第03章药物的杂质检查

1、第三章第三章 药物的杂质检查药物的杂质检查 第一节第一节 药物的杂质及其来源药物的杂质及其来源 第二节第二节 药物的杂质检查法药物的杂质检查法 第三节第三节 一般杂质检查一般杂质检查 第四节第四节 特殊杂质检查特殊杂质检查 第一节第一节 药物的杂质及其来源药物的杂质及其来源 一、药物的纯度一、药物的纯度 指药物纯净程度，反映了药物质量的优劣，指药物纯净程度，反映了药物质量的优劣， 含有杂质是影响药物纯度的主要因素。含有杂质是影响药物纯度的主要因素。 药物中杂质超过质量标准规定，就有可能使药药物中杂质超过质量标准规定，就有可能使药 物的外观性状、物理常数发生变化，甚至影响物的外观性状、物理常数发

2、生变化，甚至影响 药物的稳定性，使活性降低、毒副作用增加。药物的稳定性，使活性降低、毒副作用增加。 杂质（杂质（impuritiesimpurities）是指：）是指： 1.1.有毒副作用的物质。有毒副作用的物质。 2.2.本身无毒副作用，但影响药物的稳定本身无毒副作用，但影响药物的稳定 性和疗效的物质。性和疗效的物质。 3.3.本身无毒副作用，也不影响药物的稳本身无毒副作用，也不影响药物的稳 定性和疗效，但影响药物的科学管理定性和疗效，但影响药物的科学管理 的物质。的物质。 二、药物中杂质的来源二、药物中杂质的来源 1.1. 生产过程中引入生产过程中引入 a)a) 原料、反应中间体及副产物原

3、料、反应中间体及副产物 b)b) 试剂、溶剂、催化剂类试剂、溶剂、催化剂类 c)c) 生产中所用金属器皿、装置以及其他生产中所用金属器皿、装置以及其他 不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质不耐酸、碱的金属工具所带来的杂质 在药物生产过程中引入杂质的途径为在药物生产过程中引入杂质的途径为 a.a. 原料不纯或部分未反应完全的原料造成原料不纯或部分未反应完全的原料造成 b.b. 合成过程中产生的中间体或副产物分离不合成过程中产生的中间体或副产物分离不 净造成净造成 c.c. 需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成需加入的各种试剂产生吸附，共沉淀生成 混晶等造成混晶等造成 d.d. 所用金属器皿及装置等引

4、入杂质所用金属器皿及装置等引入杂质 e.e. 由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分由于操作不妥，日光曝晒而使产品发生分 解引入的杂质解引入的杂质 2.2. 贮藏过程中产生贮藏过程中产生 水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、 聚合、潮解和发霉等聚合、潮解和发霉等 三、杂质的分类三、杂质的分类 1.1. 药物中的杂质按来源分为一般杂质药物中的杂质按来源分为一般杂质 和特殊杂质：和特殊杂质： 一般杂质一般杂质是指在自然界分布较广泛，在多种药是指在自然界分布较广泛，在多种药 物生产和储藏过程中容易引入的杂质。如：氯物生产和储藏过程中容易引入的杂质。如：氯 化物、硫酸

5、盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、化物、硫酸盐、铁盐、重金属、砷盐、酸、碱、 水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质其检水分、易炭化物、炽灼残渣等。一般杂质其检 查方法收载在中国药典的附录中。查方法收载在中国药典的附录中。 特殊杂质特殊杂质指某一个或某一类药物的生产或贮指某一个或某一类药物的生产或贮 藏过程中引入的杂质，这类杂质随药物的不藏过程中引入的杂质，这类杂质随药物的不 同而不同。如阿司匹林中的游离水杨酸、异同而不同。如阿司匹林中的游离水杨酸、异 烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。烟肼中的游离肼、甾体激素中的其他甾体。 特殊杂质检查方法收载在中国药典正文各药特殊杂质检查方法收载在中国药典

6、正文各药 品的质量标准中。品的质量标准中。 2.2. 药物中的杂质按毒性可分为毒性杂药物中的杂质按毒性可分为毒性杂 质和信号杂质：质和信号杂质： 重金属盐、砷盐为毒性杂质；信号杂质一重金属盐、砷盐为毒性杂质；信号杂质一 般无毒，但其含量的多少可反映出药物的般无毒，但其含量的多少可反映出药物的 纯度情况，如果药物中信号杂质含量过多，纯度情况，如果药物中信号杂质含量过多， 提示该药的生产工艺或生产控制有问题。提示该药的生产工艺或生产控制有问题。 氯化物、硫酸盐属于信号杂质。氯化物、硫酸盐属于信号杂质。 3.3. 药物中的杂质按其理化性质可分为药物中的杂质按其理化性质可分为 有机杂质、无机杂质及残留

7、溶剂：有机杂质、无机杂质及残留溶剂： 无机杂质可能来源于生产过程，如使用无机杂质可能来源于生产过程，如使用 的仪器的仪器、原料、干燥剂、过滤辅助器、原料、干燥剂、过滤辅助器、 反应试剂、重金属、无机盐、活性炭等，反应试剂、重金属、无机盐、活性炭等， 它们一般是已知的和确定的。它们一般是已知的和确定的。 四、药物的纯度与化学试剂的纯度四、药物的纯度与化学试剂的纯度 1.1.药物的纯度考虑杂质的生理作用，药药物的纯度考虑杂质的生理作用，药 品只有两个等级：合格或不合格。品只有两个等级：合格或不合格。 2.2.化学试剂有很多等级，如基准试剂、化学试剂有很多等级，如基准试剂、 优级纯（优级纯（GRGR

8、）、分析纯（）、分析纯（ARAR）、化学）、化学 纯（纯（CPCP）、色谱纯、光谱纯。）、色谱纯、光谱纯。 例例. . 临床所用药物的纯度与化学品及试剂临床所用药物的纯度与化学品及试剂 纯度的主要区别是：纯度的主要区别是： A. A. 所含杂质的生理效应不同所含杂质的生理效应不同 B. B. 所含有效成分的量不同所含有效成分的量不同 C. C. 所含杂质的绝对量不同所含杂质的绝对量不同 D. D. 化学性质及化学反应速度不同化学性质及化学反应速度不同 E. E. 所含有效成分的生理效应不同所含有效成分的生理效应不同 第二节第二节 药物的杂质检查法药物的杂质检查法 一、杂质限量一、杂质限量 指药

