F-4500用细胞阳离子测量程序使用说明书

1、F-4500用细胞阳离子测量程序 使用说明书用日立荧光光度计的FL Solution软件测量细胞內阳离子程序的使用说明书请认真阅读并妥善保管本使用说明书。在操作使用仪器之前， 请认真阅读本使用说明书， 充分理解与安全有关的注意 事项。为了让本使用说明书在需要时进行参照，请保管在方便取用的就近场所。HITACHI用日立荧光光度计FL软件测量细胞内阳离子程序的使用说明书目录前言 1 关于这本说明书 1 重要事项 3 预防电磁波的干扰 31电磁波可能会干扰这台仪器 32.电磁场可能会影响这台仪器产品的保修安装、移机和售后服务技术研讨和用户培训7其它的预防7化学品和样品的处理7关于这本说明书注意7商标

2、、证书8A安全概要安1安全防范安A总的重要方针安1荧光光度计的注意事项安3电安3热源/火源安3数据备份安3抗计算机病毒的保护安4电源中断安4开关个人计算机安51.安装1.1检査装箱单内容1-11.2细胞内阳离子测量程序的安装1-11.3进入仪器序列号1-51.4工具条的解释1-62.操作2-12.1操作流程2-12.2设定条件2-22.2.1普通标签2-32.2.2仪器标签2-42.2.3监控标签2-62.2.4处理标签2-82.2.5计算参数标签2-92.2.6报告标签2-122.3定义样品、注释和文件名2-142.4测量2-162.5测量期间为图表配一个标记2-17数据处理3-13.1下载

3、数据3-13.2显示数据3-33.3刻度的变化3-53.4数据菜单3-73.4.1设定时间偏移量3-83.4.2减去背景3-93.4.3减去曲线图3-103.4.4删除点3-113.4.5平滑处理3-123.4.6计数参数3-133.4.7标记3-143.4.8 覆盖3-153.4.9数据处理后的存储3-173.5建立标准曲线3-183.5.1新标曲线的建立3-183.5.2增加点3-203 5.3 FL阳离子校准文件的存储和打印3-214.报告输出4.1打印4-14.2数据传到Excel上4-24.3把谱图粘贴到Word上4-44.4把数据转换成ASCII码上4-7附录A附1A.1设定扫描时

4、间和周期时间附A.1.1实际周期时间的检查附2A.1.2扫描时间的检査附3A.2光电倍增管PMT电压和狭缝地设定附4非常感谢您购买与FL Solution程序相兼容的细胞内阳离子测量程 序。这台仪器适合于有化学分析基础知识的人使用。请记住，不正确的使 用分析仪器、化学品或样品，不仅会导致错误的分析数据，而且也不 安全。在试图操作仪器之前，请仔细阅读这本说明书，以便熟悉仪器，正确 操作。关于这本说明书这本说明书包含有警示指令，包含在荧光分光光度计F-2500/F-4500 的操作说明书中。，在试图操作仪器之前，必须阅读它们。在使用报告发生器之前，确保仔细阅读这本说明书，以便保证正确的操作。重要事

5、项预防电磁波的干扰1.电磁波可能干扰这台仪器当该仪器用在住宅区或邻近区域，它可能受到无线电波和电视信号的干扰，为了防止这一点，利用特殊的系统 连接线，它必须与说明书严格一致，这样仪器才能受到最小的电磁波的干扰。然而，不能担保电磁波不干扰这台仪器。如果该仪器受到了无线电波或电视信号的干 扰，那就关掉仪器，再打开。如果用户试图纠正电磁波的干扰，请按下列去做:增加仪器和无线电或电视接收信号之间的距离。仪器不要和无线电收音机或电视机连在一起。2.电磁场可能影响这台仪器如果这台仪器用在有强磁源的地方，干扰的噪声就可能产 生，它会导致仪器性能或功能的不良效果。为了防止这一点, 要使用规定的系统连接电缆，它

6、必须严格与说明书一致。然 而，也不能担保电磁波干扰不干扰这台仪器。如果仪器出现 了电磁波的干扰，可关闭附近的电磁波干扰源。如果用户企 图纠正这种干扰，请按下列措施去执行：给仪器重定方向。增加仪器和电磁干扰源之间的距离。仪器的电源插座和电磁干扰源的电源插座要分离开来。仪器的连接要不同于电磁干扰源的连接。检查与仪器连接的其它设备不被电磁干扰. 产品的保修F-2500/F-4500荧光光度计在本手册所规定的性能内和下列 给定的条件下，正常使用而产生的材料和性能的失效将给予 免费修理。如果不在本手册要求下使用，就不予保修。（ （1） ）保修的范围a.由于设计或制造所造成的任何一个部件的缺陷，将免 费给

