浙科版生物技术实践单元测试

1、生物技术实践（时间40分钟，满分100分）一、选择题（每小题4分,1 .三个培养皿中分别加入共40分）10 mL不冋的培养基，然后接种相冋的大肠杆菌样液。培养36小时后，统计菌落数，结果如下表所示。下列选项错误的是（）培养皿培养基成分菌落数I琼脂、葡萄糖35n琼脂、葡萄糖、生长因子250出琼脂、生长因子0A. 该实验采用的是固体培养基B. 该实验可以采用稀释涂布平板法接种C. I和川对照，说明大肠杆菌的生长不需要生长因子D. H和川对照，说明大肠杆菌的生长需要糖类2 下列有关消毒、灭菌的说法错误的是（）A用酒精擦拭双手的方法对操作者进行消毒B. 对不同的生物材料，应当采用不同的灭菌方法C. 接

2、种前用火焰灼烧接种环D. 消毒即杀死培养基内的一切微生物3划线分离法和涂布分离法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是（）A. 都要将菌液进行一系列的梯度稀释B. 划线分离法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作C. 涂布分离法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养D. 涂布分离法可用于微生物的纯化和计数，而划线分离法只能用于微生物的分离不能计数4通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%勺酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法能从混杂

3、的微生物群体中分别分离出（）大肠杆菌霉菌放线菌固氮细菌A. B.C.D.只有5.下列有关果胶、果胶酶的说法不.正确的是（）A. 果胶酶包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等B. 果胶酶是一类催化剂，其本质是RNAC. 植物、霉菌、酵母菌和细菌均能产生果胶酶D. 果胶不仅会影响出汁率，还会使果汁浑浊6某校学生尝试用琼脂作载体，用包埋法固定a-淀粉酶来探究固定化酶的催化效果。实验结果见下表（假设加入试管中的固定化淀粉酶量与普通a-淀粉酶量相同）。实验表明1号试管中淀粉未被水解，你认为最可能的原因是（）1号试管2号试管固定化淀粉酶V普通a -淀粉酶V淀粉溶液VV60 C保温5分钟，取出冷却至室

4、温，滴加碘液现象变蓝不变蓝A. 实验中的温度过高，导致固定化淀粉酶失去活性B. 淀粉是大分子物质，难以通过琼脂与淀粉酶接触C. 水浴保温时间过短，固定化淀粉酶未将淀粉水解D. 实验程序出现错误，试管中应先加入碘液后保温7.下列关于果酒和果醋制作的叙述，不 .正确的是（）A. 生产果酒和果醋所用微生物的异化类型不同B. 参与发酵的微生物都含有细胞核C. 制果酒时瓶口需密封，而制果醋时需要通入氧气D. 发酵过程中培养液 pH都会下降&关于用塑料瓶制作果酒和果醋的叙述，正确的是（）A. 为了提高果酒的产出量，果汁应尽量装满发酵瓶B. 醋酸发酵阶段应封闭充气口，防止杂菌污染C. 制果酒和果醋的过程中每

5、天需适时拧松或打开瓶盖D. 果酒制成后，可将装置转移至温度较高的环境中制果醋9. 下列说法正确的是（）A. 泡菜制作的过程中所利用的微生物主要是乳酸菌B. 泡菜发酵过程中，会产生多种酸，其中主要是亚硝酸，还有少量的乳酸C. 对亚硝酸盐的含量测定可以用天平称量法D. 亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺偶联成橘黄色化合物10. 在菊花的组织培养操作完成了34 d后，观察同一温度中的外植体，发现有的瓶内外植体正常生长，有的瓶内外植体死亡，你认为外植体死亡的原因不可能是（）A. 培养条件，比如 pH、温度等不适宜B. 接种时外植体未消毒C. 接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体D.

