临床微生物学检验理论课：20需氧革兰阳性杆菌、棒状杆菌、厌氧菌检验

1、1 需氧革兰阳性杆菌需氧革兰阳性杆菌 (Bacillus) 2 生长特点生长特点 n 种类繁多，分布广泛种类繁多，分布广泛 n 多数为正常菌群，有些细菌具有多数为正常菌群，有些细菌具有 高度致病性高度致病性 3 主要内容主要内容 n 炭疽芽胞杆菌 n 蜡样芽胞杆菌 n 产单核细胞李斯特菌 n 红斑丹毒丝菌 n 阴道加特纳菌 4 炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌 ( (B.anthracisB.anthracis) ) 5 炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌( (B.anthracisB.anthracis) ) n人畜共患病，常在牧区爆发流行人畜共患病，常在牧区爆发流行 n宿主广泛，传播方式多样（接触、摄宿主广

2、泛，传播方式多样（接触、摄 食或气溶胶），可散发流行食或气溶胶），可散发流行 n芽孢抵抗力极强，致病力最强，致死芽孢抵抗力极强，致病力最强，致死 率高率高 n一旦患病可获持久免疫力一旦患病可获持久免疫力 n烈性传染病，世界五大兽疫之一，烈性传染病，世界五大兽疫之一，一一 旦发现启动报疫程序旦发现启动报疫程序 6 生物学性状生物学性状形态染色形态染色 n革兰阳性大杆菌，革兰阳性大杆菌， 两端截平两端截平 n有芽胞、无鞭毛、有芽胞、无鞭毛、 可有荚膜（有毒株）可有荚膜（有毒株） n培养后形成长链、培养后形成长链、 呈竹节状排列呈竹节状排列 7 炭疽芽胞杆菌炭疽芽胞杆菌 8 生物学性状生物学性状培养

3、特性培养特性 n需氧或兼性厌氧，最适温度需氧或兼性厌氧，最适温度303535 n普琼平板：灰白色、扁平、干燥的粗糙型菌普琼平板：灰白色、扁平、干燥的粗糙型菌 落；卷发状（低倍镜下）落；卷发状（低倍镜下） nBMPBMP：不溶血或轻微溶血（可与其他需氧芽：不溶血或轻微溶血（可与其他需氧芽 胞杆菌区别）胞杆菌区别） n肉汤培养基：絮状沉淀肉汤培养基：絮状沉淀 n明胶培养基中明胶培养基中3737、24h24h，明胶表面液化成，明胶表面液化成 漏斗状漏斗状 9 炭疽杆菌在血琼脂平板中菌落炭疽杆菌在血琼脂平板中菌落 10 生物学性状生物学性状生化反应生化反应 n分解葡萄糖、麦芽糖、覃糖、蔗糖分解葡萄糖、

4、麦芽糖、覃糖、蔗糖 n还原硝酸盐还原硝酸盐 n卵磷脂酶弱阳卵磷脂酶弱阳 n明胶液化明胶液化 n触酶阳性触酶阳性 n牛乳中生长牛乳中生长24天，牛乳凝固后缓慢融化天，牛乳凝固后缓慢融化 11 生物学性状生物学性状抗原抗原 n细菌性抗原细菌性抗原 l菌体多糖抗原：与毒力无关，耐热、耐腐败，菌体多糖抗原：与毒力无关，耐热、耐腐败， Ascoli热沉淀反应，特异性不高热沉淀反应，特异性不高 l荚膜多肽抗原：侵袭因子，质粒编码，抗吞噬，荚膜多肽抗原：侵袭因子，质粒编码，抗吞噬， 与毒力有关，荚膜肿胀试验有鉴别诊断价值与毒力有关，荚膜肿胀试验有鉴别诊断价值 l芽胞抗原：有免疫原性和血清学价值芽胞抗原：有免

