化验室操作规程

1、受 控 受控状态：化验室操作规程文件编号： DHXSC29编制人员： 杜 春 华 审 核： 刘 军 宏 批 准： 黄 得 喜 2015年11月21日发布 2015年12月21日实施请预览后下载！北京德惠祥食品有限责任公司水分测定标准操作规程1目的：规范水分测定操作，确保测定结果准确性。2范围：适用于本公司产品水分测定。3程序3.1称量瓶干燥1）取干净称量瓶一个，放置于恒温干燥箱中，将瓶盖打开或放置于瓶边；2）将恒温干燥箱温度设定为105，开启加热对称量瓶进行干燥，待温度升至105时，开始计时1小时；3）将干燥后的称量瓶盖上盖子，取出放置于干燥器中，冷却0.5小时，称量；4）将称量瓶再次加热干燥

2、，直至前后两次瓶重差不超过2mg，即为恒重。3.2样品干燥1）取代表性样品20g，将样品约5g放入研钵中，磨碎；2）取恒重的称量瓶，加入2g左右磨碎后的样品，称量，放入干燥箱中，加热至105，干燥2小时；3）将干燥后的称量瓶和样品盖上盖子，取出放置于干燥器中，冷却0.5小时，称量；4）将样品再次加热干燥，直至前后两次瓶重差不超过2mg，即为恒重。3.3结果计算样品中水分含量按一下公式计算 X=（m1-m2）/（m1-m3）*100X：样品中水分含量，%；m1：干燥前样品和称量瓶重量，g；m1：干燥后阳平和称量瓶重量，g；m3：称量瓶重量，g。4注意事项4.1操作过程中不能用手直接接触称量瓶，应

3、佩戴线手套；4.2每个样品测定需要两个平行样品，且两次测定结果绝对差值不得超过其平均值的5%；4.3样品或瓶重量测定以最后一次干燥的样品或瓶重为准，如果后一次重量比前一次增加，则以前一次测定结果为准。请预览后下载！菌落总数测定标准操作规程1目的：规范菌落总数测定操作，确保测定结果的准确性。2范围：适用于公司产品菌落总数的测定。3程序3.1药品及器具制备1）按药品说明书配制营养计数琼脂培养基（140ml/样品），放置于三角瓶中，盖塞，放入高压蒸汽灭菌中，121灭菌15分钟；2）每个样品配制225ml生理盐水（0.85%），放入盐水罐中，另配制9ml生理盐水2管，盖塞，放入高压蒸汽灭菌器中，121

4、灭菌15分钟；3）每个样品按10ml吸管1根，1ml吸管2根，培养皿7个，用纸分别包好，放入干燥箱中，160灭菌2小时；4）将灭菌后的样品和器具取出，冷却至室温；5）将缓冲间及无菌室内紫外灯在实验前打开0.5小时，对空气进行灭菌。3.2接种和培养1）取代表性样品50g，取25g样品放入225ml灭菌后的生理盐水中，混匀，制成1:10稀释液；2）取1:10稀释液1ml放入9ml灭菌后的生理盐水中，混匀，制成1:100稀释液，换另外一根吸管取1：100稀释液1ml放入另外9ml生理盐水中，混匀，制成1:1000稀释液；3）从1:10、1:100、1:1000稀释液中各取1ml放入灭菌后的培养皿中，

5、每个稀释度做两个培养皿，同时做空白对照。4）将冷却至46的营养计数琼脂培养基倒入接种后的培养皿中，每个培养皿15-20ml，待琼脂冷却凝固后，将培养皿反转，放入温度为36的恒温培养箱中，培养48小时。3.3计数1）用肉眼观察，记录培养皿上菌落数量，选择培养皿上菌落在30-300之间记录，超过300时记录为多不可计，每个稀释度菌落采用两个平板的平均数；2）如果其中一个平板有较大菌落生产时，则不采用，应以无片状菌落生产的平板作为菌落数计算，如过片状菌落不到平板的一半，而其余一半菌落分布均匀，可计算半个平板后乘以2计算；3）如果平板上菌落无明显界限的链状生长时，按照每条单链作为一个菌落计算。请预览后