7、以修理、调整或更换。b.代用品部件能够用于维修，或者用f 等价的产品取代c.某一系统成分，如个人电脑和打印机为了改进而频繁 地更换，而不适应原先的版本。（2） ）保修的期限从安装之日起，保修1年。（不包括易损件，如氤灯）（3）技术支持服务的有效性技术支持服务可适用于日立公司预先确定的工作日内。（4） ）保修期的限定和排序注意，下列情况是排除在保修范围之内的。a.由于没有特意请求日立人员安装而操作仪器所造成的失 效b.由于电源电压/频率没有按日立公司所要求的，或者 由于电源不正常所造成的失效。c.由于所使用的试剂、气体、空气或冷却水含有杂质而使管道腐蚀和恶化所造成的失效。 由于腐蚀的大气气体，造

8、成电路的腐蚀，或光学元件 变坏，所造成的失效。e.由于使用非日立公司指定的硬件、软件或备件，所造 成的失效。f.由于用户不适当的处理和维修所造成的失效。g.由于没有经过日立公司认可和审定的维修代理的维 护和修理所造成的失效。h.没有葩日立公司的失 效。i.由于在初始安装后，移位或运输中所造成的失效。j.由犬贿经过日立闻雌修0闕仞造刪失 效。k.由于是消耗品和已达到使用寿命的备品备件失效所引起 的故障。l.本手册或其它文件中规定不保修的部件。m.由于天灾人祸，包括火灾、地震、暴风雨、洪水、闪电、社会动乱、暴乱、犯罪、起义、战争、放射性污 染、有害物质的玷污等所引起的失效。n.由于计算机病毒的影响

9、而造成硬件失效，系统软件、 应用软件、数据库和硬盘的损坏。o.由于电源电压的中断或电压突然变化而引起与仪器 连接的电脑失效或系统软件、应用软件、数据库或硬 盘的损坏。（如闪电或雷击等引起的）p.由于在断开至电脑电源时，没有采取规定的、正常的 关闭程序,而导致与主机连接的电脑失效或者造成系 统软件、应用软件、数据库和硬盘的损坏。(5)不承诺保修a.日立公司对于特殊目的的使用和违反专利权的使用 皆不予保修。b.没有日立公司口头的或书面的信息或通知，它的销售 人员、发行人、代理或雇员创建保修单或者以任何方 式增加保修范围都是无效的。安装、迁移和售后服务这种仪器的安装应当由日立公司的有资格的技术人员，

10、或由 日立公司审定的维修代理人进行。在安装之前，用户应当做好根据这本手册所示的安装要求的准 备。当需要搬迁时，(在安装完之后)，请通知当地的日立销售代 表或附近的日立维修部。技术研讨和技术培训为了使用户更深层次地理解这种分析仪器，日立公司为你提 供技术研讨和用户培训。有关这方面更详细的信息，请找当地的日立销售代表，技术研讨和用户培训是要收费用的。其它的预防措施(1)用户在处理、保存或丢弃所用的化学品或样品时，要遵守有关的法律或规则。(2)试剂、标准液和质控样品在处理、储藏和丢弃时，要按照各自的供应商的要求去执行。关于这本手册的注意事项：(1)本手册的信息，由于产品的改进，会有些变化，这将不另行

11、通知。(2)本手册的版权归日立公司所有。(3)本手册的内容，不经日立公司的书面许可，不得以任何形式或任何方式去复制或转送。商标承认书微软公司、Windows Excel、Word 和 Windows 98 都有 美国微软公司的注册商标。在本手册中所用的其它商标名称和产品名称都是经过商标 注册的，或者是它们相应的贸易名称。A 安全概要安全防护在使用F-2500/F-4500荧光分光光度计之前，必须仔细地阅读下 面的安全指令。A总的安全方针遵守本说明书提供的所有操作程序。本仪器的安装和维修应由有资格的维修人员执行。必须遵守产品上和说明书中的警示标签，在说明书中有警报标题，它由报警符号和信息单词组成

12、，信息单词有：危险、警告、注意A 危险：它指示有紧急的危险状态，如果不避免，将导致人员死 亡或严重伤害。（这个警示没有出现在产品标签上。）A警告：它指示有潜在的危险状态，如果不避免，将导致人员死亡 或严重伤害。A注意：它指示有危险状态，如果不避免将会导致较小的或中等的 伤害或给仪器造成损害A 这是报警符号，它出现在危险报警文字的前面，和本说 明书安全叙述的左前面。安一 1A 安全概要A总的安全方针（连续）“NOTE”和“NOTICE”是标题词，它不直接涉及到人员的安全。告诫：该指令是为了预防产品的损害注意:该指令是为了保证正确的使用仪器和正确的分析在更换部件时，使用非指定的部件时,不要修改这个