5、疫原性和血清学价值 12 n炭疽毒素：由保护性抗原、致死因子、水炭疽毒素：由保护性抗原、致死因子、水 肿因子等蛋白质形成的毒素复合物。后两肿因子等蛋白质形成的毒素复合物。后两 种不能单独发挥生物活性作用，须与保护种不能单独发挥生物活性作用，须与保护 性抗原组合；是引起炭疽症状的原因；具性抗原组合；是引起炭疽症状的原因；具 有抗吞噬和免疫原性有抗吞噬和免疫原性 13 生物学性状生物学性状抵抗力抵抗力 n耐热、耐干燥耐热、耐干燥 n对碘及氧化剂敏感，对碘及氧化剂敏感，0.5%过氧乙酸过氧乙酸10分钟分钟 杀死杀死 n对青霉素、磺胺类、环丙沙星抗生素敏感对青霉素、磺胺类、环丙沙星抗生素敏感 14 临

6、床意义临床意义 n引起人、畜共患的急性传染病引起人、畜共患的急性传染病 n致病因子：荚膜、炭疽毒素致病因子：荚膜、炭疽毒素 n所致疾病：皮肤炭疽（皮肤粘膜接触）所致疾病：皮肤炭疽（皮肤粘膜接触） 肠炭疽（消化道）肠炭疽（消化道） 肺炭疽（呼吸道）肺炭疽（呼吸道） 生物恐怖生物恐怖 15 16 17 微生物学检查微生物学检查 n标本的采集：标本的采集： 分泌物、痰、血液、粪便、呕吐物、脑脊液分泌物、痰、血液、粪便、呕吐物、脑脊液 严禁宰杀死畜严禁宰杀死畜 n标本的处理：液体标本取沉渣分离培养；标本的处理：液体标本取沉渣分离培养； 固体标本用生理盐水浸泡，水浴杀死非芽胞菌固体标本用生理盐水浸泡，水

7、浴杀死非芽胞菌 n血液、脏器、渗出液增菌或直接分离培养血液、脏器、渗出液增菌或直接分离培养 18 检验方法检验方法 n涂片染色：革兰阳性大杆菌、竹节状排列、涂片染色：革兰阳性大杆菌、竹节状排列、 有明显荚膜和芽胞有明显荚膜和芽胞 n分离培养：分离培养：BAP或戊烷脒多粘菌素或戊烷脒多粘菌素B等选择等选择 性培养基性培养基 19 鉴定试验鉴定试验 n串珠试验：接种待检菌于串珠试验：接种待检菌于 0.050.5U/ml0.050.5U/ml青霉素培养基青霉素培养基 376h 376h 形成大而均匀的圆球状菌体形成大而均匀的圆球状菌体 20 鉴定试验鉴定试验 青霉素抑制试验青霉素抑制试验 接种于含青

8、霉素5、10、100U/ml琼脂平板，3724h 生长 受抑制不生长 21 鉴定试验鉴定试验 串珠和青霉素抑制联合试验串珠和青霉素抑制联合试验 青霉素纸片 抑菌环 兔血琼脂平板 22 鉴定试验鉴定试验 n噬菌体裂解试验（噬菌体裂解试验（AP631AP631炭疽噬菌体）炭疽噬菌体） n毒力试验：毒素动物试验毒力试验：毒素动物试验 n重碳酸盐毒力试验（接种于含重碳酸盐毒力试验（接种于含0.5%NaHCO30.5%NaHCO3 和和10%10%马血清的平板，马血清的平板， 10%CO210%CO2、3737、 242448h 48h ） 有毒株：粘液型菌落，有荚膜有毒株：粘液型菌落，有荚膜 无毒株：

