第14章 多倍体与转基因动物

1、第第1414章章多倍体与转基因动物多倍体与转基因动物14.1 多倍体动物多倍体动物动物多倍体比较少，原因：动物多倍体比较少，原因：（1 1）高等动物远源杂交能力很弱，很难形高等动物远源杂交能力很弱，很难形成杂种个体；成杂种个体；（2 2）多倍体动物高度不育，染色体异常通多倍体动物高度不育，染色体异常通常会千万胚胎死亡，很难得到多倍体后代。常会千万胚胎死亡，很难得到多倍体后代。 但但低等脊椎动物如鱼类、两栖类和爬低等脊椎动物如鱼类、两栖类和爬行类中存在行类中存在。14.1 多倍体动物多倍体动物多倍体水产动物的研究多倍体水产动物的研究目的目的（1）提高生长速度（2）控制过度繁殖（3）延长寿命（4）

2、改善品质（5）合理开发渔业资源14.1 多倍体动物多倍体动物多倍体培育在动物遗传育种上具有重要多倍体培育在动物遗传育种上具有重要意义意义例如： 三倍体鲍鱼具有不育性，其性腺发育程度应低于二倍体，生长方面的能量相对增加，增强了鲍鱼的抗逆性抗逆性和抗病能力抗病能力，提高了生长速度生长速度和品质品质。 三倍体鲤鱼、三倍体牡蛎肉质更加鲜美肉质更加鲜美 大麻哈鱼、鲜鱼产卵后死亡，其三倍体不育，可避免死亡避免死亡。多倍体动物多倍体动物 鱼类精子入卵的时期是第二次减数分裂的中期，刺激卵子继续完成第二次分裂。卵中原有的二组染色体中一组作为第二极体排出受精卵成为正常的二倍体。如果在精子入卵时第二极体不能正常排出

3、，则精卵原核结合成为三倍体受精卵。多倍体动物多倍体动物 如果卵子受精后，照常排出第二极体形如果卵子受精后，照常排出第二极体形成成单倍体卵单倍体卵，单倍的卵原核与，单倍的卵原核与单倍的精单倍的精原核原核结合就形成二倍的受精卵，这时再结合就形成二倍的受精卵，这时再抑制受精卵的第一次卵裂抑制受精卵的第一次卵裂，则产生，则产生四倍四倍体体。多倍体动物多倍体动物 产生原理产生原理：染色体的加倍可以通过保留：染色体的加倍可以通过保留受精卵第二极体即受精卵第二极体即抑制卵子的第二次成抑制卵子的第二次成熟分裂熟分裂或或抑制受精卵的第一次卵裂抑制受精卵的第一次卵裂来实来实现。现。1 1 多倍体动物培育方法多倍体

4、动物培育方法A 物理方法物理方法机制主要是通过机制主要是通过破坏微管形成破坏微管形成，使由微管，使由微管蛋白聚合成的微管解体或阻止微管的聚合蛋白聚合成的微管解体或阻止微管的聚合过程，过程，使染色体失去移动的动力，人为抑使染色体失去移动的动力，人为抑制染色体向两极移动制染色体向两极移动，形成多倍体细胞。，形成多倍体细胞。1 1 多倍体动物培育方法多倍体动物培育方法（1 1）温度休克法）温度休克法：即用略高于或略低于致死温：即用略高于或略低于致死温度的冷或热休克来诱导度的冷或热休克来诱导三倍体三倍体( (抑制第二极体排抑制第二极体排放放) )或或四倍体四倍体( (抑制第一次卵裂抑制第一次卵裂) )

5、的方法。根据处的方法。根据处理温度的高低分为理温度的高低分为热休克法和冷休克法热休克法和冷休克法。一般。一般冷冷水性鱼类如蛙科鱼类，宜用热休克，温度范围为水性鱼类如蛙科鱼类，宜用热休克，温度范围为28-3628-36; ;温水性鱼类宜用冷休克，温度范围为温水性鱼类宜用冷休克，温度范围为0-50-5左右左右。 优缺点：优缺点：简便、廉价，但诱导率较低。简便、廉价，但诱导率较低。1 1 多倍体动物培育方法多倍体动物培育方法（2 2）水静压法）水静压法：采用较高的水静压（如采用较高的水静压（如65kg/cm65kg/cm2 2）可抑制）可抑制卵母细胞第二极体的释卵母细胞第二极体的释放或放或者抑制第一