9、物中允许杂质存在的最大量，通常用指药物中允许杂质存在的最大量，通常用 百分之几或百万分之几（百分之几或百万分之几（parts per parts per millionmillion，ppmppm）来表示。）来表示。 100% 供试品量 杂质最大允许量 ）杂质限量（ 药物中杂质限量的控制方法一般分为两种：一药物中杂质限量的控制方法一般分为两种：一 种为限量检查法（种为限量检查法（limitlimit，testtest），另一种是），另一种是 对杂质进行定量测定。限量检查法通常不要求对杂质进行定量测定。限量检查法通常不要求 测定其准确含量，只需检查杂质是否超过限量。测定其准确含量，只需检查杂质是

10、否超过限量。 定量测定法则要求测定杂质的绝对含量定量测定法则要求测定杂质的绝对含量。 二、杂质限量检查法二、杂质限量检查法 1.1.对照法：对照法：取一定量的被检杂质标准溶取一定量的被检杂质标准溶 液和一定量的供试品溶液，液和一定量的供试品溶液，在完全相在完全相 同的条件下处理同的条件下处理，比较反应结果，以，比较反应结果，以 确定杂质含量是否超过限量。确定杂质含量是否超过限量。 100% 供试品量 标准溶液体积标准溶液浓度 ）杂质限量（ 100% S VC L）（ 2.2.灵敏度法灵敏度法：指在供试品溶液中加入一指在供试品溶液中加入一 定量的试剂，在一定反应条件下，不定量的试剂，在一定反应条

11、件下，不 得有正反应出现，从而判断供试品种得有正反应出现，从而判断供试品种 所含杂质是否符合限量规定。该法不所含杂质是否符合限量规定。该法不 需用对照品溶液对比。需用对照品溶液对比。 3.3.比较法：比较法：指取供试品一定量依法检查，指取供试品一定量依法检查， 测定特定待检杂质的参数（如吸光度测定特定待检杂质的参数（如吸光度 等）与规定的限量比较，不得更大。等）与规定的限量比较，不得更大。 三、药物中杂质限量的计算（示例）三、药物中杂质限量的计算（示例） 示例示例1 1：茶苯海明：茶苯海明* *中氯化物的检查中氯化物的检查 取本品取本品0.30g0.30g置于置于200ml200ml量瓶中，加

12、水量瓶中，加水50ml50ml、氨试液、氨试液3ml3ml和和10%10% 硝酸铵溶液硝酸铵溶液6ml6ml，置于水浴上加热，置于水浴上加热5min5min，加硝酸银试液，加硝酸银试液25ml25ml， 摇匀，再置于水浴上加热摇匀，再置于水浴上加热15min15min，并时时振摇，放冷，加水，并时时振摇，放冷，加水 稀释至刻度，摇匀，放置稀释至刻度，摇匀，放置15min15min，滤过，取滤液，滤过，取滤液25ml25ml置纳氏置纳氏 比色管中，加稀硝酸比色管中，加稀硝酸10ml10ml，加水稀释成，加水稀释成50ml50ml，摇匀，在暗处，摇匀，在暗处 放置放置5min5min，与标准氯化钠

13、溶液（，与标准氯化钠溶液（1010gClgCl/ml/ml）1.5ml1.5ml制成的制成的 对照液比较，求氯化物的限量。对照液比较，求氯化物的限量。 注：茶苯海明又名乘晕宁、晕海宁；为苯海拉明与茶碱的复合物，用注：茶苯海明又名乘晕宁、晕海宁；为苯海拉明与茶碱的复合物，用 于防治乘车、机、船引起的眩晕、恶心和呕吐，也可用于过敏性疾病。于防治乘车、机、船引起的眩晕、恶心和呕吐，也可用于过敏性疾病。 0.04% 100% 200 25 30. 0 5 . 11010 100% 6- S VC L）（ 示例示例2 2：谷氨酸钠中重金属的检查：谷氨酸钠中重金属的检查 取本品取本品1.0g1.0g，加水

14、，加水23ml23ml溶解后，加溶解后，加2ml2ml醋酸盐缓冲醋酸盐缓冲 液液 ( p H = 3 . 5 )( p H = 3 . 5 ) ， 依 法 检 查 ， 与 标 准 铅 溶 液， 依 法 检 查 ， 与 标 准 铅 溶 液 (10(10gPbgPb/ml)/ml)所呈现所呈现颜色相比较，不得更深，重金颜色相比较，不得更深，重金 属限量为百万分之十，求取标准铅溶液多少毫升？属限量为百万分之十，求取标准铅溶液多少毫升？ )ml(0.1 1010 0.11010 100% 6- 6- C SL V 示例示例3 3：肾上腺素中酮体的检查：肾上腺素中酮体的检查 取本品取本品0.20g0.2

15、0g，置于，置于100ml100ml量瓶中，加盐酸溶液量瓶中，加盐酸溶液 （9200092000）溶解并稀释至刻度，摇匀，在）溶解并稀释至刻度，摇匀，在310nm310nm处处 测定吸光度不得超过测定吸光度不得超过0.050.05，酮体的，酮体的E1cm1%为为435435，求，求 酮体的限量。酮体的限量。 )/(101.15 100 1 435 0.05 100 1 5- 1% 1cm mlg E A C 酮体 )/(100.2 100 0.2 3 mlgC 样品 0.6%100% 102.0 101.15 100%(%) 3- -5 样品 酮体 C C L 示例示例4 4：卡比马唑片：卡比