9、粗糙型菌落，无荚膜无毒株：粗糙型菌落，无荚膜 23 已处理标本已处理标本 直接涂片直接涂片增菌培养增菌培养分离培养分离培养 革兰染色革兰染色 荚膜染色荚膜染色 初步报告初步报告 血平板血平板 戊烷脒琼脂平板戊烷脒琼脂平板 可疑菌落可疑菌落 菌落涂片菌落涂片 染色镜检染色镜检 鉴定试验鉴定试验 肉汤培养肉汤培养 动物实验动物实验 动物死亡动物死亡 分离培养分离培养 噬菌体裂解噬菌体裂解 串珠试验串珠试验 青霉素抑制试验青霉素抑制试验 鉴定流程鉴定流程 24 蜡样芽胞杆菌蜡样芽胞杆菌 (B.cereus) 25 蜡样芽胞杆菌蜡样芽胞杆菌 n分布广泛，可从食品中分离得到分布广泛，可从食品中分离得到

10、n主要引起人类食物中毒，少数菌血症主要引起人类食物中毒，少数菌血症 26 生物学性状生物学性状形态染色形态染色 n革兰阳性大杆菌、革兰阳性大杆菌、 两端钝圆或平整两端钝圆或平整 n有芽胞、周鞭毛、有芽胞、周鞭毛、 无荚膜无荚膜 n芽孢位于菌体中央芽孢位于菌体中央 或次极端或次极端 n有时成短链状排列有时成短链状排列 27 蜡样芽胞杆菌蜡样芽胞杆菌 28 生物学性状生物学性状培养特性培养特性 n需氧或兼性厌氧，营养要求不高需氧或兼性厌氧，营养要求不高 n营养琼脂：菌落表面粗糙似白蜡状，营养琼脂：菌落表面粗糙似白蜡状， 故得名；灰白色大菌落，毛玻璃状或故得名；灰白色大菌落，毛玻璃状或 蜡滴状。蜡滴

11、状。 nBAPBAP：溶血溶血 n肉汤培养基：混浊生长，可形成菌膜肉汤培养基：混浊生长，可形成菌膜 29 蜡样芽胞杆菌在血琼脂平板中菌落蜡样芽胞杆菌在血琼脂平板中菌落 30 31 生物学性状生物学性状生化反应生化反应 n分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、果糖等分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、果糖等 n液化明胶液化明胶 n磷脂酰胆碱酯酶阳性磷脂酰胆碱酯酶阳性 nVPVP试验阳性试验阳性 nDNADNA酶阳性酶阳性 32 生物学性状生物学性状抵抗力抵抗力 n芽孢能耐受芽孢能耐受100100、3030分钟分钟 n干热干热120120、6060分钟可杀死分钟可杀死 n对氯霉素、红霉素和庆大霉素敏感，对氯霉素、红霉素

12、和庆大霉素敏感， 对青霉素、磺胺类和呋喃类耐药对青霉素、磺胺类和呋喃类耐药 33 临床意义临床意义 n食物中毒食物中毒 腹泻型腹泻型不耐热肠毒素引起不耐热肠毒素引起 呕吐型呕吐型耐热肠毒素引起耐热肠毒素引起 n菌血症菌血症 34 微生物学检查微生物学检查 n标本的采集：标本的采集： 可疑食物、腹泻粪便、呕吐物可疑食物、腹泻粪便、呕吐物 n标本的处理：无菌生理盐水制成细菌混悬标本的处理：无菌生理盐水制成细菌混悬 液；细菌计数液；细菌计数105/ml105/ml有诊断价值有诊断价值 n涂片染色：革兰阳性大杆菌、两端钝圆、涂片染色：革兰阳性大杆菌、两端钝圆、 链状排列、长短不一链状排列、长短不一 n