6、次卵裂诱导产生多倍体的者抑制第一次卵裂诱导产生多倍体的方法。方法。 原理：静水压处理破坏了有丝分裂器中原理：静水压处理破坏了有丝分裂器中的的纺锤丝即纺锤体和星体纺锤丝即纺锤体和星体，从而暂时阻，从而暂时阻断了有丝分裂的进程。断了有丝分裂的进程。1 1 多倍体动物培育方法多倍体动物培育方法 该方法处理程序标准化该方法处理程序标准化易于掌握易于掌握，处理时间短，处理时间短(3-5min)(3-5min)，诱导率较高，对受精卵损伤较小诱导率较高，对受精卵损伤较小。 但需但需专门的设备专门的设备如水压机等。此外，静水压处如水压机等。此外，静水压处理还使理还使染色体染色体发生了不同程度的凝缩发生了不同程

7、度的凝缩, ,还可能还可能使使受精卵的结构受精卵的结构发生某些物理和化学变化，造发生某些物理和化学变化，造成发育受阻，因此在生产中应用较少。成发育受阻，因此在生产中应用较少。1 1 多倍体动物培育方法多倍体动物培育方法B B 化学法化学法 细胞松弛素诱导法细胞松弛素诱导法：细胞松弛素：细胞松弛素B(B(CBCB) )导致导致极体的保留是通过极体的保留是通过阻止卵子微丝环的收缩和极阻止卵子微丝环的收缩和极体的分离体的分离来实现的。来实现的。CBCB处理比其他方法能更有处理比其他方法能更有效地诱导效地诱导三倍体三倍体的形成。的形成。B B 化学法化学法 6-6-甲氨基嘌呤诱导法甲氨基嘌呤诱导法：

8、6DMAP6DMAP 是一种蛋是一种蛋白激素酶抑制剂。当白激素酶抑制剂。当6DMAP 6DMAP 与微管蛋白二聚与微管蛋白二聚体结合以后体结合以后对微管正常的结构和功能起到了抗对微管正常的结构和功能起到了抗有丝分裂的作用，因此可以产生三倍体有丝分裂的作用，因此可以产生三倍体。化学法缺点：化学法缺点：成功率较低，且对胚胎及操作者有成功率较低，且对胚胎及操作者有毒性，影响存活。毒性，影响存活。1 1 多倍体动物培育方法多倍体动物培育方法C C 生物法：主要是远缘杂交法生物法：主要是远缘杂交法 瑞齐（瑞齐（RaschRasch）等于）等于19651965首先证明了三倍首先证明了三倍体脊椎动物可通过四

9、倍体个体与二倍体体脊椎动物可通过四倍体个体与二倍体个体杂交产生。个体杂交产生。2 2 多倍体动物的鉴定多倍体动物的鉴定 人工诱导处理过的群体可能是由多倍体、人工诱导处理过的群体可能是由多倍体、二倍体甚至是多倍体与二倍体构成的嵌二倍体甚至是多倍体与二倍体构成的嵌合体等合体等混合群体混合群体，所以需要筛选出需要，所以需要筛选出需要的多倍体。的多倍体。2 2 多倍体动物的鉴定多倍体动物的鉴定（1 1）染色体计数法：）染色体计数法：将细胞固定制片、将细胞固定制片、染色后染色后观察染色体个数观察染色体个数。由于染色体制片技术比较成熟，。由于染色体制片技术比较成熟，因此该方法仍是目前鉴定多倍体倍性的因此该

10、方法仍是目前鉴定多倍体倍性的一种直观、一种直观、可靠的方法可靠的方法，缺点，缺点是比较费时。是比较费时。（2 2）核仁染色观察法）核仁染色观察法：一般而言，细胞：一般而言，细胞核仁数核仁数量与染色体组数目（倍性）成正比例量与染色体组数目（倍性）成正比例，通过，通过银染银染法法检测胚胎细胞核仁数量及分布情况可以鉴定多检测胚胎细胞核仁数量及分布情况可以鉴定多倍体，直观、可靠。倍体，直观、可靠。2 2 多倍体动物的鉴定多倍体动物的鉴定（3 3）核体积测量法）核体积测量法：一般而言，：一般而言，细胞核大小与细胞核大小与染色体数目成比例，染色体数目成比例，为了维持恒定的核质比例，为了维持恒定的核质比例，

