细胞融合和单克隆抗体PPT学习教案

1、会计学1细胞融合和单克隆抗体细胞融合和单克隆抗体6、动物细胞融合技术的应用第1页/共30页指用自然或人工方法使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程。第2页/共30页灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞融合，形成杂种细胞原理：细胞膜的流动性第3页/共30页 细胞融合是正常的生命活动两个细胞正在融合 受精作用第4页/共30页4、植物体细胞杂交和动物细胞融合第5页/共30页6、动物细胞融合技术的应用：细胞融合技术突破了有性杂交的局限，使远缘杂交成为可能。第6页/共30页 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，不灭活的话会感染

2、细胞，而不能诱导细胞融合。第7页/共30页二：动物细胞融合的成功应用 单克隆抗体的制备第8页/共30页输入浆细胞动物体内 某抗体 某抗原 第9页/共30页2.什么叫单克隆抗体 用单个B细胞进行克隆，得到的细胞群能够分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体，这种抗体就叫做单克隆抗体。怎样才能获得单克隆抗体？提示1：仅用细胞培养技术可行吗？提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？第10页/共30页杂交瘤细胞米尔斯坦(阿根廷)和科勒(德国)因此在1984年获诺贝尔奖。第11页/共30页第12页/共30页提取用特定的选择性培养

3、基 1. 动物特异性免疫2.注意B淋巴细胞是一个系列。（B1,B2,B3,-Bn）3.细胞融合: 三种融合方式4.第一次筛选：只有杂交瘤细胞存活。同种细胞的融合在此培养基上不能存活，但杂交瘤细胞也是一个系列, 。5.第二次筛选：每孔只放一个杂交瘤细胞。“克隆化培养”每个杂交瘤细胞，并进行“单一抗体检测”，“检测阳性”的孔内即是所需要的杂交瘤细胞。多孔培养板上6.选择所需要的杂交瘤克隆细胞群第13页/共30页单抗的制备过程要点：第14页/共30页1)、本过程利用了哪些原理？免疫原理，细胞融合原理和动物细胞培养原理2)、为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？这样融合成的杂交瘤细胞，继承了双亲细胞的

4、遗传物质，不仅具有B细胞分泌抗体的能力，而且还有无限增殖的本领，因而可以获得大量单克隆抗体有无限增殖能力的细胞是肿瘤细胞，具有转移能力的肿瘤细胞，称为癌细胞，所以说，瘤细胞不能等于癌细胞。3)、骨髓瘤细胞是癌细胞吗?第15页/共30页4)、整个制备过程为何要经过两次筛选?第一次筛选得到杂交瘤细胞（多种），第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。 由于该细胞群是单个杂交瘤细胞克隆得来的，所以产生的抗体必然是化学性质单一的，特异性强的单克隆抗体。这里的单克隆确有单个细胞克隆的含义，只不过克隆的不是B淋巴细胞，而是杂交瘤细胞。第16页

5、/共30页 特异性强，灵敏度高，可大量制备。第17页/共30页第18页/共30页一种诱导细胞融合的新方法一种新细胞灭活病毒杂交瘤细胞一个优势单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势第19页/共30页1在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）A结果是相同的B杂种细胞的形成过程基本相同C操作过程中酶的作用相同D诱导融合的手段相同第20页/共30页2. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（ ） 淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞 小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞A BC D C第21页/共3