13、指令, 也不要除去安全符号，否则是很危险的。在交货安装、维修和搬迁时，应提交日立公司有资格的维 修人员当有疑问时，不要执行任何操作，应当与当地的日立公司 销售代表或附近的日立公司维修部联系。当分析操作使用化学品时，确保房间的合适的通风，通风 不良会危及到你们的健康。要保持清醒的头脑，在本手册中和仪器上的危险标记并不 覆盖一切可能，因为不可能预知和评价所有的情况，所以 必须警惕和使用你的感觉器官。安2A 安全概要荧光光度计的安全注意事项电确保光度计施加的电流为100V交流，功率为1KVA或更高些， 频率为500.5赫兹或600.5赫兹。如果电源电压波动，或者噪 声施加到电源线上，光度计会受到负面

14、影响，这将会导致错误产 生。确保电源线上有地线连接，接地电阻应是100欧或更小。检查地线连接是否正确，如果地线连接不正确，光度计可能受 到外部噪声的攻击，或者可能产生偏离电压，这将会导致电击 的危险。光度计的内部使用了高压电路，为了防止电击，在操作时，不 要打开盖子，除非必要时才打开。热源/火源不要把光度计放在有烟雾或有火焰的地方。数据备份存在硬盘中的数据，会因为系统失效，错误操作，计算机病毒的感染而丢失，为了确保硬盘在意外的损坏的情况下数据的完整性，把硬盘文件拷贝到软盘上去，制作必要的备份。为了防止硬盘上有错误的操作，总是保存约100兆的自由空间作为应用软件的工作区。安3A 安全概要计算机病

15、毒的防护如果某个程序或数据突然受到损害或操作/屏幕遭到意 外，计算机可能是遭到病毒的干扰。计算机病毒是恶意的程序，它在计算机中暗中作祟，使 计算机异常或数据损坏，有一个防病毒的程序被称为疫 苗程序。引起病毒干扰的原因是：通过通讯下载了带有病毒的程序。使用带有病毒的软盘或其他存储介质。注意，一旦计算机受到病毒的干扰，利用杀毒软件 来杀灭病毒，注意，某些杀毒软件是不可能根除实 际的病毒，因此，确保预先为硬盘文件制造备份。电源中断由于电源中断或光闪，使得瞬间电压下降，这样，计算机可 能失效，或者系统软件，应用软件或数据可能损害，为了防 止瞬间电压的下降，可使用不间断电源装置。安-4A 安全概要计算机

16、电源的开与关当计算机硬盘驱动器或软盘驱动器工作时，请不要关闭计算机, 如果硬盘关闭，计算机可能失效，所存储的数据和软件可能被损害, 在关闭计算机电源之前，确保离开荧光光度计的控制和数据处理程 序，（FL软件程序）。然后使用系统软件关闭程序。安51.安装1.1检査装箱单内容按照装箱单检査装箱的内容，如有缺少、损坏或有什么提问， 请找销售代理。1.2细胞内阳离子测量程序的安装为了运引这个程序，就必须用所提供的安装盘来安装。购买这个程序后，仅需一次安装，而不是每次都需要启动操作。把软盘上给定的信息A盘拷到目标盘C盘上。注意：在安装细胞内的阳离子测量程序后，要确保FL软件已 经安装上。(1)点击Win

17、dows 98的开始按钮,并选择设置控制面板,一个窗口被显示。如图1-1所示。图1一11-1(2)双击添加/删除程序图标，一个窗口被显示。如图图-2(3)当窗口如图1 3被显示时，把第一个所提供的系统盘插进软盘驱动器中，并点击Next。图1-31-2(4)当图1 4窗口被显示时，点击Finisho图L4( (5)安装开始。当安装完成时，图1 5窗口将被显示。图1一5(6)启动 FL Solution 程序。(7)FL Solution程序开始，图1 6初始化窗口显示。图初始窗L!1-3(8)下一步监控窗口被显示。如图1 7。图1-7监控窗口参考：程序的重新安装首先必须删除已存在的程序，然后按下

18、列步骤安排新的程序。选择开始一设置一控制面板，然后双击添加/删除程序图 标，一个窗口将显示。如图1 8所示。在程序表中，选择“FL Solution,点击添加/删除。当删除完成时，点击OK。现在你能安装FL Solution程序了。1.3进入仪器序列号从工具条上选择仪器命令，或点击按钮，一个窗口将被显示。如图1-9所示。图19点击Instrument,然后点击Serial Number, 一个窗口将被显示。如图1 10所示，进入你的仪器号。图 1-10进入后，点击OK,已进入的序列号被存储。作为一个分析条 件，它在数据文件中，也能被打印。1-5按钮功能按钮回创建新的分析方法/样品表画屈打开数据

