仪器分析作业题外标法内标法

1、一、外标一点法【含量测定】芍药苷 照高效液相色谱法附录W D测定。色谱条件与系统适用性试验 ？以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇 -0.05mol/L磷酸二氢钾溶液40: 65为流动相；检测波长为230nm。理论板数按 芍药苷峰计算应不低于3000。对照品溶液的制备？取经五氧化二磷减压枯燥器中枯燥 36小时的芍药苷对 照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1ml含0.5mg的溶液，即得。供试品溶液的制备？取本品粗粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密 参加甲醇25ml，称定重量，浸泡4小时，超声处理20分钟，放冷，再称定重量, 用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法？分

2、别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10卩，注入液相色谱仪，测定，即得。本品含芍药苷C23H28O11 不得少于1.8%。解：设测得对照品溶液和供试品溶液峰面积为 A对=550000 A样=7800对照品溶液浓度 C对=0.5mg/ml器.5mg/ml 0.0071mg/mlm样C样V样 0.0071 mg/ml177.5mg供试品中芍药苷的25ml 100010 l10 l供试品中芍药苷的含量35.5%X%= 177 .5mg 100%0.5g1000药典规定药材含芍药苷C23H28O11不得少于1.8% 含量为35.5%,故供试品药材合格。二、外标两点法【含量测定】？黄芪甲苷?照高效液相色谱

3、法附录弋D测定。色谱条件与系统适用性试验 ? 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈 - 水32：68为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不 低于 4000。对照品溶液的制备 取黄芪甲苷对照品适量， 精密称定，加甲醇制成每 1ml 含 0.5mg 的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品中粉约4g,精密称定，置索氏提取器中，加甲醇40ml，冷浸过夜，再加甲醇适量，加热回流 4小时，提取液回收溶剂并浓缩 至干，残渣加水10ml，微热使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次40ml， 合并正丁醇液，用氨试液充分洗涤 2次，每次40ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干， 残渣加水5ml使

4、溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱内径为1.5cm，柱高 为12cm，以水50ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30ml洗脱，弃去洗脱液， 继用 70乙醇 80ml 洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至 5ml 量 瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。测定法 分别精密吸取对照品溶液10卩、20卩，供试品溶液20门 注入液 相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。本品按枯燥品计算，含黄芪甲苷SH68O14不得少于0.040%。解：设测得对照品溶液色谱峰面积分别为 A1=259457 =523039,测得供试品溶 液色谱峰面积 A3=2983。对照品浓度C对=0.5mg/ml，

5、对照品进样量m1 0.5mg/ml 10 l 0.005mg 5 gm2 0.5mg/ml 20 l O.OImg 10 g根据对照品峰面积和进样量可得如下列图所示方程即y=2.6e+5x-4125,得a=2.6e-4125, b=5供试品溶液峰面积 A3=2983.带入方程，得到供试品溶液进样量 m3=1420g=0.00142g供试品中黄芪甲苷含量为X%0.00142g5ml 100020 l100%8.875%4g药典中规定药材枯燥品种含黄芪甲苷C41H68O14不得少于0.040%，供试品中黄芪 甲苷含量为8.875%。故供试品药材合格二、内标法【含量测定】照气相色谱法附录W E测定。

6、色谱条件与系统适用性试验 聚乙二醇20000PEG-20M毛细管柱柱长为 30m,内径为0.53mm，膜厚度为1.0卩m柱温为160C。理论板数按樟脑峰计 算应不低于20 000。校正因子的测定 取萘适量，精密称定，加无水乙醇制成每1ml含4mg的溶液，作为内标溶液。另取樟脑对照品、薄荷脑对照品、冰片对照品各30mg、10mg、20mg,精密称定，置同一 50ml量瓶中，精密参加内标溶液5ml，加无水 乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取l仏1注入气相色谱仪，计算校正因子。测定法 精密量取本品1ml，置50ml量瓶中，精密参加内标溶 液5ml，加 无水乙醇稀释至刻度，摇匀，吸取1卩,，注入气相色谱仪，测

7、定，冰片以龙脑峰、 异龙脑峰面积之和计算，即得。本品每1ml中含樟脑C10H16O应为25.534.5mg；含薄荷脑C10H200应为 8.511.5mg，含冰片C10H18O应为 17.023.0mg。解：1 校正因子的测定设测得萘及樟脑、薄荷脑、冰片对照品溶液的峰面积分别为 A萘=180000, A樟脑=450000, A薄荷脑=500000, A冰片=520000,由题萘及各对照品溶液浓度分别为 C萘=4mg/ml ,C樟脑=0.6mg/ml,C薄荷脑=0.2mg/mlC 冰片=0.4mg/ml。据公式f可得f薄荷脑C内A对C对f樟脑1800004mg/ ml4500000.6mg /

8、ml0.17A萘/C萘A薄荷脑薄荷脑C180000/4mg / ml5000000.2mg/ml0.45f冰片1800000.22/ 4mg / ml5200000.4mg / ml2含量测定 C萘=4mg/ pl, f樟脑=0.17, f薄荷脑 =0.45, f 冰片 =0.22。设测得各 物质的峰面积及萘的峰面积分别为 A萘=180000, A樟脑=135980, A薄荷脑 =20780, A 冰片=99870A样据公式C样f ?人内丁 可得C内C樟脑A樟脑A薄荷脑A萘c萘0.171359801800004mg / ml5025.69mg / mlC薄荷脑f薄荷脑207801800004mg / ml5010.39mg / mlC冰片f冰片A冰片0.22998701800004mg / ml18.86mg / ml故