16、马唑片( (规格：规格：5mg)5mg)中甲巯咪唑的检查中甲巯咪唑的检查 取本品取本品2020片，研细，加三氯甲烷适量，研磨使卡比片，研细，加三氯甲烷适量，研磨使卡比 马唑溶液，滤过，用三氯甲烷洗涤滤器，合并滤液马唑溶液，滤过，用三氯甲烷洗涤滤器，合并滤液 与洗液，置与洗液，置10ml10ml量瓶中，加三氯甲烷稀释至刻度，量瓶中，加三氯甲烷稀释至刻度， 摇匀，作为供试品溶液；另取甲巯咪唑对照品，加摇匀，作为供试品溶液；另取甲巯咪唑对照品，加 三氯甲烷制成每三氯甲烷制成每1ml1ml中含有中含有100100 g g的溶液，作为对照的溶液，作为对照 品溶液；分别吸取上述两溶液个品溶液；分别吸取上述

17、两溶液个10 10 l l，分别点于，分别点于 同一硅胶同一硅胶G G薄层板上，以三氯甲烷薄层板上，以三氯甲烷- -丙酮（丙酮（4:14:1）为）为 展开剂，展开后，晾干，喷以稀碘化铋钾试液使显展开剂，展开后，晾干，喷以稀碘化铋钾试液使显 色。供试品溶液如显与对照品相应的杂质斑点，其色。供试品溶液如显与对照品相应的杂质斑点，其 颜色与对照品主斑点比较，不得更深，求杂质限量。颜色与对照品主斑点比较，不得更深，求杂质限量。 注：卡比马唑片又名甲亢平，属于抗甲状腺注：卡比马唑片又名甲亢平，属于抗甲状腺 1.0% 100% 10 1000205 100 100% C % 样品 杂质 ）（ C L 第三

18、节第三节 一般杂质的检查一般杂质的检查 药品检验操作标准药品检验操作标准 1.1.遵循平行操作原则遵循平行操作原则 仪器的配对性，如：纳氏比色管应配对，刻度仪器的配对性，如：纳氏比色管应配对，刻度 线高低相差不超过线高低相差不超过2mm2mm。 对照品与供试品的同步操作。对照品与供试品的同步操作。 一、一般杂质检查规则一、一般杂质检查规则 2.2.正确的取样及供试品的称量范围正确的取样及供试品的称量范围, ,如如: : 1g1g不不 超过超过2%2%，1g1g不超过不超过1%1% 3.3.正确的比色、比浊方法正确的比色、比浊方法 4.4.检查结果不符合规定或在限度边缘时应对检查结果不符合规定或

19、在限度边缘时应对 供试管和对照管各复查二份供试管和对照管各复查二份 二、氯化物检查法二、氯化物检查法 （一）原理：（一）原理：对照法对照法 白色浑浊药物：AgClAgNOCl 3 HNO 3 白色浑浊）（对照：AgClAgNO,NaCl 3 HNO 3 Vc 除另有规定外，取各药品项下规定量的供试除另有规定外，取各药品项下规定量的供试 品，加水溶解使成品，加水溶解使成25ml25ml（溶液如显碱性，可（溶液如显碱性，可 滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸10m110m1；溶；溶 液如不澄清，应滤过；置液如不澄清，应滤过；置50ml50ml纳氏比色管中，纳氏比色管中，

20、加水使成约加水使成约40m140m1，摇匀，即得供试溶液。，摇匀，即得供试溶液。 （二）检查方法：药典附（二）检查方法：药典附 录录 另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液，另取各药品项下规定量的标准氯化钠溶液， 置置50ml50ml纳氏比色管中，加稀硝酸纳氏比色管中，加稀硝酸10m110m1，加水，加水 使成使成40m140m1，摇匀，即得对照浴液。于供试溶，摇匀，即得对照浴液。于供试溶 液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液 1.0m11.0m1，用水稀释使成，用水稀释使成50m150m1，摇匀，在暗处，摇匀，在暗处 放置放置5 5分钟，同置黑色背景上，从比色管

21、上分钟，同置黑色背景上，从比色管上 方向下观察，比较，即得。方向下观察，比较，即得。 （三）测定条件（三）测定条件 1.1.标准标准NaClNaCl溶液溶液 1010 gCl/mlgCl/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含 50508080 g g的的ClCl 所显浑浊梯度明显，相当所显浑浊梯度明显，相当 于标准于标准NaClNaCl溶液溶液5 58ml8ml。 2.2.反应需在硝酸酸性条件下进行，且以反应需在硝酸酸性条件下进行，且以50ml50ml 供试溶液中含稀硝酸供试溶液中含稀硝酸10ml10ml为宜。为宜。 加速加速AgClAgCl浑浊的形成；浑浊的形成； 产生较好的乳浊；产生较好

22、的乳浊； 避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银避免弱酸银盐如碳酸银、磷酸银以及氧化银 沉淀的形成。沉淀的形成。 3.3.试剂：硝酸银试剂：硝酸银 4.4.供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液，供试液和对照液稀释后，再加硝酸银溶液， 使生成白色浑浊而不是白色沉淀使生成白色浑浊而不是白色沉淀 。 5.5.避光、暗处放置避光、暗处放置5 5分钟后比浊，因氯化银分钟后比浊，因氯化银 见光易分解。见光易分解。 6.6.比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下 观察。观察。 7.7.平行操作原则平行操作原则 （四）干扰及排除（四）干扰及排除 1.1.若供试品有色，需经处理

23、后方可检查。若供试品有色，需经处理后方可检查。 。 内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵中氯化物内消色法：倍量法，如枸橼酸铁铵中氯化物 的检查。的检查。 外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可外消色法：如高锰酸钾中氯化物的检查，可 先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。先加乙醇适量，使其还原褪色后再依法检查。 2.2.不溶于水的有机药物不溶于水的有机药物 加水振摇，过滤，取滤液进行检查。加水振摇，过滤，取滤液进行检查。 溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇溶于有机溶剂如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇 或丙酮溶解后进行检查或丙酮溶解后进行检查 1.1.药物中氯化物杂质检查，是使该杂质在药物中氯化物杂质检