6、将外植体倒插入培养基中二、非选择题 (共 60 分)11. (10分)(2014 浙江六校联考)从自然界获得纯种的酿酒酵母，基本程序是：配制培养基接种培养观察记录纯化培养。请回答下列有关的问题：(1) 酵母菌的培养最好使用下列哪种培养基？ ()A. 牛肉膏蛋白胨培养基B.麦芽汁琼脂培养基C.无土栽培培 养基D. MS培养基(2) 采用划线分离法接种时，开始接种时要灼烧接种环，目的是 。要把接种后的培养基和一个未接种的培养基同时放入恒温箱培养， 设置“未接种的培养基”的目的是(3) 将得到的纯种酿酒酵母接种到葡萄汁中发酵，如何获得酒精含量更高的果酒？(4) 把从酵母细胞中提取的淀粉酶固定在尼龙布

7、上制成固定化酶，与传统酶应用技术相比，此技术最显著的优点是 。(5) 某实验小组欲按上述方法从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，应将菌液涂布接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，30 C条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈状态放置； 筛选时应将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围， 如果菌落周围的现象是出现透明圈， 则说明此种菌能够 。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采用 法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。12. (10分)(2014 金华十校联考)微生物与人类的生活、健康有着密切的联系。请回 答下列有关问题：(1) 在果醋、泡菜和果酒的制作过程中，均利用相应微生物的代谢特点进

8、行条件控制，其中需要提供氧气的是 的制作。泡菜腌制原理是 和等主要微生物利用菜中的 和其他营养物质进行发酵，产生有机酸和醇类物质。(2) 根据微 生物的 特点， 可以 利用相应的 培养基 进行分 离或培养， 例如 用的培养基分离能产生脲酶的微生物，用 的培养基培养苹果青霉， 可提高果胶酶的产量。(3) 在微生物培养或分离过程中，下列操作不恰当的是 A. 在超净台中进行接种时应该关闭紫外灯B. 扩大培养时必须保证氧气的供应C. 控制液体培养基中营养物质的浓度D. 空白的培养基平板需进行无菌实验(4) 利用固体培养基可以进行微生物培养和植物组织培养，两者的培养基明显不同的是A. 需要添加琼脂B.需

9、要添加有机物C.需要添加激素D.需要灭菌处理13. (10分)(2014 浙北五校联考)下面是有关微生物的培养和分离实验，请回答：(1) 培养大肠杆菌时必须进行无菌操作。实验前所需的各种器材如三角烧瓶、培养皿等需要经过法灭菌。(2) 配置培养大肠杆菌的培养基时，根据“细菌喜荤，霉菌喜素”的规律，通常在培养基中加入作为营养物质，还需要考虑温度、渗透压和 等条件。(3) 大肠杆菌培养和分离的实验中，在LB液体培养基中进行，培养液经 后，在 LB固体培养基上进行 并将培养皿 放在恒温培养箱中培养，可以获得右图效果。通常对获得的纯菌种可以依据 的形状、大小等特征进行初步的鉴(4) 微生物与人类的生活关

10、系越来越密切，在制作果酒、果醋、泡菜的过程中，分别用到的主要微生物分别是 。A. 酵母菌、乳酸菌、乳酸菌B. 酵母菌、醋杆菌、乳酸菌C. 乳酸菌、醋杆菌、酵母菌D. 酵母菌、乳酸菌、醋杆菌14. (10分)农村中泡菜的制作方法：将新鲜的蔬菜经过整理、清洁后，放入彻底清洗 并用白酒擦拭过的菜坛中(泡菜坛一般是两头小中间大的陶器，坛口有坛沿，凡裂缝的菜坛 不能使用)，然后向坛中加入盐水，香料及一些“陈泡菜水”，密封后置于阴凉处，最适环 境温度为2832 C。有时制作的泡菜会“咸而不酸”或“酸而不咸”，前者是用盐过多， 后者是用盐过少。在实验室或工厂生产泡菜，还要跟踪检测泡菜腌制过程中产生的亚硝酸盐