13、分离培养：分离培养：BAPBAP或卵黄琼脂等选择性培养基或卵黄琼脂等选择性培养基 35 微生物学检查微生物学检查 呕吐物、残留食物等呕吐物、残留食物等 活菌计数活菌计数接种接种 普通平板普通平板 BAP 卵黄琼脂平卵黄琼脂平 板板 371824h 直接涂直接涂 片染色片染色 镜检镜检 动物试验动物试验 生化反应生化反应血清凝集血清凝集 报告结果报告结果 36 产单核细胞李斯特菌产单核细胞李斯特菌 ( Listeria monocytogenes) 37 产单核细胞李斯特菌产单核细胞李斯特菌 n分布广泛，人畜共患和食品病原菌，分布广泛，人畜共患和食品病原菌， 可存在人或动物粪便中可存在人或动物粪

14、便中 n常伴随常伴随EB EB 病毒引起传染性单核细病毒引起传染性单核细 胞增多症胞增多症 n多种传播途径：粪多种传播途径：粪- -口，接触传染口，接触传染 38 生物学性状生物学性状形态染色形态染色 n革兰阳性短小杆菌，呈双排列，偶见双球革兰阳性短小杆菌，呈双排列，偶见双球 状；幼龄为革兰阳性短小杆菌，陈旧状；幼龄为革兰阳性短小杆菌，陈旧48h可可 为阴性、两端着色深而误认为双球菌为阴性、两端着色深而误认为双球菌 n有鞭毛，有鞭毛，182020有动力，有动力，3737动力缓慢动力缓慢 n不产芽孢，一般不形成荚膜，不产芽孢，一般不形成荚膜， 在含血清的葡萄糖蛋白胨水中 能形成粘多糖荚膜 39

15、生物学性状生物学性状培养特性培养特性 n兼性厌氧，营养要求不高，兼性厌氧，营养要求不高， 3-453-45内生长，但内生长，但 最适生长温度最适生长温度30303737 n普通平板呈细小，半透明，边缘整齐、微带珠光普通平板呈细小，半透明，边缘整齐、微带珠光 的露水样菌落的露水样菌落 nBAPBAP：灰白色菌落，狭窄：灰白色菌落，狭窄溶血环，把菌落刮去溶血环，把菌落刮去, , 才可见菌落下面的才可见菌落下面的溶血环溶血环 n44冷增菌可提高分离阳性率冷增菌可提高分离阳性率 n肉汤培养基：混浊生长，可形成薄膜肉汤培养基：混浊生长，可形成薄膜 n在半固体培基中扩散生长呈倒伞形在半固体培基中扩散生长呈

16、倒伞形 n分离时选择分离时选择2525，可有效控制其它杂菌的生长而，可有效控制其它杂菌的生长而 此菌生长良好此菌生长良好 40 产单核细胞李斯特菌在血产单核细胞李斯特菌在血 平板上平板上 产单核细胞李斯特菌在半固产单核细胞李斯特菌在半固 体培养基中呈倒伞形生长体培养基中呈倒伞形生长 41 生物学性状生物学性状生化反应生化反应 n触酶阳性，发酵多种糖类产酸不产气触酶阳性，发酵多种糖类产酸不产气 n水解七叶苷水解七叶苷 nV-PV-P及甲基红试验阳性及甲基红试验阳性 nCAMPCAMP试验阳性试验阳性 42 生物学性状生物学性状抗原抗原 n根据菌体和鞭毛抗原不同，分根据菌体和鞭毛抗原不同，分4个血

17、清和多个血清和多 个亚型，抗原构造与毒力无关，各型对人个亚型，抗原构造与毒力无关，各型对人 类均可致病类均可致病 n与葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等有共与葡萄球菌、链球菌、肺炎链球菌等有共 同抗原，血清学诊断缺乏特异性同抗原，血清学诊断缺乏特异性 43 生物学性状生物学性状抵抗力抵抗力 n土壤、粪便等中可长期存活土壤、粪便等中可长期存活 n耐盐、耐碱，不耐酸（耐盐、耐碱，不耐酸（PH4.0以下不能生长以下不能生长)、 对热敏感对热敏感(60 30分钟、分钟、80 1分钟死亡）分钟死亡） n对一般消毒剂敏感对一般消毒剂敏感 n紫外线照射紫外线照射15分钟可杀灭该菌分钟可杀灭该菌 n对多种抗生素敏