24、查，是使该杂质在 酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑酸性溶液中与硝酸银作用生成氯化物浑 浊，所用的稀酸是（）浊，所用的稀酸是（） A. A. 硫酸硫酸 B. B. 硝酸硝酸 C. C. 盐酸盐酸 D. D. 醋酸醋酸 E. E. 磷酸磷酸 自测题自测题 2.2.中国药典（中国药典（20052005年版）规定，检查氯化年版）规定，检查氯化 物杂质时，一般取用标准氯化钠溶液物杂质时，一般取用标准氯化钠溶液 （1010gClgCl /ml /ml）5 58ml8ml的原因是（）的原因是（） A. A. 使检查反应完全使检查反应完全 B. B. 药物中含氯化物的量均在此范围药物中含氯化物的量均在此范围

25、 C. C. 加速反应加速反应 D. D. 所产生的浊度梯度明显所产生的浊度梯度明显 E. E. 避免干扰避免干扰 3.3.采用硝酸银试液检查氯化物时，加入硝采用硝酸银试液检查氯化物时，加入硝 酸使溶液酸化的目的是（）酸使溶液酸化的目的是（） A A加速生成氯化银浑浊反应加速生成氯化银浑浊反应 B B消除某些弱酸盐的干扰消除某些弱酸盐的干扰 C C消除碳酸盐干扰消除碳酸盐干扰 D D消除磷酸盐干扰消除磷酸盐干扰 E E避免氧化银沉淀生成避免氧化银沉淀生成 4.4.当采用比浊法检查氯化物杂质时，若药当采用比浊法检查氯化物杂质时，若药 物本身有颜色而干扰检查的话，应该选物本身有颜色而干扰检查的话，

26、应该选 用的处理方法为（）用的处理方法为（） A A内消色法内消色法 B B外消色法外消色法 C C比色法比色法 D D差示比浊法差示比浊法 E E差示可见分光法差示可见分光法 5.5.若要进行高锰酸钾中氯化物的检查，最若要进行高锰酸钾中氯化物的检查，最 佳方法是（）佳方法是（） A. A. 加入一定量氯仿提取后测定加入一定量氯仿提取后测定 B. B. 氧瓶燃烧氧瓶燃烧 C. C. 倍量法倍量法 D. D. 加入一定量乙醇加入一定量乙醇 E. E. 以上都不对以上都不对 6.6.下列哪些条件为药物中氯化物检查的必下列哪些条件为药物中氯化物检查的必 要条件（）要条件（） A. A. 所用比色管需

27、配套所用比色管需配套 B. B. 稀硝酸酸性下稀硝酸酸性下(10ml/50ml)(10ml/50ml) C. C. 避光放置避光放置5 5分钟分钟 D. D. 用硝酸银标准溶液做对照用硝酸银标准溶液做对照 E. E. 在白色背景下观察在白色背景下观察 三、硫酸盐检查法三、硫酸盐检查法 （一）原理：（一）原理：对照法对照法 白色浑色BaSOBaClSO药物 4 HCl 2 2 4 ： 白色浑色BaSOBaCl)V、(cSOK对照： 4 HCl 242 （二）测定条件（二）测定条件 1.1.标准标准K K2 2SOSO4 4溶液溶液0.1mg/ml0.1mg/ml，50ml50ml溶液中含溶液中含

28、 0.10.10.5mg0.5mg的所显浑浊梯度明显，相当于的所显浑浊梯度明显，相当于 标准标准K K2 2SOSO4 4溶液溶液1 15ml5ml。 2.2.反应需在盐酸酸性条件下进行，且以反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml50ml 供试溶液中含稀盐酸供试溶液中含稀盐酸2ml2ml为宜。为宜。 3.3.试剂：氯化钡试剂：氯化钡 4.4.供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液，供试液和对照液稀释后，再加氯化钡溶液， 使生成白色浑浊而不是白色沉淀。使生成白色浑浊而不是白色沉淀。 5. 比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下比浊方法：同置于黑色背景上，自上向下 观察。观察。 药物中硫酸盐检查时，

29、所用标准对照液是（）药物中硫酸盐检查时，所用标准对照液是（） A. A. 标准氯化钡标准氯化钡B. B. 标准醋酸铅溶液标准醋酸铅溶液 C. C. 标准硝酸银溶液标准硝酸银溶液D. D. 标准硫酸钾溶液标准硫酸钾溶液 E. E. 以上都不对以上都不对 自测题自测题 若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。若供试品有色，也可用内消色法即倍量法处理。 （三）干扰及排除（三）干扰及排除 四、铁盐检查法四、铁盐检查法( (硫氰酸盐法和巯基醋酸法硫氰酸盐法和巯基醋酸法) ) 1. 1. 原理原理: : 对照法对照法 （一）硫氰酸盐法（一）硫氰酸盐法 红色SCNFe6SCN药物 3 6 HCl 3o2

30、3 FeFe Fe ： 红色、对照： 3 6 HCl3 SCNFe6SCNFeVc 2. 2. 检查方法检查方法（药典附录）药典附录） 除另有规定外，取各药品项下规定量的供试除另有规定外，取各药品项下规定量的供试 品，加水溶解使成品，加水溶解使成25ml25ml，移置，移置50ml50ml纳氏比色纳氏比色 管中，加稀盐酸管中，加稀盐酸2ml2ml与过硫酸铵与过硫酸铵50mg50mg，用水，用水 稀释使成稀释使成35m135m1后，加后，加30%30%硫氰酸铵溶液硫氰酸铵溶液3ml3ml， 再加水适量稀释成再加水适量稀释成50ml50ml，摇匀；如显色，立，摇匀；如显色，立 即与标准铁溶液一定量

31、制成的对照溶液即与标准铁溶液一定量制成的对照溶液比较，比较， 即得。即得。 对照溶液的制备对照溶液的制备 取各药品项下规定量的标准铁溶液，置取各药品项下规定量的标准铁溶液，置50ml50ml 纳氏比色管中，加水使成纳氏比色管中，加水使成25ml25ml，加稀盐酸，加稀盐酸 2ml2ml与过硫酸铵与过硫酸铵50mg50mg，用水稀释使成，用水稀释使成35m135m1后，后， 加加30%30%硫氰酸铵溶液硫氰酸铵溶液3ml3ml，再加水适量稀释成，再加水适量稀释成 50ml50ml，摇匀。，摇匀。 3. 3. 测定条件测定条件 用用FeNHFeNH4 4(SO(SO4 4) )2 212H12H2