19、文件存储该打开的文件存储一个已选择的字符串或图解项到剪贴板上功能打开打印窗口指示光度计连接的状态指示FL的版本数据等请求帮助窗口1.4工具条的解释屏幕上工具条可提供较简易的操作O标准化工具条上的按钮及其功能如表1-1所述。用于细胞内钙的测量程序的按钮，逐条解释如下。表标准工具条粘贴剪贴板上的内容表1 2测量工具条按钮功能按钮功能打开分析窗口停止测量显示窗口，为了进入样品名和注释关闭块门开始测量打开块门在测量下，设定图解标记1-6表1 3谱图工具条按钮功能按钮功能画恢复原先的刻度描绘谱图显示规则线表1 4仪器工具条按钮功能按钮功能执行波长驱动圉纵标上减半指示执行自动预扫为纵标选择自动刻度指示，因

20、此，谱图能够见到调节零点显示规则线国纵标上双重指示表1 5处理工具条按钮功能按钮功能打开特性窗口执行平滑处理数据文件的输出报告为设定浓度，显示浓度窗口tern：E为设定时间轴偏移量显示偏移量窗口圍重新设定先前的数据为设定删除数据点，显示删除窗口遛添加数据点，这显示产生的 标准曲线1.5终止程序在完成测量之后，执行下列程序。从File菜单中，选择Exit命令。FL Sulu Lauras Close Movwioc、二止厂 ，Tt temp io* Ihc F-2S5OFlSc-GphtfGn onL ； CflM1iecuriMyFOM5 own o tyw R. ZMJOTI 5ccn ft

21、a C M3图211确定“ Save in(为了存储目的)，然后进入“文件名”。进入后, 点击Save,另一个窗口被显示，如图2 12所示。如果忘了进入文件名，一个文件名。例如deFautool.fdm”将 自动赋值。当你执行下一个测量而没有改变第一次测量的设定 时，如图2-12所示，文件名将由asampleool.fdmw变成 usampleooz.fdm如此等等。为了把该图谱作为图文文件，在“图文文件自动存储”中放置 一个检査标记，数据将存储在相同的文件名下(*.wvvf)o就像 存入的文件一样。即使自动存储没有设定，测量后仍能存储。图 2-122-152.4测量有两种方法用于启动测量。a

22、） ）从光度计菜单中选择测量命令。b） ）点击坦（测量）按钮，它在测量工具条上。为了延缓测量，点击画停止按钮，它在工具条上。测量数据一 直到停止按钮被点击的那儿得点上，这些测量数据将被存储（当 自动存储被选择时）或被显示。完成测量之后，数据将自动显示，如图2 13所示。当通过监控标签，“数据获得后，打开数据处理窗口”被选择时, 打开这个文件，并执行数据处理。如果Auto Save”被设定， 数据将自动存储，见2 3节。如果Auto Save”没有设定，从 文件菜单中选择存储命令以便存储数据。2-162.5测量期间为图表配一个标记当点击園时，在图表的X坐标上出现一个三角形（）标记,它在被点击的位

23、置上（时间点）。如图2 14所示。仅在测量期间内，这个三角形的标记时不能是不能设定的，但 是测量之后仍能设定，参考第3节。2-173数据处理3.1下载数据让我们调出已存储的数据，点击画（打开）按钮或选择文图2-14件-打开。下列窗口将被显示，如图3 1所示。图3 1当选择数据文件的文件类型时，被选择类型的文件将在下表中。找出所需的文件，点击“打开”，然后，数据文件将打开。下列文件类型是会用的。FL波长扫描文件(*.fds)FL时间扫描文件(也fdt)FL光度值文件(*.fdq)FL阳离子扫描文件(也fdm)三维扫描文件C fd3)FL偏振时间扫描文件FL偏振波长扫描文件(*.fwp)FL阳离子

24、校准文件(*.fdc)FL方法文件FL样品表文件FL报告文件(*.0r)FL已处理的数据文件(*.fdp)F-4500 FL波长扫描文件( (* Fds)F-4500 FL时间扫描文件(*.fdt)F-4500 FL 光度值文件( (*.fdq)F-4500 FL三维扫描文件( (*.fcd)3-1F-4500 FL阳离子扫描文件(*.dat)F-4500 FL校准扫描文件(*.cal)F-4500 FL偏振时间扫描文件(*.fpt)F-4500 FL偏振波长扫描文件(*.fpw)所有文件(*)当你打开一个数据处理文件时，下列指示出现在标题栏中。文件名.fdm,样品名，试剂1或2“试剂1或2”