11、随着细胞核的增大，细胞大小也按比例增加。因随着细胞核的增大，细胞大小也按比例增加。因此此多倍体细胞及细胞核通常要比二倍体大一些多倍体细胞及细胞核通常要比二倍体大一些。一般通过一般通过测定红细胞核体积测定红细胞核体积的大小可以鉴定染色的大小可以鉴定染色体的倍性。缺点是比较费时、准确性不高。体的倍性。缺点是比较费时、准确性不高。2 2 多倍体动物的鉴定多倍体动物的鉴定（4 4）DNADNA含量测定：染色体组数与含量测定：染色体组数与DNADNA含量成正含量成正比。比。测定单个细胞的测定单个细胞的DNADNA含量，含量，根据细胞根据细胞DNADNA比较比较来推断出细胞的倍性。如果发现杂种的来推断出细

12、胞的倍性。如果发现杂种的DNADNA含量含量是其亲本的一倍半，就可以确定这些杂种是三倍是其亲本的一倍半，就可以确定这些杂种是三倍体。体。DNADNA含量测定法快速准确，能测出嵌合体，含量测定法快速准确，能测出嵌合体，但是缺点是需要专门仪器。但是缺点是需要专门仪器。14.2 14.2 转基因动物转基因动物1.1.转基因动物转基因动物（transgenic animaltransgenic animal）：是指在）：是指在基因组内稳定地整合外源基因，并且外源基因可基因组内稳定地整合外源基因，并且外源基因可以稳定地遗传给后代的基因工程动物。以稳定地遗传给后代的基因工程动物。 利用利用转基因动物生产人

13、类药用蛋白、异体器官转基因动物生产人类药用蛋白、异体器官等非常规畜牧产品，是目前世界上转基因动物等非常规畜牧产品，是目前世界上转基因动物研究的热点之一。研究的热点之一。2.2.转基因动物培育方法转基因动物培育方法（1）原核原核期胚胎期胚胎显微注显微注射法射法 原理原理：对受精卵的原核进行对受精卵的原核进行DNADNA注射，获注射，获得转基因动物。得转基因动物。 优点：操作相对简便，技术要求相对较优点：操作相对简便，技术要求相对较低，周期较短。低，周期较短。2.2.转基因动物培育方法转基因动物培育方法原核期胚胎原核期胚胎显微注显微注射法射法：几百：几百KBKB大片段、大片段、应用广泛应用广泛 目

14、的目的DNADNA制备（无需构建载体）制备（无需构建载体） DNADNA注入原核胚（受精卵雄核）注入原核胚（受精卵雄核） 胚胎体外培养胚胎体外培养 胚胎移植（移植前鉴定）胚胎移植（移植前鉴定） 发育发育 出生、鉴定出生、鉴定 1 1显微注射法显微注射法受精卵显微注射胚胎移植后定检测显微注射法操作流程1. 外源基因整合至基因组的效率很低，对经济外源基因整合至基因组的效率很低，对经济大动物（猴、牛、羊）的整合效率更低；大动物（猴、牛、羊）的整合效率更低；2. 随机整合，转基因整合的位点和拷贝数无法随机整合，转基因整合的位点和拷贝数无法控制，造成转基因的表达差异很大，筛选高控制，造成转基因的表达差异

15、很大，筛选高表达转基因动物的工作量很大；表达转基因动物的工作量很大；3. 对经济大动物，由于需要大量的供体和受体，对经济大动物，由于需要大量的供体和受体，耗时长、费用昂贵，受到很大的限制。耗时长、费用昂贵，受到很大的限制。 2.2.转基因动物培育方法转基因动物培育方法 19801980年年，GordonGordon等人首先育成等人首先育成转入生长素基因转入生长素基因小鼠小鼠。世界第一个转基因动物世界第一个转基因动物。 生长速度快生长速度快2 24 4倍、体形大一倍的转基因倍、体形大一倍的转基因“硕硕鼠鼠”发表在发表在19821982年的年的naturenature杂志上。杂志上。2.2.转基因

16、动物培育方法转基因动物培育方法（2）胚胎干细胞胚胎干细胞方法方法 胚胎干细胞（胚胎干细胞（ESES）是一种含正常二倍染色体的）是一种含正常二倍染色体的具有发育全能性的细胞具有发育全能性的细胞，因此只要，因此只要将外源将外源DNADNA导入胚胎干细胞导入胚胎干细胞就可以实现基因的转移。就可以实现基因的转移。胚胎干细胞法建立转基因鼠的实验程序 干细胞（干细胞（stem cells）：是细胞谱系分化中最原）：是细胞谱系分化中最原始的细胞，能终身自我更新，并具有多分化潜始的细胞，能终身自我更新，并具有多分化潜能，能增殖分化为特定的组织细胞。能，能增殖分化为特定的组织细胞。 胚胎干细胞（胚胎干细胞（em