6、下载！3.4报告1）如果只有一个稀释度菌落在计数范围内，按照两个平板菌落数的平均值乘以稀释倍数报告；2）如果有两个连续稀释度的平板菌落在计数范围内，按照下面公式计算： N=c/（n1+0.1n2）dN：样品菌落数，cfu/g；C：各平板菌落数之和，cfun1：第一稀释度平板个数，个；n2：第二稀释度平板个数，个；d：稀释因子（第一稀释度）。3)如果所有稀释度菌落数都大于300，报告为最高稀释度菌落数两个平板数平均值乘以稀释倍数；4）如果所有稀释度菌落数都小于30，报告为最低稀释度菌落数两个平板平均值乘以稀释倍数；5）如果所有稀释度菌落数都不在30-300之间，其中一部分大于300，另外一部分小

7、于30，报告为最接近30或300的菌落数乘以相应稀释倍数；6）如果所有平板都没有菌落生长，报告为小于1乘以最低稀释倍数7）菌落总数小于100时，按照四舍五入原则，取整数报告，如菌落总数大于100时，按四舍五入原则取两位有效数字报告。4注意事项 1）菌落总数测定接种过程必须在无菌室内操作，人员须穿戴紫外灭菌后的工作服，操作前应将手清洗消毒；2）操作过程中应将样品、药品尽量接近酒精灯，放置样品收到污染；3）实验过程中所用剪刀、镊子必须进行酒精灯火焰灭菌。请预览后下载！大肠菌群测定标准操作规程1目的：规范大肠菌群测定操作，确保测定结果的准确性。2范围：适用于公司产品大肠菌群的测定。3程序3.1药品及

8、器具制备1）每个样品按药品说明书配制双料乳糖胆盐培养基3管（10ml/管），单料乳糖胆盐培养基6管（10ml/管），放入小导管，盖塞，放入高压蒸汽灭菌中，121灭菌15分钟；2）每个样品配制225ml生理盐水（0.85%），放入盐水罐中，另配制9ml生理盐水1管，盖塞，放入高压蒸汽灭菌器中，121灭菌15分钟；3）每个样品按10ml吸管1根，1ml吸管2根，用纸分别包好，放入干燥箱中，160灭菌2小时；4）将灭菌后的样品和器具取出，冷却至室温；5）将缓冲间及无菌室内紫外灯在实验前打开0.5小时，对空气进行灭菌。3.2接种和培养1）取代表性样品50g，取25g样品放入225ml灭菌后的生理盐水中

9、，混匀，制成1:10稀释液；2）取1:10稀释液1ml放入9ml灭菌后的生理盐水中，混匀，制成1:100稀释液；3）分别取1:10稀释液10ml放入双料乳糖胆盐培养基中，分别取1:10稀释液1ml放入单料乳糖胆盐培养基中，分别取1：100稀释液1ml放入另外的单料乳糖胆盐培养基中；4）将接种后的培养基放入36的恒温培养箱中培养24小时，观察小导管内是否产气，如果产气进行分离培养试验，如不产气即为大肠菌群阴性；5）将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝平板上，置36的恒温培养箱中培养18-24小时，取出观察菌落形态，并作革兰氏染色和证实实验；6）在上述平板上挑取可疑大肠菌群菌落1-2个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，放入36的恒温培养箱中培养24小时，观察产气情况，若乳糖发酵管产气且革兰氏染色为阴性，则为大肠杆菌阳性，反正则为阴性。3.3报告1）根据复发酵试验中产气管数量，对照MPN表，得数即为每100g样品中大肠菌群MPN值；2如果乳糖胆盐培养基培养时没有产气，则不需要复发酵试验，直接报告为大肠菌群阴性。4