25、表示数据起源于哪个试剂，如果样品名没有进 入，将被指示。当波长数是2,对于试剂1,指示 1;而对于试剂2,指示为“2”，样品名将变成1或3。当波长 数是“1”，对于试剂1,指示1;而对于试剂2,指示为“2”， 样品名将变成1或2o3-23.2数据的显示表梧显示图形显示当你打开数据处理窗口时，一个显示画面如图3 2所示。图32选择观看菜单，它在数据处理窗口。你能够选择显示和不显示工具条，以及谱图画面下指示方法。3-3观看菜单命令在数据处理窗口中）3-3组合 当荧光值、比率和浓度图形中的任意两个图形被当前显示时, |p&a loctaTWOTaringlodbM -T, liir旳T.； v fW

26、bRsenso _ :换.ICcr) )rc aton”嵌.；Mericais -:Avtcwas 图形区域，能同时显示三个三角形 表格区域，能显示三个项冃中的个二. . .: , X. . .- .i7 :旷苛 宣诣二屈飞和6jL储i -这个功能可执行。图3 4显示的荧光值和浓度图形的组合。在这种组合中，左侧纵坐标表示荧光温度，右侧纵坐标代表浓 度。注意：1 在不同的组合中，左、右纵坐标设定如下。荧光强度和比值图形的组合。左侧：荧光温度右侧：比值比值和浓度图形的组合。左侧：比值右侧：浓度荧光强度和浓度图形的组合左侧：荧光强度右侧：浓度2.当用鼠标改变刻度时，两个图形的纵坐标都将改变。3-4点

27、击趣（准备）按钮并选择坐标标签。3 3刻度的改变X坐标和Y坐标的数据刻度能通过两种方法来改变，一是数字 进入，另一个是用鼠标操作。（1） ）通过数字进入来改变刻度图3-5坐标标签在“最大”或“最小”的场所为X坐标和Y坐标进入所需 的数字值。Y坐标刻度设定为某个模式（数字、比值、浓 度）存储以后，初始的值就是这些值。 X坐标进入X坐标的最小值和最大值，在这儿显示 进入的范围。坐标的单位在方法窗口中设定, 最初的值是数据文件的最大值和最小值。 Y坐标进入Y坐标的最小值和最大值，在这儿显示 进入的范围。坐标的单位在方法窗口中设定, 它随着测量模式的变化而变化。初始值得最 小值比数据文件中最小值得5%

28、小，初始值得 最大值比数据文件中的最大值的5%大。默认范围返回到X和Y坐标的初始值。3-5（2） ）通过鼠标操作来改变刻度1.把鼠标的指针指向要放大区域的一个顶点（矩形）。2.当按压鼠标的左键时，移动鼠标至要放大区域的对角线的相反位置。现在这个区域被封闭，如图3 6所示。3 释放鼠标按钮，指定的区域将被显示在满刻度上。4 为返回到原来的刻度，请点击固按钮。或者选择观看一重新设定坐标。或者是点击鼠标右键，并选择重新 设定坐标。图3-63.4数据菜单当你选择数据菜单时，一个下拉菜单显示如图3 7所示。 数据菜单包含有处理功能，如下列所示。设定时间偏移量减背景减图表删除点平滑处理计算参数标记覆盖每个

29、处理功能详述如下3-73.4.1设定时间偏移量这个功能用来选择适当的时间点作为时间零。尽管这个处理 仅仅对于测量数据是有效的，它将从测量数据中导致所有数 据（比值、浓度）计算。时间零点（偏置）仅为曲线图设定 的，为了选择新的偏移量，时间零点必须返回导原先点，再 重新设定数据。为了设定测量数据图形的零点：1.点击屋按钮或选择数据设定时间偏移量,一个窗口将显示，如图3 8所示。直线光标出现在这个窗口，光标位置上的信息在这儿显示。2.2.按照下列方法设置所需时间点的偏移量，点击Offset和右击 微量指针或键入该时间点。3 在完成偏移量进入之后，点击OK按钮，谱图将按时间零点 被显示，该零点时按规定

30、的偏移值移位。为了使谱图返回到数据处理前的状态，请点击蛊图标。屏 3-8幕上的谱图能够通过鼠标操作而放大，并且，放大的刻度能3-9够通过双击鼠标而重新设定。3.4.2减背景这个功能用于从测量数据的图形上的所有数据点减去背景。选择数据减背景,将显示一个窗口，如图3 9所示。图 形的刻度可通过鼠标操作来改变，在该窗口中出现一条直线 光标，光标位置的信息被指示。图3 9这个窗口包含设定下列元素 F1的背景臥被减去的值，它作榊景值，曲一波长的娠减去这他 F2的背景一个被减去的值，它作柵景值，曲二波长的城减去这他重新设定重新把背景水平设定为0。首先，点击“F1的背景”（“F2的背景”），然后在谱图上所需

