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文档简介
1、会计学1理化生上课用理化生上课用DNA重组技术基本工具重组技术基本工具第1页/共42页第2页/共42页第3页/共42页 位于费城托马斯杰斐逊大学的希拉里和她的同事成功地将人体狂犬病抗体的DNA译码移入烟草作物中。 转基因烟草作物可以产生一种人体蛋白质,而这种物质能抗击致命性的狂犬病病毒。 第4页/共42页第5页/共42页第6页/共42页第7页/共42页到哪里去寻找这种酶限制性核酸内切酶(限制酶)DNA连接酶运载体第8页/共42页主要存在于原核细菌中,帮助细菌限制外来DNA的入侵第9页/共42页第10页/共42页思考:是否所有的限制酶切割DNA后都会产生粘性末端呢?第11页/共42页第12页/共
2、42页第13页/共42页 作用特点是什么?第14页/共42页 作用特点是什么?切断的是什么键?专一特定特定第15页/共42页 作用特点是什么?切断的是什么键?使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开.与我们学过的DNA酶相同吗?第16页/共42页第17页/共42页DNA的二级结构磷酸二酯键氢键第18页/共42页GAA TTCCCCGGGCTT AAGCCCGGG第19页/共42页 作用的结果是什么?举例:EcoR1限制酶、Sma1限制酶 GAATTCCTTAAGCCCGGGGGGCCC一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切割点上将DNA分子切断。目前已发现的限制酶有2
3、00多种。第20页/共42页第21页/共42页G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G同种限制酶切割第22页/共42页第23页/共42页作用部位:(扶手)(梯子)第24页/共42页与DNA聚合酶作用相同吗?连接的部位:第25页/共42页ATGCATGC连接酶连接磷酸二酯键DNA连接酶的作用过程:第26页/共42页DNA连接酶和DNA聚合酶都是形成多聚酶链式反应扩增DNA片段第27页/共42页二者在来源和功能上的
4、区别连接的部位:结果:举例: Ecoli DNA连接酶 T4 DNA连接酶 将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的DNA分子。第28页/共42页重组DNA分子(外源基因)?如何将外源基因送入受体细胞呢?CTTAAG AATTCG基因进入受体细胞的载体?要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去!第29页/共42页 作用种类:质粒、噬菌体和动植物病毒。作为基因工程的载体需要怎样的条件呢?第30页/共42页第31页/共42页第32页/共42页质粒一种裸露的,结构简单独立于细菌拟核之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子.大肠杆菌DNA质粒(环状DNA分子)第33页/共42页能复制并带着插入的目的基因一起复制有切割位点有标记基因的存在,将来可用含青霉素的培养基鉴别。质粒注意: 真正用作运载体的质粒都是人工改造过的。第34页/共42页第35页/共42页下列不适合用于基因工程的运载体是( ) A、质粒 B、噬菌体 C、细菌 D、病毒 C第36页/共42页第37页/共42页D第38页/共42页下列哪一种酶
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