32、 2O O（硫酸铁铵）配制标准（硫酸铁铵）配制标准 铁贮备液（加入硫酸防止铁贮备液（加入硫酸防止FeFe3+ 3+的水解），标 的水解），标 准铁溶液临用前稀释而成，标准铁溶液准铁溶液临用前稀释而成，标准铁溶液1010 g g FeFe3+ 3+/ml /ml，50ml50ml溶液中含溶液中含10105050 g g的的FeFe3+ 3+显色 显色 梯度明显，一般取标准铁溶液梯度明显，一般取标准铁溶液1.01.05.0ml 5.0ml 反应需在盐酸酸性条件下进行，且以反应需在盐酸酸性条件下进行，且以50ml50ml供供 试溶液中含稀盐酸试溶液中含稀盐酸2ml2ml为宜。为宜。 试剂：硫氰酸铵。

33、加过量硫氰酸铵，使反应试剂：硫氰酸铵。加过量硫氰酸铵，使反应 向正反应方向进行向正反应方向进行 检查检查FeFe2+ 2+和 和FeFe3+ 3+。铁盐检查时，加氧化剂氧化 。铁盐检查时，加氧化剂氧化 FeFe2+ 2+为 为FeFe3+ 3+。加过硫酸铵可氧化 。加过硫酸铵可氧化FeFe2+ 2+为 为FeFe3+ 3+， ， 同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。同时可防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色。 加硝酸后加热也可氧化加硝酸后加热也可氧化FeFe2+ 2+为 为FeFe3+ 3+ 比色方法：同置于白色背景上，自上向下观比色方法：同置于白色背景上，自上向下观 察。察。 4. 4. 干

34、扰及排除干扰及排除 为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一为了提高灵敏度或供试管与对照管色调不一 致时，可用正丁醇提取后，分取正丁醇层比致时，可用正丁醇提取后，分取正丁醇层比 色。色。 具环状结构的有机药物，需经具环状结构的有机药物，需经700700800800炽炽 灼破坏处理后再依法检查。灼破坏处理后再依法检查。 （二）巯基醋酸法（二）巯基醋酸法 原理：原理：对照法对照法 本法灵敏度较高，但试剂较贵！ 红色 药物： 巯基醋酸 巯基醋酸枸橼酸 OHNH 22%20 Fe Fe 23 3 2Fe ml 红色 对照： 巯基醋酸 巯基醋酸枸橼酸 OHNH 22%203 23 FeFe ml 1.1.

35、中国药典（中国药典（20052005年版）规定铁盐的检查年版）规定铁盐的检查 方法为（）方法为（） A. A. 硫氰酸盐法硫氰酸盐法 B. B. 巯基醋酸法巯基醋酸法 C. C. 普鲁士蓝法普鲁士蓝法 D. D. 邻二氮菲法邻二氮菲法 E. E. 水杨酸显色法水杨酸显色法 自测题自测题 2.2.中国药典（中国药典（20052005年版）规定，硫氰酸铵年版）规定，硫氰酸铵 法检查铁盐时，加入过硫酸铵的目的是法检查铁盐时，加入过硫酸铵的目的是 （）（） A.A.使药物中铁盐都转变为使药物中铁盐都转变为FeFe3+ 3+ B.B.防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色防止光线使硫氰酸铁还原或分解褪色 C.

36、C.使产生的红色产物颜色更深使产生的红色产物颜色更深 D.D.防止干扰防止干扰 E.E.便于观察、比较便于观察、比较 3.3.中国药典收载的铁盐检查，主要是检中国药典收载的铁盐检查，主要是检 查（）查（） A.A.FeFe B.B.FeFe2+ 2+ C.C.FeFe3+ 3+ D.D.FeFe2+ 2+和 和FeFe3+ 3+ E.E.以上都不对以上都不对 五、重金属检查法五、重金属检查法（以铅为代表）（以铅为代表） （毒性杂质，须严控）（毒性杂质，须严控） 中国药典（中国药典（20052005年版）共收载四法：年版）共收载四法： 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法 炽灼残渣法炽灼残渣法 硫化钠法硫化

37、钠法 微孔滤膜法微孔滤膜法 （一）第一法（一）第一法 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法 1. 1. 原理：原理：对照法对照法 适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物适用于溶于水、稀酸和乙醇的药物 SHCONHCHOHCSNHCH 223 pH3.5 223 黄色棕黑色药物：PbSSHPb pH3.5 2 2 黄色棕黑色、对照：PbSSH)Pb(NO pH3.5 223 Vc 2. 2. 测定条件测定条件 用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防止用硝酸铅配制标准铅贮备液（加硝酸防止 PbPb2+ 2+水解），标准铅溶液临用前稀释而成， 水解），标准铅溶液临用前稀释而成， 标准硝酸铅溶液标准硝酸铅溶液1010 g P

38、bg Pb2+ 2+/ml /ml，适宜比色，适宜比色 范围为范围为27ml27ml溶液中含溶液中含10102020 g g的的PbPb2+ 2+。 。 本法用本法用2ml pH=3.52ml pH=3.5的醋酸盐缓冲液控制溶的醋酸盐缓冲液控制溶 液液pHpH值为值为3 33.53.5。 显色剂：从显色剂：从Ch.PCh.P（19901990）开始改用硫代乙）开始改用硫代乙 酰胺做显色剂。酰胺做显色剂。 供试品如有色，需经处理后方可检查。供试品如有色，需经处理后方可检查。 a)a) 外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无外消色法：在对照管中加稀焦糖溶液或其他无 干扰的有色溶液。干扰的有色溶液