17、bryonic stem cells, ES）：从）：从着床前的哺乳类胚胎中分离的多能干细胞，具着床前的哺乳类胚胎中分离的多能干细胞，具有在体外不分化的增殖能力，经体外长期培养有在体外不分化的增殖能力，经体外长期培养后仍具有分化成后仍具有分化成3种胚层的发育潜能。种胚层的发育潜能。 19561956年，年，WhittenWhitten培养成功小鼠的受精卵，在体外发育成囊胚；培养成功小鼠的受精卵，在体外发育成囊胚；19581958年，年，McLarenMcLaren经胚胎移植，体外培养的胚胎产生小鼠个体；经胚胎移植，体外培养的胚胎产生小鼠个体；19651965年，年，BrinsterBrinst

18、er建立了胚胎的微滴培养技术；建立了胚胎的微滴培养技术；19681968年，年，GardnerGardner将分离的细胞注入囊胚，获得嵌合鼠将分离的细胞注入囊胚，获得嵌合鼠; ;19701970年，年，StevenSteven分离成功小鼠的胚胎瘤细胞；分离成功小鼠的胚胎瘤细胞；19811981年，年， Martin Evans Martin Evans 从正常的小鼠囊胚中分离成功从正常的小鼠囊胚中分离成功ESES细胞；细胞；19841984年，年，BradleyBradley证实注射入囊胚的小鼠证实注射入囊胚的小鼠ESES细胞可分化为成体的各种细胞可分化为成体的各种组织，并组织，并整合入生殖系

19、整合入生殖系。意义：里程碑，与同源重组技术的结合使得在整体水平定向改变和意义：里程碑，与同源重组技术的结合使得在整体水平定向改变和修饰哺乳动物的遗传特性成为可能修饰哺乳动物的遗传特性成为可能 19951995年，年，ThomsonThomson从恒河猴中分离了猴的从恒河猴中分离了猴的ESES细胞；细胞；19981998年，年，ThomsonThomson从人的囊胚中分离成功人的从人的囊胚中分离成功人的ESES细胞；细胞；20002000年，年，BongsoBongso等建立了人的等建立了人的ESES细胞株细胞株 与传统育种方法相比较，与传统育种方法相比较，ESES细胞在生产转基细胞在生产转基因

20、动物方面表现其独特的优势：因动物方面表现其独特的优势：（1 1）打破了物种的界限，突破了亲缘关系的限）打破了物种的界限，突破了亲缘关系的限制，加快了动物群体遗传变异程度；制，加快了动物群体遗传变异程度；（2 2）可以进行定向变异和育种，利用同源重组）可以进行定向变异和育种，利用同源重组技术对技术对ESES细胞进行遗传操作，通过细胞核移植细胞进行遗传操作，通过细胞核移植生产遗传修饰性动物，有可能创造新的物种；生产遗传修饰性动物，有可能创造新的物种；（3 3）利用）利用ESES细胞技术，可在细胞水平对胚胎进细胞技术，可在细胞水平对胚胎进行早期选择，这样可以提高选择的准确性，缩行早期选择，这样可以提

21、高选择的准确性，缩短育种时间。近年来的研究表明，利用短育种时间。近年来的研究表明，利用ESES细胞细胞生产转基因动物在动物生产中发挥着极为重要生产转基因动物在动物生产中发挥着极为重要的作用。的作用。（3 3）精子载体法：）精子载体法：精子与外源精子与外源DNADNA混合培养，混合培养，DNADNA可被吸收进入精子头部，可被吸收进入精子头部，然后再与卵细胞受然后再与卵细胞受精后发育成转基因动物精后发育成转基因动物。 主要问题：重复性不好主要问题：重复性不好2.2.转基因动物培育方法转基因动物培育方法精子与外源精子与外源DNADNA结合的机理结合的机理精子直接与外源精子直接与外源DNA混合培养混合

22、培养，外源基因，外源基因可以直接进入精子头部，受精后就可发育可以直接进入精子头部，受精后就可发育成转基因动物。成转基因动物。后来后来RottmanRottman对此方法进行了改进，将外源对此方法进行了改进，将外源DNADNA在与精子共孵育之前用脂质体包埋，使在与精子共孵育之前用脂质体包埋，使脂质体与脂质体与DNADNA相互作用形成脂质体相互作用形成脂质体DNA复合物复合物。这种复合体比较容易和精子细胞。这种复合体比较容易和精子细胞融合，从而进入细胞内。融合，从而进入细胞内。 2 2. .转基因动物培育方法转基因动物培育方法(4)(4)逆转录病毒载体感染逆转录病毒载体感染法法原理：当逆转录病原理