11、 含量。(1) 用白酒擦拭泡菜坛的目的是 。(2) 菜坛为什么要密封？若菜坛有裂缝，可能会出现什么结果？(3) 若制作的泡菜“咸而不酸”最可能的原因是什么？加入一些“陈泡菜水”的作用是 (5) 制作泡菜的过程中，有机物的干重如何变化？菜坛内有机物的种类如何变化？915. (10分)(2014 富阳中学第二次周考)某学习小组利用课余时间制作葡萄酒。为了获得纯净酵母菌，需要对购买的菌源进行分离和纯化。步骤如下：养基制备细菌悬液涂布分离法分离细菌培养细菌请回答下列问题：(1) 验证培养基制作是否合格的方法是 (2) 关于用涂布法给平面培养基接种。下列叙述错误的是()A. 接种的目的是使细菌相互分离B

12、. 接种需过滤出去杂菌后进行C. 接种工具需灼烧后使用D. 接种需在酒精灯火焰旁进行(3) 培养后，如果观察到菌落重叠，则在涂布接种之前需进行 。4小组成员为提高葡萄酒的品质，在果汁中加入了人工培养的纯净酵母菌。在制酒的过程中，先让酵母菌在有氧条件下 ，然后在无氧条件下进行 。(5) 在实际生产中，厂家开始尝试选用海藻酸钠作 包埋各种酶制剂，这种技术叫做。16. (10分)(2014 富阳中学第三次周考)利用果酒制作果醋的装置如右图。请回答：(1) 果酒可用果浆或果汁为原料制作，制作果酒所用微生物是 。将葡萄浆放入发酵瓶中，装量不要超过 。A. 2/3B. 3/5C. 3/4D. 4/5(2)

13、 乙瓶为发酵瓶，加料顺序为：首先把 装入乙瓶中。然后，将适量 的培养物或醋曲悬液加在适量酒一水混合物中混匀，并调pH至后倒入乙瓶。(3) 乙瓶底部的导管 2用于，导管3在瓶中的一端应 。(4) 下列关于果醋制作的叙述中，错误的是 A. 控制导管1内液体的流速以利于充分发酵B. 检测流出液的pH以监控发酵C. 甲瓶和丙瓶的瓶口均需密封D.杂菌污染会影响果醋的品质答案1选 C 微生物的培养基成分中加入了琼脂，说明该实验采用的是固体培养基；该实 验可以采用稀释涂布平板法接种；I和川对照，有葡萄糖、生长因子两个变量，不能说明大 肠杆菌的生长不需要生长因子；n和川对照，能够说明大肠杆菌的生长需要糖类。2

14、选 D 灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子， 而消毒是指使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物，不包括芽孢和孢子； 对操作者应用较温和的方法进行消毒； 对不同的生物材料， 应当采用不同的灭菌方 法。3选 D 划线分离法不需要进行梯度稀释；涂布分离法是将不同稀释度的菌液滴加到 固体培养基的表面， 然后用涂布器将菌液均匀涂布在培养基表面； 涂布分离法可用于微生物 的纯化和计数，划线分离法只能用于微生物的分离不能计数。4选 A 缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长，而固氮细菌能生长；在培养基 中加青霉素可以抑制细菌和放线菌等原核生物细胞壁的合成，

15、而霉菌属于真核生物， 故能生长；在培养基中加入 10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长，对放线菌的生长无影响。5选 B 果胶酶不是特指一种酶，而是分解果胶的一类酶的总称，包括多聚半乳糖醛 酸酶、 果胶分解酶和果胶酯酶等； 果胶酶的化学本质是蛋白质； 果胶是由半乳糖醛酸聚合而 成的一种高分子化合物，不溶于水，在果汁加工中，不仅影响出汁率，还会使果汁混浊。6选 B 由于固定化酶是用包埋法固定的，而淀粉是大分子物质，它不能通过琼脂与 酶接触，导致淀粉不能被水解而遇碘液呈现蓝色。7选 B 制作果酒和果醋所用的微生物分别是酵母菌和醋酸菌，其中酵母菌是兼性厌 氧型生物， 而醋酸菌是好氧型生物； 酵母菌是真核生

