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1、实验一:牛乳新鲜度的检测、实验目的:1、掌握吉尔涅尔度的概念及测定方法。2、掌握酒精实验的原理与测定方法。3、掌握煮沸实验的测定方法。二、实验原理及方法:(一)酸碱滴定法1原理:牛乳的酸度一般是以中和 100毫升牛乳所消耗的 0.1N 氢氧化钠的毫升数来 表示,称为 T,此为滴定酸度,简称为酸度,也可以乳酸的百分含量为牛乳的 酸度。RCOOH+NAOHRCOONA+H2O此中和反应用酚酞作指示剂,它在 PH 约 8.2 时,就确定了游离酸中的终点。无 色的酚酞与碱作用时, 生成酚酞盐, 同时失去一分子水, 引起醌型重排而呈现红 色,反应式如下。2、所用仪器及试剂药品1)0.1mol/L NaO
2、H 标准溶液(保护此溶液,防止 CO2渗透)2)5g/L 酚酞乙醇溶液。(3)碱式滴定管(4)150mL 锥形瓶3、操作方法(1)消毒乳、灭菌乳、新鲜生乳吸取 10.00mL 牛乳,置于 250mL 三角瓶中,加入 20mL?水,再加入 0.5mL5g/L 的酚酞乙醇溶液, 小心摇匀,用 0.1mol/L?氢氧化钠标准溶液滴至微红色, 在 30s 内不褪色为止。此时溶液 pH 值为 8.30,整个滴定过程应在 45s 内完成。记录所 用 NaOH 溶液的毫升数,精确至 0.05mL ,消耗 0.1mol/L 氢氧化钠标准溶液的毫 升数乘以 10,即得酸度 (oT)。滴定酸度( T) =用去碱液
3、毫升数 碱液的实际浓度(2)酸奶称取 5.00g 已搅拌均匀的试样,置于 150mL 锥形瓶中,加 40mL 新煮沸放冷至 40的水,混匀,然后加入 5滴酚酞指示剂, 用氢氧化钠标准溶液滴至微红色在 30s 内不褪色为终点。消耗的氢氧化钠标准滴定溶液毫升数乘以20,即为酸度(oT)。(3)全脂乳粉称取 4.00g试样于 50mL 烧杯中,用 96mL 新煮沸冷却后的蒸馏水水分数次将试 样溶解并移入 250mL 锥形瓶中,加数滴酚酞指示液,混匀。用氢氧化钠标准溶 液滴定溶液( 0.1mol/L)滴定至初显粉红色并在 30s 内不褪色为终点,记录消耗 氢氧化钠标准溶液的体积。X V c 12(4-
4、1-1 )m式中:X试样的酸度,单位为酸度( oT);V试样消耗氢氧化钠标准溶液的体积,单位为毫升( mL); C氢氧化钠标准滴定溶液( 0.1mol/L )的实际浓度,单位为摩尔每升( mol/L );试样质量,单位为克( g);12 12g 干燥乳粉相当鲜乳 100mL。(4) 淡炼乳吸取 10.00mL试样液,置于 250mL 锥形瓶中,加 60mL 新煮沸放冷的水及 数滴酚酞指示液,以下按灭菌乳操作。(5) 甜炼乳称取 10.00g试样,加 65mL 新煮沸放冷的水溶解于 250mL 锥形瓶中,加数 滴酚酞指示液,以下按灭菌乳操作。(6) 奶油准确称取 10g 试样,加 30mL 中性
5、乙醇 -乙醚混合液,混匀,加 3 滴酚酞指 示液,以氢氧化钠标准溶液( 0.1mol/L )滴至刚显粉红色, 30s内不褪色为终点, 消耗的氢氧化钠标准溶液滴定溶液 (0.1000mol/L)毫升数乘以 10 即为酸度(oT)。4、注意事项(1) 使用的 0.1mol/LNaOH ,应经精密标定后使用,其中不应含有 Na2CO3,故所 用蒸馏水应先经煮沸冷却,以驱除 CO2。(2) 温度对乳的 pH 有影响,因乳中具有微酸性物质,离解程度与温度有关,温 度低时滴定酸度偏低。最好在 205时滴定为宜。(3) 滴定速度越慢,则消耗碱液越多,误差大,最好在 2030s 完成滴定。(二) 酒精试验(生
6、鲜牛乳)1、试验原理:新鲜乳中的酪蛋白微粒, 由于其表面带有相同的电荷 (为负电荷) 和具有水 合作用,故以稳定的胶粒悬浮状态分散于乳中。 要想使其从乳中沉淀出来, 需有 两个条件: 一是除去胶粒所带的电荷,二是破坏胶粒周围的结合水层。当乳的 新鲜度下降、酸度增高时,酪蛋白所带的电荷就要发生变化。 当pH 达 4.6时(即 酪蛋白的等电点),酪蛋白胶粒便形成数量相等的正负电荷,失去排斥力量,胶 粒极易聚合成大胶粒而被沉淀出来。此外,加入强亲水物质如酒精、丙酮等,能 夺取酪蛋白胶粒表面的结合水层, 也使胶粒易被沉淀出来。 酒精试验就是借助于 不同酸度的乳加入酒精后, 酪蛋白凝结的情况不同, 从而
7、判断乳的新鲜程度。 在 酒精试验时,乳的酸度越高,酒精浓度越大,乳的凝絮现象越易发生。2、所用仪器及试剂药品(1)=68%乙醇(调至中性)(2)=70%乙醇(调至中性)(3)=72%乙醇(调至中性)(4)试管3、操作方法于试管内用等量的乙醇(中性)与牛乳混合(一般用 12mL?等量混合), 振摇后不出现絮片的牛乳符合表 4-1-1 酸度标准,出现絮片的牛乳为酒精试验阳 性乳,表示其酸度较高。试验温度以 20为标准,不同温度需进行校正。根据 收乳标准,采用 68、 70和 72的酒精。4、结果对照表 4-1-1表 4-1-1酒精浓度出现絮状68%20 oT70%19 oT72%18 oT5、注意事项:(1) 非脂乳固体较高的水牛乳、牦牛乳和羊乳,酒精试验呈阳性反应,但热稳 定性不一定差, 乳不一定不新鲜。 因此对这些乳进行酒精试验, 应选用低于 68 % 的酒精溶液。由于地区不同,尚无统一标准。(2)牛乳冰冻也会形成酒精阳性乳,但这种乳热稳定性较高,可作为乳制品原 料。( 3) 酒精要纯, pH 必须调到中性,使用时间超过 510d 必须重新调节。(三)煮沸试验(生鲜牛乳)1、试验原理:正常牛乳的酸度是 1618 oT,牛乳的酸度越高,热稳定性越差,当酸度大于 26 oT 时,牛乳
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