39、。 b)b) 内消色法。内消色法。 c)c) 改用第四法，微孔滤膜过滤法。改用第四法，微孔滤膜过滤法。 若供试品中有微量若供试品中有微量FeFe3+ 3+存在，会氧化硫化氢 存在，会氧化硫化氢 生成单质硫，干扰比色，加入抗坏血酸或生成单质硫，干扰比色，加入抗坏血酸或 盐酸羟胺（盐酸羟胺（0.50.51.0g1.0g）还原）还原FeFe3+ 3+为 为FeFe2+ 2+，可 ，可 消除干扰。消除干扰。 3. 3. 干扰及排除干扰及排除 若供试品为铁盐，若供试品为铁盐，FeFe 3 +3 + 在盐酸中生成在盐酸中生成 HFeClHFeCl ，用乙醚提取除去，剩余微量铁在，用乙醚提取除去，剩余微量铁

40、在 氨碱性溶液中，加氨碱性溶液中，加KCNKCN掩蔽，然后用第三法掩蔽，然后用第三法 检查。检查。 若药物本身能生成不溶性硫化物时，可加若药物本身能生成不溶性硫化物时，可加 入掩蔽剂消除干扰。如入掩蔽剂消除干扰。如ZnSOZnSO4 4中重金属的检中重金属的检 查，要在碱性下加查，要在碱性下加KCNKCN掩蔽掩蔽ZnZn2+ 2+后，依第三 后，依第三 法检查。法检查。 2 6 （二）第二法（二）第二法 炽灼残渣法炽灼残渣法 适用于含芳环、杂环以及不溶于水、 稀酸、乙醇及碱的有机药物。 500500600600炽灼后的残渣，经处理后，炽灼后的残渣，经处理后， 依一法检查。依一法检查。 1. 1

41、. 原理：原理：对照法对照法 2. 2. 操作方法操作方法 依一法检查 氯化物 残渣置坩埚中样品： 缓冲液 左右调节至、 、炽灼残渣 ml S 0 . 25 . 3pH pH7.0OHNHOHHCl HNO600500 232 3 依一法检查 对照：空坩埚 缓冲液 溶液）（标准、 、 ml0 . 25 . 3pH NOPbOHOHNH HClHNO 23223 3 含钠盐及氟的有机药物应用铂坩埚、石含钠盐及氟的有机药物应用铂坩埚、石 英坩埚或硬质玻璃蒸发皿（因可腐蚀瓷英坩埚或硬质玻璃蒸发皿（因可腐蚀瓷 坩埚，带入大量重金属）。坩埚，带入大量重金属）。 （三）第三法（三）第三法 硫化钠法硫化钠法

42、 适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中适用于溶于碱而不溶于稀酸或在稀酸中 生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。生成沉淀的药物。如磺胺类、巴比妥类。 1. 1. 原理原理 对照法对照法 黄色棕黑色药物：PbSSNaPb NaOH 2 2 黄色棕黑色、对照：PbSSNa)Pb(NO NaOH 223 Vc 2. 2. 测定条件测定条件 NaOHNaOH 碱性条件下碱性条件下 显色剂：硫化钠显色剂：硫化钠 （四）第四法（四）第四法 微孔滤膜法微孔滤膜法 依一法检查，结果微孔滤膜过滤后比较色依一法检查，结果微孔滤膜过滤后比较色 斑。适用于含斑。适用于含2 25 5 g g重金属杂质及有色供重金属杂质及有

43、色供 试液的检查。试液的检查。 1.1.重金属检查中，加入硫代乙酰胺时溶重金属检查中，加入硫代乙酰胺时溶 液控制最佳的液控制最佳的pHpH值是（）值是（） A. 1.5 A. 1.5 B. 3.5 B. 3.5 C C7.57.5 D. 9.5 D. 9.5 E. 11.5E. 11.5 自测题自测题 2.2.微孔滤膜法是用来检查（）微孔滤膜法是用来检查（） A.A. 氯化物氯化物 B. B. 砷盐砷盐 C. C. 重金属重金属 D. D. 硫化物硫化物 E. E. 氰化物氰化物 3.3.中国药典中国药典(2005(2005年版年版) )重金属检查法中，重金属检查法中， 所使用的显色剂是（）所

44、使用的显色剂是（） A.A.硫化氢试液硫化氢试液 B.B.硫代乙酰胺试液硫代乙酰胺试液 C.C.硫化钠试液硫化钠试液 D.D.氰化钾试液氰化钾试液 E.E.硫氰酸铵试液硫氰酸铵试液 4.4.现有一药物为苯巴比妥，欲进行重金属现有一药物为苯巴比妥，欲进行重金属 检查，应采用检查，应采用中国药典中国药典上收载的重上收载的重 金属检查的哪种方法（）金属检查的哪种方法（） A. A. 硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法 B. B. 炽灼残渣法炽灼残渣法 C. C. 硫化钠法硫化钠法 D. D. 微孔滤膜法微孔滤膜法 E. E. 以上都不对以上都不对 5.5.下面哪些方法为下面哪些方法为中国药典中国药典收载的收载

45、的 重金属检查方法（）重金属检查方法（） A.A.500500600600炽灼残渣后炽灼残渣后, ,按一法操作按一法操作 B.B.pH3pH33.53.5条件下，加入硫化氢试液条件下，加入硫化氢试液 C.C.碱性下，加入硫化钠试液碱性下，加入硫化钠试液 D.D.按一法操作，结果用微孔滤膜过滤按一法操作，结果用微孔滤膜过滤 后观察色斑后观察色斑 E.E.以上都对以上都对 六、砷盐检查法六、砷盐检查法（毒性杂质，须严控）（毒性杂质，须严控） （一）古蔡法（一）古蔡法(ChP:2005(ChP:2005） 遇遇HgBrHgBr2 2试纸生成黄色棕色的砷斑，与试纸生成黄色棕色的砷斑，与2ml2ml 标

46、准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较。标准砷溶液在相同条件下生成的砷斑比较。 1. 1. 原理：原理：对照法对照法 3 3 3 2 AsHAsO HHClZn 2. 2. 操作方法操作方法 标准砷斑用标准砷斑用2ml2ml标准标准 砷溶液制备。砷溶液制备。 供试品需经有机破坏，供试品需经有机破坏， 则标准砷溶液应平行则标准砷溶液应平行 操作。操作。 滴加滴加KIKI试液试液5ml5ml和和 酸性氯化亚锡酸性氯化亚锡5 5滴滴 醋酸铅棉花醋酸铅棉花 溴化汞试纸溴化汞试纸 3. 3. 测定条件测定条件 标准砷溶液临用新配，标准砷溶液临用新配，1 1 gAs/mlgAs/ml。 醋酸铅棉花的作用是消除