31、要的位置上右击鼠标。对应于光标位置的背景值将在相应的对话框中显示。在完成背景水平设定之后，点击OK。在背景减法被显示之后，设定窗口将消失。背景水平的设定仅在有谱图的情况下，为了 选择新的背景水平，当前的背景水平必须返回到原先的水 平，它通过选择数据重新设定来操作。为了把谱图返回到赠处理之前的状态，点击區L屏幕中的谱图能够通过鼠标操作来放大，放大的刻度能够通过双击鼠标来重臓定。3.4.3减谱图谱图之间的减法能够执行。但是，FL阳离子扫描文件的其它数据处理窗口在当前没被显示或者当设定的波长数是不同的，这个功能是不适用的。计算公式如下：（所需的谱图）=（当前谱图）-（極比例糊）X （灘择的谱图）当选

32、择数据减谱图时，一个窗口被显示，如图3 10所示。03-10关键元素详述如下：缩放比例常数进入一个常数，以放大所选择的谱图。点击逼按钮或鎳Iffll除点,f 窗口被显示，如图341所si图表在图表对话框中，当前显示FL阳离子的扫描文件的 文件名（窗口题头）被指示。选择完成之后，点击0K。从当前窗口中的数据减去别选择 的图谱，该窗口将消失，一个谱图将被显示。如果你要放 弃数据处理，请点击Cancel o为了使该图谱返回到数据处理之前的状态，请点击倒。3.4.4删除点数据点能被从光谱数据中删除，被删除时间点的数据通过使用调节点的数据的杆补来产生。图3 11波长（1, 2） ）选择要删除数据的谱图。

33、表格被显示谱图的数据消单（处理前的测量数据）。清除所有清除所有要删除的做法。为了数据点的删除：1.选择一个要删除的数据点，点击数据表上的数据值,或者选择波长1或2,然后右击鼠标指向谱图上要删rl 一二一r3除的数据点。2.为了取消你的选择，点击数据表上的相应的时间单元。当你希望消除所有的选择点时,请选择“Clear3 在完成选择之后，请点击OK按钮。所选择的数 据点将被删除，修改后，谱图将重新显示。为了使谱图返回到数据处理之前的状态，请点击圍。屏幕上 的谱图能够通过鼠标的操作而放大。并且，被放大的刻度能够 通过双击鼠标而重新设定。3.4.5平滑处理在数据菜单中选择平滑处理命令或者点击岂按钮，一

34、个窗口被显亦，如图3 12所亦。图 3-12这个窗口包含下列参数，每个参数叙述如下。功能类型选择下列三种平滑方法中的一种。Savitskg-Golay平均中值平滑处理的方次给平滑处理赋值方次。有效输入范围：2至4点数给用于计算的数据点数赋值。有效输入范围：1至100为了返回到原先的状态（计算前），请点击崗。3-123.4.6计算参数对于浓度显示的计算公式是可以改变的，点击盂按钮或选择数据计算数据,一个窗口被显示，如图3 13所示。图 3-13等式1/2计算公式取决于设定的波长数。每个常数值“Kd”和“a”能够进入，每个使用计算得出的Fmin和Fmax的值也可以进入。为了进入，请按Fmin或F唤

35、按钮或在轨迹上按右键。当前的迹线值将被进入，所需要的值也能用键盘进入。校准当你想为计算使用校准曲线时，请选择这个按钮。这个按 钮被选择之后，再选择Load Calibration按钮，点击这个 按钮以选择文件(*.fdc)自动最小/最大为了使用浓度计算能够自动设定乩讪和F喻。设定之后，点 击OK按钮，数据将根据确定的条件重新计算，并且结果将 被显不。屏幕上的谱图能够通过鼠标操作进行放大，并且已放大的刻度 能够通过双击鼠标而重新设定。3-133.4.7 12在所有谱图的横坐标上能够显示三角形(人这些谱图表 示荧光强度、比值和浓度，它们在数据处理窗口。为了进入 标记信息，选择数据标记,一个窗口被显

36、示，如图3 14 所示。图 3-14使进入到时间和注释区域。进入之后，点击OK按钮，将显现在进入的时间点上，这个时间点是在谱图上显示的。图3-15显示标记在已进入的时间点85秒，200秒和255秒上。标记信息最高可进入5个点。3-143.4.8覆盖这个功能用于两个或两个以上谱线的比较。从数据菜单中选择覆盖命令，最多可选择10条谱线（高达5个数据文件）。5 a mpdcl J D M.5 uinyll .BI图 3-16点击抨入。被覆盖的一列文件将被显示，选择所需的文件名，并点击打开“Open”按钮，显示将以所选择的样品名而更新。如图3-17所示，然后点击Closeo图 3-173-15 为了从