18、感，氨苄西林首选对多种抗生素敏感，氨苄西林首选 44 临床意义临床意义致病性致病性 n溶血素：能使细菌逃避呑噬体的呑噬作用，溶血素：能使细菌逃避呑噬体的呑噬作用， 损坏红细胞、巨噬细胞和血小板损坏红细胞、巨噬细胞和血小板 n菌体表面蛋白成分（侵袭性蛋白）菌体表面蛋白成分（侵袭性蛋白） n超氧化物岐化酶及各种毒力因子超氧化物岐化酶及各种毒力因子 n细胞内寄生菌：可在吞噬细胞内、单核细细胞内寄生菌：可在吞噬细胞内、单核细 胞内和上皮细胞内生长胞内和上皮细胞内生长 45 临床意义临床意义 n传染源为带菌者，多种途径传染（经胎盘、传染源为带菌者，多种途径传染（经胎盘、 产道可感染胎儿和新生儿、与病畜接

19、触可产道可感染胎儿和新生儿、与病畜接触可 致眼、皮肤局部感染）致眼、皮肤局部感染） n污染奶制品可引起食物中毒污染奶制品可引起食物中毒 n可导致人和动物脑膜炎、菌血症、心内膜可导致人和动物脑膜炎、菌血症、心内膜 炎、流产、胃肠炎等炎、流产、胃肠炎等 46 微生物学检查微生物学检查 n标本采集：标本采集： 血液、血液、CSFCSF、宫颈、阴道、鼻咽分泌物等、宫颈、阴道、鼻咽分泌物等 n直接涂片：直接涂片： l在在CSFCSF标本中成对排列，形如球菌，易误认为标本中成对排列，形如球菌，易误认为 肺炎链球菌肺炎链球菌 l革兰染色过度脱色形似流感杆菌革兰染色过度脱色形似流感杆菌 l有时易与类白喉杆菌也

20、极易混淆有时易与类白喉杆菌也极易混淆 47 微生物学检查微生物学检查 n分离培养分离培养 BAPBAP、巧克力平板、巧克力平板 杂菌污染标本可用杂菌污染标本可用200g/LNaCl200g/LNaCl心脑浸液肉汤心脑浸液肉汤2 2支：支： 1 1支支10%CO10%CO2 2，3724372448h48h分离培养（分离培养（BAPBAP、萘啶、萘啶 酸选择性平板）酸选择性平板） 1 1支支4 “4 “冷增菌冷增菌” ” 分离培养（每分离培养（每24h24h一一 次，共次，共4 4次，以后每周一次，至少次，以后每周一次，至少4 4周）周） 48 微生物学检查微生物学检查 标本标本 直接涂片直接涂

21、片 染色镜检染色镜检 200g/LNacl 心脑浸汤增心脑浸汤增 菌菌 分离培养分离培养 10% CO2 37 24-48h 4冷增菌冷增菌 每每24h一次，共一次，共4次，以次，以 后每周一次，至少后每周一次，至少4周周 血平板血平板萘啶酸选择性平板萘啶酸选择性平板 挑取可疑菌落挑取可疑菌落 涂片染色镜检涂片染色镜检 半固体半固体 普通肉汤普通肉汤 普通斜面普通斜面 动物试验动物试验 其他其他 生化生化 触酶触酶 试验试验 鉴定流程鉴定流程 49 红斑丹毒丝菌红斑丹毒丝菌 （ E.rhusiopathiae） 50 红斑丹毒丝菌红斑丹毒丝菌 n急性传染病急性传染病 n接触或皮肤损伤引起致病接