47、锌粒及供试品中少醋酸铅棉花的作用是消除锌粒及供试品中少 量硫化物的干扰，醋酸铅棉花量硫化物的干扰，醋酸铅棉花60mg60mg装管高度装管高度 606080mm80mm。 锌粒应无砷锌粒应无砷 酸为反应物，酸量应足够（所以加浓盐酸酸为反应物，酸量应足够（所以加浓盐酸 5ml5ml）。）。 砷斑不稳定，应立即观察。砷斑不稳定，应立即观察。 酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是：酸性氯化亚锡及碘化钾的作用是： a.a. 还原还原AsAs5+ 5+为 为AsAs3+ 3+，加快反应速度； ，加快反应速度； b.b. 碘化钾被氧化生成的碘化钾被氧化生成的I I2 2又可被氯化亚锡还原为又可被氯化亚锡还原为 I

48、I- -，I I- -与反应中生成的与反应中生成的ZnZn2+ 2+能形成稳定的配位离 能形成稳定的配位离 子，有利于生成砷化氢的反应不断进行；子，有利于生成砷化氢的反应不断进行； c.c. 氯化亚锡与锌作用，在锌表面形成锌锡齐，使氯化亚锡与锌作用，在锌表面形成锌锡齐，使 氢气均匀而连续地发生；氢气均匀而连续地发生； d.d. 可抑制微量可抑制微量SbSb的干扰，在实验条件下，的干扰，在实验条件下，100 100 gSbgSb存在不干扰。存在不干扰。 4. 4. 干扰及排除干扰及排除 供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸供试品若为硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸 盐时，加盐时，加HNOHNO3 3，

49、使氧化成硫酸盐，以，使氧化成硫酸盐，以 除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。除去干扰，如硫代硫酸钠中砷盐的检查。 供试品若为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试供试品若为铁盐，需先加酸性氯化亚锡试 液，将液，将FeFe3+ 3+还原为 还原为FeFe2+ 2+。如枸橼酸铁铵中砷 。如枸橼酸铁铵中砷 盐的检查。盐的检查。 具环状结构的有机药物，要先行有机破坏具环状结构的有机药物，要先行有机破坏 后再进行检查后再进行检查。常用的有机破坏方法：常用的有机破坏方法： a.a. 碱破坏法：石灰法、无水碳酸钠碱融法碱破坏法：石灰法、无水碳酸钠碱融法 b.b. 酸破坏法：如葡萄糖中砷盐的检查酸破坏法：如葡萄糖中砷盐的

50、检查 本法适用于不含本法适用于不含SbSb或含或含SbSb量小于量小于100100 g g的供的供 试品。试品。 （二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（二）二乙基二硫代氨基甲酸银法（Ag-DDCAg-DDC） 1. 1. 原理：原理：对照法对照法 3 3 3 2 AsHAsO HHClZn 3HDDC6Ag(DDCAs 6Ag(DDC)AsH 3 3 红色） 砷化氢与砷化氢与Ag-DDCAg-DDC溶液作用，还原溶液作用，还原Ag-DDCAg-DDC为红为红 色胶态银，直接比色或于色胶态银，直接比色或于510nm510nm波长处测定波长处测定 吸收度，进行比较。吸收度，进行比较。 AgAg（DDCD

51、DC）的结构）的结构 C2H5 C2H5 NC S S Ag 2.2.方法方法 取一定量的供试品溶液（或标准取一定量的供试品溶液（或标准 砷溶液砷溶液5.0ml5.0ml）置于瓶）置于瓶A A中，加盐中，加盐 酸酸5ml5ml与水与水21ml21ml，再加碘化钾试，再加碘化钾试 液液5ml5ml与酸性氯化锡试液与酸性氯化锡试液5 5滴，在滴，在 室温放置室温放置10min10min后，加锌粒后，加锌粒2g2g， 立即将导气管立即将导气管C C与与A A瓶密塞，使生瓶密塞，使生 成的砷化氢气体导入盛有成的砷化氢气体导入盛有AgAg （DDCDDC）溶液）溶液5.0ml5.0ml的的D D管中，并

52、管中，并 将将A A瓶置瓶置25254040o oC C水浴中，反应水浴中，反应 45min45min后，取出后，取出D D管，添加三氯甲管，添加三氯甲 烷至刻度，混匀。将供试溶液烷至刻度，混匀。将供试溶液D D 管和对照溶液管和对照溶液D D管同置白色背景管同置白色背景 上，自管上方向下观察比色。上，自管上方向下观察比色。 当当AsAs浓度为浓度为11g g1010g/40mlg/40ml范围内，线范围内，线 性关系良好，显色在性关系良好，显色在2 2小时稳定，重现性好，小时稳定，重现性好， 并可测得砷盐含量并可测得砷盐含量( (测测510nm510nm处吸光度处吸光度) )。 可用于砷盐的

53、限量检查，也可用作微量砷可用于砷盐的限量检查，也可用作微量砷 盐的含量测定。盐的含量测定。 用有机碱吸收反应产生的用有机碱吸收反应产生的HDDCHDDC有利于反应有利于反应 的进行（的进行（ChP-2005ChP-2005：用三乙胺）。：用三乙胺）。 本法适用于含本法适用于含SbSb量小于量小于500500 g g的供试品。的供试品。 3.3.注意事项注意事项 1.1.在药物的杂质检查中，其限量须严格在药物的杂质检查中，其限量须严格 控制的是（）。控制的是（）。 A. A. 氯化物氯化物 B. B. 硫酸盐硫酸盐 C. C. 醋酸盐醋酸盐 D. D. 砷盐砷盐 E. E. 淀粉淀粉 自测题自测