37、覆盖窗口删除，再次显示一个窗口，如图3-17所 示。选择相应的样品名，并点击Deleteo或者从预览菜单 中选择Stack或Tile命令，然后点击超按钮并选择显示 谱图标签。一个窗口被打开，如图3 18所示。图 3-18点击要显示的谱图，然后点击OK。在覆盖的谱线中，光度值在每个谱线的颜色相对应出被指 示，如标记( (1)所示。样品名被指示，如标记(2)所示, 峰值表和比值计算结果表将不被显示。图 3-19注意：覆盖的数据不能够被存储。3.4.9处理后的数据存储数据处理，例如平滑处理之后的文件能被存储。数据处理之后，选择FileSave as, 一个窗口被显示，如图3 20所图 3-20进入文

38、件名，并点击Save,在这儿存储的文件有一个r.fdm”格式。3-173.5创建标准曲线样品的浓度能够通过标准曲线的计算而得到。在执行这个功能 之前，标准曲线需要被选定，建立的方法在下面进行描述。3.5.1新标准曲线的建立点击巨或选择FileNewo 一个窗口被打开，如图3-21所示。八I if J*1；厨 3-22图 3-21选择Calibration Curve并点击OK,然后出现一个窗口,如图3 22所示。348这个窗口包含有设定项目，如下列所示。校准模式既可以选择浓度一数据型，也可以选择浓度一比率型。校准类型选择线性或二次方类型。标准数能够增加。点击爲按钮。为标准曲线进入标准数，有效输

39、入范围：2至50更新按钮为了改变标准的数量，请点击这个按钮，确保现存的内容被淸 除。抨入按钮点击这个按钮，可为标准数据表增加一行。删除按钮当点击这个对话框中的号码时，相应的行将从数据表上删掉。计算按钮根据所进入的标准数据和标准曲线类型，计算标准曲线的等式 显示在屏幕的右侧。如果标准曲线的等式不能被显示， “UNDEFINED” 将被显示。校准数据对话框一一浓度进入一个浓度值一一数据进入一个荧光强度值一注释进入信息，如文件名和试剂在进入所有项之后，点击Calibration按钮。通过选择ViewCalibration Curve,校准曲线数据设定能被显示出来。3-193.5.2增加点对于从已存储

40、的FL阳离子扫描文件中的校准曲线的数据,或选择DataAdd CalibrationPoints,下列窗口被显示，如图2-23o图3 23这个窗口包含有下列元素。谱图荧光强度的谱图能被显示。当在轨迹光标上右击鼠标 时,对于所选择的数据的荧光强度值将被加到校准数 据框上，从而从顶行开始。因为“0”作为浓度值被 进入，它应当用数字键来改变。校准数据对话框根据所选择的校准曲线模式，在这儿进行数据列表, 表头是浓度一荧光温度或浓度一比值。浓度值可通 过键输入来改变。波长选择波长数，按钮“2”。对于数据测量保持伪装，它 仅是单波长。 EEEI用于移动所显示的图像。巨丁:当它打开时，另一张图像被显示。S

41、:显示当前的图像。在完成数据增加之后，点击OK按钮。增加的数据将进入到标准数据框内，它在校准曲线产生窗口中。根据增加/编辑的数据，校准曲线将产生。3-203.5.3 FL阳离子校准文件的存储和打印为了存储新建立的标准曲线文件，请选择File-Save as或点击亘按钮，一个窗口被显示，如图3 34所示。图 3-24进入文进名，并点击Save,相应的文件将以r.fdc”格式 被存储。被存储的文件用作浓度计算的公式。文件数据能被打印，它 打印出标准曲线图和数据。对于打印的方法，参阅4 1节。3-214.报告输出414.2 数据传送到 Microsoft(R) Excel 上击画按钮,它在工具条上。

42、然后激活数据处理窗口的区4.1打印已测量的数据能够被打印出，可用下面描述的来两个程序中的 任一个来打印。(1) )打开数据文件，并在文件菜单中选择打印命令。或者点域，将进行打印。通过点击文件菜单中的打印预览，打印的内容会完整的显示出来。(2)在数据菜单中选择报告命令，或点击曬按钮，它在工具 条上。打印预览的窗口出现，然后点击打印。这个程序 的打印项目必须通过准备菜单中的报告标签来选择。图4-2注意：如果在打印纸上没有打印出重复测量、覆盖等的参数, 打印的方向应当从竖直的改变为水平的。图4-1袪二(3)使用Microsoft(R) Excel的扩展码，数据能够被存储选(2)已测量的数据能够传送到