16、物， 含有细胞核， 而醋酸菌是原核生物， 没有细胞核； 果酒发酵的后期需密封， 酒精是在无氧条件下产生的； 果酒发酵过程中会产生 二氧化碳，果醋发酵过程中会产生醋酸，培养液的pH 均会下降。8选 D 果汁不能装满发酵瓶，因为发酵过程中会产生气体，装满后可能导致瓶子破 裂；醋杆菌为好氧菌，所以发酵阶段不能封闭充气口；制果酒的过程中需适时拧松瓶盖，释 放产生的气体；醋杆菌与酵母菌相比，其适宜温度高。9选 A 泡菜发酵时，在乳酸菌等的作用下主要产生乳酸；测定亚硝酸盐含量的原理 是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1- 萘基乙二胺盐酸盐结合形成紫红色产物，将显色反应后的样

17、品测定0D值，通过标准曲线得到含量，计算 出泡菜中亚硝酸盐的含量，此方法叫做光电比色法。10选 A 同一批组织培养的培养基和培养条件，如温度、pH 等应该相同，且存在瓶内正常生长的外植体，所以不可能是A 项所述原因；接种时外植体未消毒可能引起杂菌污染，造成实验失败； 接种工具灼烧后未待冷却可能将外植体杀灭； 植物有形态学上端和下端之分， 倒插后茎段无法从培养基中吸收生长素，营养也供应不上，不利于成活。11.解析：(1) “细菌喜荤，霉菌喜素”，A培养基适用于细菌培养，B培养基适用于真菌培养，C培养基适用于植物体培养，D培养基适用于植物组织培养。(2)开始接种时要对接种环灼烧灭菌， 接种后的培养

18、基和一个未接种的培养基同时放入恒温箱培养，以检验培养基在接种中是否被污染。 (3) 葡萄汁中添加蔗糖发酵能促进酵母菌快速生长，加快发酵产生酒 精更多。 (4) 使用固定化酶的优点是酶制剂更加稳定、可以重复使用、产品易纯化等。(5)以淀粉为唯一碳源的固体培养基通常只生长能利用淀粉的微生物。培养皿在培养过程中会有冷凝水从盖上滴落到培养基上， 培养皿倒置培养可以防止菌体随水滴扩散， 使分离菌种失败。 培养基中含淀粉遇碘液会显蓝色， 若菌体能分解利用淀粉， 其菌落周围会出现透明圈。 通过 划线接种方法可以进一步分离纯化菌种。答案： (1)B(2) 灭菌 检验培养基是否被污染(3) 往葡萄汁中加入适量的

19、蔗糖(4) 可以重复使用 ( 产品易纯化 )(5) 淀粉 倒置 分泌淀粉酶使淀粉发生水解 ( 平板)划线12 .解析：在果醋、泡菜和果酒的发酵制作中，果醋发酵属需氧发酵，需要向发酵装置 中通入空气。 泡菜腌制原理是假丝酵母和乳酸菌等主要微生物利用菜中的糖和其他营养物质 进行发酵， 产生有机酸和醇类物质。 分离能产生脲酶的微生物应用以尿素为唯一氮源的培养 基。培养苹果青霉获得大量果胶酶时应用含果胶丰富的培养基。 扩大培养一般用液体培养基， 是否要通入空气要根据微生物的需求而定， 不能一概而论。 植物组织培养的培养基中必须加 入植物激素作为生长调节物质才能完成， 有机物的需求较少但不能缺少， 而一般微生物培养 时不需要激素添加，有机物较多。答案： (1) 果醋 假丝酵母 乳酸菌 糖(2) 仅以尿素为氮源 富含果胶(3) B (4)C13.解析：无菌操作包括多种灭菌方法， 对实验用的器皿如培养皿等采用高压蒸汽灭菌。 异养细菌需要的有机营养物应取自动物性营养， 如蛋白胨、 酵母提取物等。 培养基配制除考 虑营养物质、温度、渗透压等之外还要特别注意pH值适宜。通常液体培养基用于菌种扩大培养或生产， 固体培养基用于研究鉴定和菌种分离， 菌种分离常用划线分离和涂布分离， 其 中涂布分离前常常需要稀释样品。 接种后的培养皿应倒