单纯疱疹病毒2型感染与非淋菌性尿道炎的病因关系(一)

1、单纯疱疹病毒 2 型感染与非淋菌性尿道炎的病因关系 (一) 作者：王万卷，王颖娟，王秀莹，李红敏，王晓鹏，陈丽 【摘要】目的探讨非淋菌性尿道炎 (NGU)患者单纯疱疹病毒 2 型 (HSV2) 感染的流行病学状况及实验室诊断方法。方法实验分为 NGU 患者组和 健康对照组。免疫快速测定法 (C C 快速法 )检测沙眼衣原体 (CT)，培养 法检测解脲支原体 (UU),血清酶联免疫吸附法 (ELISA 法)检测血清 HSV2 抗体，荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR检) 测尿道分泌物 HSV2。结果 NGU患者组的 CT、UU感染率分别为 23.27%和 30.91%。NGU患者组和 健康对照

2、组的 HSV2IgG、IgM、HSV2DNA阳性率分别为 38.18%/18.03%、 10.91%/1.64%、19.63%/4.92%，两组相比差异均有统计学意义 (P0.05)。 NGU 患者组无 CT、UU、阴道毛滴虫、念珠菌感染的 HSV2 阳性率为 33.33%，与对照组相比差异亦有统计学意义 (P0.05)。结论 HSV2是 NGU 的重要病原体之一。 FQ PCR法作为 HSV 感染的实验室诊断技术具有 很好的临床应用价值。【关键词】非淋菌性尿道炎；单纯疱疹病毒 2 型；血清学酶联免疫吸 附实验；荧光定量聚合酶链反应 非淋菌性尿道炎 (nongonococcalurethrit

3、is,NGU)为最常见的性传播疾病 之一，在欧美国家的发病率已经超过淋病。近年来， NGU 发病率在我 国逐年上升，占报告病例总数的第 3 位，仅次于淋病和尖锐湿疣。其 病原体复杂多样，沙眼衣原体 (chlamydiatrachomatis,CT)和解脲支原体 (ureaplasmurealtyticum,UU)是其中最主要的病原体 1 3，但临床上相当部分的患者无明显病因。有研究报道单纯疱疹病毒 (herpessimplexvirus,HSV与) NGU 发病有一定关系 4。为明确 HSV感染 与 NGU 发病的病因学关系，我们进行了 NGU人群中 HSV2感染的流行 状况的研究，现报告如下

4、。1 材料与方法1.1临床资料 275例 NGU患者(NGU患者组)来源于我院皮肤科、 性病专 科及妇科门诊，其中男 165 例，女 110 例，均按卫生部制定的 NGU的 诊断标准选择病例 3。临床症状为尿痛、 尿频、分泌物多、 尿道口红、 尿道痒、尿道不适、排尿不尽感等，每例至少有以上 3 种症状。患者 年龄 20-63 岁，平均 34.9岁。已婚 192例，未婚 83例，有婚外性行为 者 78 例。平均 NGU病程 6.5 月。对既往有生殖器疱疹病史及本次就诊 时有可疑疱疹皮损者予以剔除。 对照组 61例，为健康体检人员， 男 24 例，女 37 例，年龄 27-44 岁，平均 36.1

5、 岁， CT、UU、阴道毛滴虫、 念珠菌检测均为阴性。1.2 标本采集和处理1.2.1 血清标本 NGU患者组及对照组均抽取静脉血 2mL，离心后留取， -80保存。1.2.2分泌物标本按常规方法用无菌一次性棉拭子自男性尿道 2-3cm 处 和女性宫颈管内 1-2cm处取材，拭子停留 10s旋转取出。 NGU患者组 留取 3份，分别接种 UU培养基及用于 CT和 HSV2检测；正常对照组 取 1 份，用于 HSV2检测。余置 -4保存。1.3 方法1.3.1HSV2血清抗体检测血清样本以 ELISA血清试剂盒 (海南华美生化公 司产品)检测 HSV2血清抗体，具体方法参照试剂盒使用说明。1.3

6、.2 分泌物 CT、UU 等检测采用英国 “立明 ”衣原体抗原免疫快速测定 法(C C快速法 )检测 CT；以支原体培养鉴定试剂盒 (广东珠海市朗峰生 物技术有限公司产品 )检测 UU；阴道毛滴虫及念珠菌镜检由性病门诊实 验室完成。1.3.3FQ PCR 检 测 HSV2DNAPEGeneAmp5700型 PCR 仪 为 美 国 PerkinElemer公司产品。所用的 HSV2荧光定量 PCR诊断试剂盒购自中 山医科大学达安基因诊断中心 (卫生部生物试剂定点生产单位 )，试剂盒 包括 DNA提取液、HSV PCR反应管、阳性定量参考品 (107 基因拷贝 /mL) 标本处理后，加入 PCR

7、反应管，放入仪器样品槽。设置循环条件： 93 2min 预 变 性 ， 93 45s-5560s 先 做 10 个循 环 后 ， 再 以 93 30s-5545s 做 30 个循环，保存文件，运行。反应结束后保存检 测数据，分析结果。2 结果2.1NGU的病因学构成 NGU 患者组中 CT感染率为 23.27%(64/275),UU 感染率为 30.91%(85/275)，阴道毛滴虫感染率为 0.73%(2/275)，念珠菌 感染率为 1.09%(3/275)，HSV2 感染率为 19.63%(54/275)；两种以上病 原体感染率为 20.46%(56/275)；原因不明者为 24.73%(

8、68/275)。2.2两组 HSV2IgG、IgM、HSV2DNA阳性率的比较 NGU患者组中 HSV2IgG 阳性 105 例，占 38.18%，正常对照组 HSV2IgG阳性 11例，占 18.03%， 两者比较差异有统计学意义 ( 2=8.966,P0.00；5)NGU患者组中 HSV2IgM 阳性 30 例，占 10.91%，正常对照组 HSV2IgM阳性 1例，占 1.64%，两 者比较差异有统计学意义 ( 2=4.075,P0.0；5)NGU患者组中 HSV2DNA阳 性 54 例，占 19.63%，正常对照组 HSV2DNA阳性 3 例，占 4.92%，两 者比较差异有统计学意义

9、 ( 2=6.669,P0.0；1N) GU患者组中 102例无 CT、 UU、阴道毛滴虫、念珠菌感染，占 37.09%。这 102 例患者中 HSV2DNA 阳性 34 例，占 33.33%，正常对照组 HSV2DNA阳性 3 例，占 4.92%， 两者比较有显著性差异 ( 2=17.565,P0.00。1)3 讨论NGU 是由多种病原体 (除淋球菌外 )感染而引起的尿道炎的总称 ,其中 CT 是最常见的病原体。 NGU中 30%-50%的病例由 CT引起， 10%-20%的病 例由 UU 引起，约 1%-17%的病例由阴道毛滴虫引起，还有小于 10%的 病例与 HSV、白色念珠菌、细菌性阴道病有关 5。由于检测技术、病 例选择、病例数量及地理分布的差异，各研究报告存在较大差异。本 研究结果显示