23、：当逆转录病毒的毒的RNA RNA 进入细胞后，进入细胞后，逆转录成逆转录成DNA DNA ，依靠，依靠逆转录病毒的整合酶逆转录病毒的整合酶及其末端特异的核苷及其末端特异的核苷酸序列，转录出的酸序列，转录出的DNADNA可整合到染色体上，可整合到染色体上，从而将其所携带的外从而将其所携带的外源基因插入到染色体源基因插入到染色体上。上。 逆转录病毒载体逆转录病毒载体反转录病毒感染法逆转录病毒感染法特点逆转录病毒感染法特点 优点：优点：在各种转基因方法中，逆转录病毒感染在各种转基因方法中，逆转录病毒感染法的转基因效率是最高的，且为单拷贝整合。法的转基因效率是最高的，且为单拷贝整合。 缺点：缺点：逆

24、转录病毒载体在设计时虽然缺失了病逆转录病毒载体在设计时虽然缺失了病毒的复制功能序列，但是复制大量载体毒的复制功能序列，但是复制大量载体DNADNA所需所需的辅助病毒基因组内有可能与目的基因一起整的辅助病毒基因组内有可能与目的基因一起整合到同一细胞核中，就可能大量复制病毒，造合到同一细胞核中，就可能大量复制病毒，造成严重的污染，故不安全。此外，逆转录病毒成严重的污染，故不安全。此外，逆转录病毒载体容量有限，只能转移小片段载体容量有限，只能转移小片段DNADNA（10kb10kb），），而且逆转录病毒长末端重复的甲基化状态常使而且逆转录病毒长末端重复的甲基化状态常使转基因的表达缺失。转基因的表达缺

25、失。2 2. .转基因动物培育方法转基因动物培育方法（5 5）卵细胞显微注射）卵细胞显微注射法法 将将外源外源DNADNA克隆到逆转录病毒载体上，克隆到逆转录病毒载体上，再显微注射到再显微注射到M IIM II中期卵细胞（无核中期卵细胞（无核膜），膜），再体外受精，胚胎移植，发育再体外受精，胚胎移植，发育成转基因动物。成转基因动物。东北农业大学国内首例绿色荧光蛋白东北农业大学国内首例绿色荧光蛋白“转基因转基因”克隆克隆猪猪 绿色绿色荧光蛋白猪胎儿成纤维细胞克隆荧光蛋白猪胎儿成纤维细胞克隆Chapter 14细胞工程Copyright 2011 Wang Weidong, All rights

26、reserved.Genetically modified animalhttp:/ fluorescent fish, the first geneticallymodified animal to be sold as a pet3 3 转基因动物鉴定转基因动物鉴定 目的基因目的基因的鉴定：的鉴定：检查动物体内是否有外源基检查动物体内是否有外源基因因的存在的存在，以判明是否是转基因动物。可用，以判明是否是转基因动物。可用聚聚合酶链反应合酶链反应(PCR)(PCR)、斑点杂交、斑点杂交(Dot blot), (Dot blot), SouthernSouthern印迹印迹分析分析等多种方法进

27、行检测。等多种方法进行检测。3 3 转基因动物鉴定转基因动物鉴定 目的蛋白目的蛋白的鉴定：有活性的目的蛋白的的鉴定：有活性的目的蛋白的检测非常重要。检测方法主要有：检测非常重要。检测方法主要有：(1) SDS(1) SDS聚丙烯酰胺凝胶聚丙烯酰胺凝胶( (SDS-PAGESDS-PAGE) )(2) (2) 酶联免疫吸附实验酶联免疫吸附实验( (ELISAELISA) )(3) (3) WesternWestern印迹分析印迹分析4 4 转基因改良动物的应用转基因改良动物的应用（1 1）快速生长与肉质改善）快速生长与肉质改善。 如如转生长素基因的猪生长快，瘦肉率也高转生长素基因的猪生长快，瘦肉