54、题 2.2.在用古蔡法检查砷盐时，导气管中塞入在用古蔡法检查砷盐时，导气管中塞入 醋酸铅棉花的目的是（）。醋酸铅棉花的目的是（）。 A. A. 除去除去I I2 2 B. B. 除去除去AsHAsH3 3 C. C. 除去除去H H2 2S S D. D. 除去除去HBrHBr E. E. 除去除去SbHSbH3 3 3.3.古蔡氏法中，古蔡氏法中，SnC1SnC12 2的作用有（）。的作用有（）。 A. A. 使使AsAs5+ 5+ AsAs3+ 3+ B. B. 除去除去H H2 2S S C. C. 除去除去I I2 2 D. D. 组成锌锡齐组成锌锡齐 E. E. 除去其它杂质除去其它

55、杂质 4.4.AgAg- -DDCDDC法检查砷盐的原理为：砷化氢与法检查砷盐的原理为：砷化氢与 AgAg- -DDCDDC吡啶作用，生成的物质是（）。吡啶作用，生成的物质是（）。 A. A. 砷斑砷斑 B. B. 锑斑锑斑 C. C. 胶态砷胶态砷 D. D. 三氧化二砷三氧化二砷 E. E. 胶态银胶态银 5.5.中国药典收载的古蔡法检查砷盐的基本中国药典收载的古蔡法检查砷盐的基本 原理是（）。原理是（）。 A.A.与锌、酸作用生成与锌、酸作用生成H H2 2S S气体气体 B.B.与锌、酸作用生成与锌、酸作用生成AsHAsH3 3气体气体 C.C.产生的气体遇溴化汞试纸产生砷斑产生的气体

56、遇溴化汞试纸产生砷斑 D.D.比较供试品砷斑与标准品砷斑的面积比较供试品砷斑与标准品砷斑的面积 大小大小 E.E.比较供试品砷斑与标准品砷斑的颜色比较供试品砷斑与标准品砷斑的颜色 强度强度 6.6.用古蔡氏法检查下列药物中的砷盐时，用古蔡氏法检查下列药物中的砷盐时， 排除下列干扰的方法为：硫化物（排除下列干扰的方法为：硫化物（ ）、）、 亚硫酸盐（亚硫酸盐（ ）、硫代硫酸盐（）、硫代硫酸盐（ ）、高）、高 铁盐（铁盐（ ）。）。 A.A.先用硝酸氧化先用硝酸氧化 B.B.先加酸性氯化亚锑还原先加酸性氯化亚锑还原 C.C.先加氰化钾掩蔽先加氰化钾掩蔽 D.D.先加草酸生成沉淀先加草酸生成沉淀 A

57、 AA B 7.7.AgAg- -DDCDDC法检查砷盐时，所产生的红色溶法检查砷盐时，所产生的红色溶 液为（）。液为（）。 A.A.HDDCHDDC吡啶溶液吡啶溶液 B.B.AgAg吡啶溶液吡啶溶液 C.C.AgAg的胶态溶液的胶态溶液 D.D.Ag(DDCAg(DDC) )溶液溶液 E.E.AsAgAsAg3 3溶液溶液 8.8.葡萄糖中砷盐的检查，需要的试剂应有葡萄糖中砷盐的检查，需要的试剂应有 （）。（）。 A.A.PbPb2+ 2+标准液 标准液 B.B.SnClSnCl2 2试液试液 C.C.KIKI试液试液 D.D.ZnZn E.E.醋酸铅棉花醋酸铅棉花 9.9.古蔡氏法检查所用

58、的溶液是古蔡氏法检查所用的溶液是( ( ) )。 A.A.强碱性溶液强碱性溶液 B.B.强酸性溶液强酸性溶液 C.C.含稀盐酸含稀盐酸10ml/50ml10ml/50ml溶液溶液 D.D.含稀硝酸含稀硝酸10ml/50ml10ml/50ml溶液溶液 E.E.含强氧化剂含强氧化剂( (硝酸或过硫酸铵硝酸或过硫酸铵) )溶液溶液 10.10.下列杂质检查所用试液为：药物中铁盐检下列杂质检查所用试液为：药物中铁盐检 查（查（ ）、磺胺嘧啶中重金属检查（）、磺胺嘧啶中重金属检查（ ）、药）、药 物中硫酸盐检查（物中硫酸盐检查（ ）、葡萄糖中重金属检）、葡萄糖中重金属检 查（查（ ）、药物中氯化物检查（

59、）、药物中氯化物检查（ ）。）。 A.A.硝酸银试液硝酸银试液 B.B.氯化钡试液氯化钡试液 C.C.硫代乙酰胺试液硫代乙酰胺试液 D.D.硫化钠试液硫化钠试液 E.E.硫氰酸盐试液硫氰酸盐试液 A E C B D 11.11.下列杂质检查中所用的酸分别是：氯下列杂质检查中所用的酸分别是：氯 化物检查法（化物检查法（ ）、硫酸盐检查法（）、硫酸盐检查法（ ）、）、 铁盐检查法（铁盐检查法（ ）、重金属检查法（）、重金属检查法（ ） 和砷盐检查法（和砷盐检查法（ ）。）。 A. A. 稀硝酸稀硝酸 B. B. 稀盐酸稀盐酸 C. C. 硝酸硝酸 D. D. 盐酸盐酸 E. E. 醋酸盐缓冲液醋酸

60、盐缓冲液 A E B D B 检查不含金属的有机药物或挥发性无机药物检查不含金属的有机药物或挥发性无机药物 中混入的无机杂质中混入的无机杂质( (金属氧化物或无机盐类金属氧化物或无机盐类) )。 七、炽灼残渣检查法七、炽灼残渣检查法 （控制非挥发性无机杂质）（控制非挥发性无机杂质） 1.1.原理原理 样品炭化后样品炭化后 + H+ H 2 2 SOSO 4 4 湿润湿润700700 800800炽灼至恒重炽灼至恒重炽灼残渣（硫酸灰炽灼残渣（硫酸灰 分）分） 限量一般为限量一般为0.1%0.1%0.2% 0.2% 2. 2. 操作方法操作方法 %100(%) 供试品重 空坩埚重残渣及坩埚重 炽灼