43、Microsoft(R) Excel工作表上,执行程 序如下。(1)打开准备窗口并选择报告标签，显示如图4 3所示。选择传送的内容(峰值表和数据表，在波长扫描的场合下)，并把检査标记放在Use Microsoft(R) Excel的题头上，点击OK。 .丄 一， fOman!洛壬严一QS. .; Mt：；： D 槓# N ：；-. 二厂一厶一 厶；轴存；匚八內； ；：,：； . 二 二 f J a, F a.“ . .一 . r . : 9 图4-3点击鑑1 (报告)按钮，Microsoft(R) Excel将自动启动并阅读数据。从现在开始，控制被移交到Microsoft(R)Excel 上。

44、4-34.3把谱图粘贴到Microsoft(R) Word上。择FileSave Copy As并进入文件名。工 丄卄;iiH.HjAh4 A * C* -：，. - - jlWHi. ftm.WWHfTSf QUCOt wrt JX ? Wc-mrwrtJlr 芦皿 JI xlrvGiI iamr 学yF V图4-5(4)关闭Microsoft(R) Excelo 一个窗口显示如图4 6所示,也关闭这个窗口。初始化数据处理窗口出现。aiGli H3n*口wrwn”g ijn2zC*B r_mr.* VHlWrQncrjrw Fp%V%g?tr Hi*fl?r ter Gck*-rfarni

45、n He gfl ftfirw 尸机J XC W 怦心讥Cfr* rryj f ijVWfrnv 钊S” K t J、小ra 4-6 在创建报告中，谱图可直接被粘贴。使谱图数据处在积极状态 下(通过点击谱图)，并从编辑菜单中选择拷贝指令。然后打 开Microsoft(R) Word,并从编辑菜单中选择粘贴指令。因此，谱图能够粘贴在Microsoft(R) Word文件中，比值计算 的结果和均值也能在相同的程序中粘贴。当你右击被贴的谱 图，并选择FL Calcium Scan Object”，如图4-7所示，可 打开数据处理窗口，允许改变刻度值等。扩呼14-4图4-7注意：当比值和校准曲线一个都

46、没有时，(*.fdc)谱图就不能粘贴，所设定的标记表也不能粘贴。当粘贴FL钙扫描时:4-5右击被粘贴的谱图，如图4 8所示。然后选择“FL CalciumScan Object”，数据处理窗口打开，允许刻度改变等。图4-8当粘贴原文时: 在报告标签上为打印设置的项目，除了谱图外，将被传递。一个窗口被显示，如图4 9所示。图4g当粘贴图形时:4-6一个窗口被显示，如图4 10所示。图 4-10鼠标右击，并选择GroupingReset group 它允许分离目标，加上变化的谱线密度和/或改变字体的规格，如图4 11所图 4-114.4数据转换成ASC n码文本这个程序有一个文本转换功能，它把数据

47、处理文件变成其它的电子数据表格程序，数据能转换成下列数据文本。JCAMP-DX 文件( (* dx)ASCH文件(*.txt)4-7Graph Metafile (* vmf)注意：1 把经历的项目转换成JCAMP-DX文件，包括日期/ 时间，分析方法和数据表。2.把经历的项目转换成ASCH文件，包括在准备窗口 上的报告标签上的那些选择。3 把经历的项目转换成Graph Metafile图文文件，它 和粘贴的图形一样，如前面所示。1.打开数据处理窗口。2.点击文件菜单中的Save As指令。3.一个窗口被显示，如图4 12所示。选择“ASCII Text(*.txt)w作为文件形式，然后指定文

48、件夹以存储该文件。图 4-124-84.进入文件名并点击Save。图 4-13附录为了给试验设定测量条件，下列仪器条件必须确定。扫描时间周期时间EX狭缝EM狭缝光电倍增管电压这个附录解释如何安排仪器条件以获得最优的实验结果。A.1扫描时间和周期时间的设定为了得到更好的测量结果，尽可能获得许多数据点是有利的。在测量期间数据点数的收集是由下列图表确定的：扫描时间,周期时间和测量的波长数。这些因素的关系能够用公式1来表达。,V吧,数据设定的数目）（最大的数据点）.公式1扫描时间：样品测量中的扫描时间。有效输入范围：607200秒周期时间：为一次扫描所有的测量波长所占据的时间周期。周期时间在0 2至25 0秒之间。:据设定的数目：这是当前所选择的波长数。它经过仪器标签来选择，