28、率也高。 比利时比利时蓝牛肌肉增加表型蓝牛肌肉增加表型 皮埃蒙特牛肌肉增加表型皮埃蒙特牛肌肉增加表型 美培育转基因鳟鱼：腹肌有美培育转基因鳟鱼：腹肌有6 6块块, ,肉多肉多15%15% 4 4 转基因改良动物的应用转基因改良动物的应用（2 2）增加羊毛产量和性能。）增加羊毛产量和性能。 细菌基因细菌基因SATSAT和和DASDAS可以促进合成可以促进合成CysCys，将该基，将该基因转入羊肠胃道上皮细胞，可提高羊毛产量。因转入羊肠胃道上皮细胞，可提高羊毛产量。 若将毛角蛋白若将毛角蛋白IIII中间细丝基因转入绵羊基因组中间细丝基因转入绵羊基因组中，所产羊毛光泽亮丽、毛脂含量高暖和。中，所产羊

29、毛光泽亮丽、毛脂含量高暖和。（3 3）抗冻动物品种培育。）抗冻动物品种培育。 将鱼抗冻蛋白基因将鱼抗冻蛋白基因AFPAFP转入不耐寒鱼或其他动转入不耐寒鱼或其他动物。物。 一般把目的片段在器官或组织中表达的转基因动物一般把目的片段在器官或组织中表达的转基因动物叫动物生物反应器（叫动物生物反应器（bioreactorbioreactor），），几乎任何有生几乎任何有生命的器官、组织或其中一部分都可经过人为驯化为命的器官、组织或其中一部分都可经过人为驯化为生物反应器生物反应器, ,从生产的角度考虑，生物反应器选择的从生产的角度考虑，生物反应器选择的组织和器官要方便产物的组织和器官要方便产物的获得获

30、得 例如例如，乳腺、膀胱、血液乳腺、膀胱、血液等，由此发展了动物乳腺等，由此发展了动物乳腺生物反应器生物反应器, ,动物血液生物反应器和动物膀胱生物反动物血液生物反应器和动物膀胱生物反应器等。其中，转基因动物应器等。其中，转基因动物乳腺生物反应器乳腺生物反应器的研究的研究最为引人注目。最为引人注目。5 5 转基因动物转基因动物乳腺生物反应器乳腺生物反应器5 5 转基因动物转基因动物乳腺生物反应器乳腺生物反应器 乳腺是最理想乳腺是最理想的药物蛋白生产的药物蛋白生产场所场所（1 1）概念概念将将外源基因外源基因置于置于特异性特异性调节调节序列之下序列之下，使之，使之在在乳腺中乳腺中表达，表达，然后

31、然后通过通过回收回收乳汁乳汁获得获得重要重要价值价值的的生物活性生物活性蛋白蛋白的技术。的技术。5 5 转基因动物转基因动物乳腺生物反应器乳腺生物反应器 1987 1987 年年Gordon Gordon 等将等将组织型纤溶酶原组织型纤溶酶原激活剂激活剂(tPA)(tPA)与小鼠乳清酸蛋白与小鼠乳清酸蛋白(WAP)(WAP)基因的启动子构基因的启动子构成重组成重组基因，成功地培育出了基因，成功地培育出了3737只在乳汁中能只在乳汁中能表达表达tPA tPA 的转基因小的转基因小鼠鼠。 20062006年年6 6月月2 2日，日，世界上第一个世界上第一个利用利用转基因动物转基因动物乳腺乳腺生物反

32、应器生产的基因工程蛋白药物生物反应器生产的基因工程蛋白药物重组人重组人抗凝血酶抗凝血酶（商品名：（商品名：ATryn ATryn ）上市）上市获得获得批准批准。5 5 转基因动物转基因动物乳腺生物反应器乳腺生物反应器 目前，目前，1-1-抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶(AAT)(AAT)、人乳球蛋白、人乳球蛋白、凝血因子凝血因子IIIIII、IVIV、VIIIVIII、纤维蛋白原、降、纤维蛋白原、降钙素、钙素、SODSOD、红细胞生成素、红细胞生成素、IGF-1IGF-1等成功等成功表达，多种药用蛋白已经进入临床试验阶表达，多种药用蛋白已经进入临床试验阶段。段。5 5 转基因动物转基因动物乳腺生物反应器乳腺生物反应器上海交通大学医学遗传研究所：a) 1998年中国首头转基因羊。乳汁中表达人凝血因子IX蛋白。人凝血因子IX是治疗血友病的药物。b) 1999年，带有人血清白蛋白基因的转基因试管牛“滔滔”降生。携带人血清白蛋白基因的转基因试管携带人血清白蛋白基因的转基因试管牛牛“滔滔滔滔” 1998年上海医学研究所与复旦大学遗传所合作获得在乳腺肿表达有生物活性的人凝血因子IX转基因山羊5 5 转基因动物转基因动物乳