得到不同于前面的片段种类有二种(即a+ b+ c、b+ c+d三种)。故最多能产生片段种类4+3+2=9种。18A 解析:质粒与目的
24、基因结合时需要用同一种限制性内切酶切割,用DNA连接酶连接;愈伤组织由相同细胞分裂形成,分化后产生相同基因型的植株;卡那霉素抗性基因作为标记基因不能有限制性内切酶的切割位点;抗虫棉有性生殖后代可能会发生性状分离,抗虫性状不一定能稳定遗传。19从基因文库中获取目的基因(或利用PCR技术扩增目的基因或通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成) 限制性内切酶 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子(2分)(3分)CTAACCGGAATTCGAGCT GATTGGCCTTAA GCTCGA CTAACCGG AATTCGAGCTDNA连接酶 重组DNA 农杆菌转化法 植物
25、细胞的全能性 不同生物的DNA在结构上具有统一性(或基因是生物的遗传物质结构和功能的基本单位)(2分)解析:主要考查了基因工程的基本工具、基本操作程序等知识点。常用的切割工具是限制酶,它具有专一性,经切割后露出DNA分子末端有互补的黏性末端、平末端两种形式。DNA连接酶是将运载体和目的基因连接一起的工具。获取目的基因的方法有三种,将目的基因导入植物这一受体细胞常采用的方法是农杆菌转化法,还有基因枪法、花粉管通道法等。在基因工程中,一般来说目的基因不会影响到受体细胞内其它基因的表达,是因为不同生物的基因在结构上基本相同。20a a 基因枪法(花粉管通道法)植物组织培养 脱分化 再分化耐盐基因(目
26、的基因)(2分) 一定浓度盐水浇灌(移栽到盐碱地中)(2分)解析:本题以“科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系”为背景,考查了有关基因工程和植物细胞工程的基本内容。基因工程中的工具酶一限制酶和DNA连接酶的作用是断开或连接两核苷酸间的磷酸二酯键。将目的基因导入植物受体细胞常用的方法是农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。目的基因的检测与鉴定,常利用DNA分子杂交技术(探针)等作分子水平的检测和个体生物学水平的鉴定。植物组织培养的基本过程是植物在离体状态下,进行脱分化与再分化。21 A D 组成每对同源染色体的两个DNA分子,一个来自母亲,一个来自父亲(2分) DNA分子半保留复制 DNA解
27、旋 99000 稳定 要有一段已知目的基因的核苷酸序列(2分) DNA聚合酶 能耐高温解析:主要考查了基因工程中四个步骤中的PCR技术和DNA分子杂交技术。PCR技术史穆丽斯等人在1988年发明的,它是利用DNA双链半保留复制的原理,将基因的核苷酸序列不断地加以复制,使其数量呈指数方式增加。其前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成引物。扩增的过程是目的基因DNA受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,然后在耐高温的DNA聚合酶的作用下进行延伸,如此重复循环结合,使目的基因呈指数形式扩增。利用DNA杂交技术可以来鉴定DNA或mRNA,其探针是与目的基因互补的特定单链DNA。若进行亲子鉴定,由于其组成每对同源染色体的两个DNA分子:一个来自母亲,一个来自父亲;所以条码一半与其母亲的条码吻合,另一半与其父亲的条码吻合。22目的基因 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且在特定的位点上切割DNA分子(2分) 重组DNA PCR(聚合酶链式反应) 限制酶、DNA连接酶 一个完整的基因表达载体至少包括目的基因、启动子、终止子、标记基因等(2分)农杆菌转化法 显微注射技术 受精卵 从转基因羊的乳汁中提取蛋白质,用相应的抗体进行抗原抗体杂交(2分) 如果出现杂交带,表明奶牛中出现了抗原蛋白;如果不出现杂交带,表明奶牛中
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