22、触或皮肤损伤引起致病 n局部感染为主，全身感染少见局部感染为主，全身感染少见 51 生物学性状生物学性状形态染色形态染色 nG+杆菌，可呈长丝状， 与放线菌形态相似 n无芽孢、无鞭毛、无荚膜 52 生物学性状生物学性状培养特性培养特性 培养要求高，初次需厌氧或微需氧 血平板血平板 含碲盐培养基含碲盐培养基 53 生物学性状生物学性状生化反应生化反应 n触酶阴性触酶阴性 n分解葡萄糖、乳糖、阿拉伯糖分解葡萄糖、乳糖、阿拉伯糖 n不分解木糖、甘露醇及蔗糖不分解木糖、甘露醇及蔗糖 nTSITSI中产硫化氢，而在醋酸铅培养中不中产硫化氢，而在醋酸铅培养中不 产硫化氢产硫化氢 54 生物学性状生物学性状

23、抵抗力抵抗力 n对湿热和化学消毒剂敏感对湿热和化学消毒剂敏感 甲醛、漂白粉、来苏有效甲醛、漂白粉、来苏有效 n对苯酚抵抗力较强对苯酚抵抗力较强 n对青霉素、头孢菌素、红霉素和四环对青霉素、头孢菌素、红霉素和四环 素敏感素敏感 55 临床意义临床意义 n局部感染局部感染 n食物中毒食物中毒 56 微生物学检查要点微生物学检查要点 nG+G+细长杆菌细长杆菌 n血平板上呈细小光滑型菌落或较大粗血平板上呈细小光滑型菌落或较大粗 糙颗粒型菌落糙颗粒型菌落 n三糖铁培养基中产硫化氢、分解阿拉三糖铁培养基中产硫化氢、分解阿拉 伯糖伯糖 57 阴道加特纳菌阴道加特纳菌 （Gardnerella vagina

24、lis） 58 生物学性状生物学性状形态染色形态染色 n革兰染色视菌株和菌龄而异，高浓度革兰染色视菌株和菌龄而异，高浓度 血清中生长呈革兰阳性血清中生长呈革兰阳性 n多形性，无鞭毛、无芽胞和无荚膜多形性，无鞭毛、无芽胞和无荚膜 GVGV纯培养的镜下形态纯培养的镜下形态 59 生物学性状生物学性状培养特性培养特性 n兼性厌氧菌，营养要求较高，但不需要兼性厌氧菌，营养要求较高，但不需要X、 V因子，最适因子，最适PH6.0-6.5，最适生长温度，最适生长温度35- 37 n5%人血平板，人血平板，5%CO2 35培养培养48小时，小时， 形成针尖大小的菌落：圆形、光滑、不透形成针尖大小的菌落：圆形

25、、光滑、不透 明，人血、兔血平板上生长呈明，人血、兔血平板上生长呈溶血环，羊溶血环，羊 血平板不溶血血平板不溶血 60 GVGV在人血平板上的菌落形态特征（在人血平板上的菌落形态特征（48h48h） 61 生物学性状生物学性状生化反应生化反应 n氧化酶、触酶阴性氧化酶、触酶阴性 n发酵葡萄糖、麦芽糖，产酸不产气发酵葡萄糖、麦芽糖，产酸不产气 n水解马尿酸和淀粉等水解马尿酸和淀粉等 62 临床意义临床意义 nGV和厌氧菌在阴道内过度生长造成阴道正和厌氧菌在阴道内过度生长造成阴道正 常菌群微生态平衡失调，而引起非特异细常菌群微生态平衡失调，而引起非特异细 菌性阴道病（菌性阴道病（BV），伴有阴道分

26、泌物性质），伴有阴道分泌物性质 改变的一组综合征改变的一组综合征 n许多研究表明，许多研究表明，GV和厌氧菌之间有协同作和厌氧菌之间有协同作 用。用。GV引起细菌性阴道病，产生大量胺酸，引起细菌性阴道病，产生大量胺酸， 而厌氧菌自胺酸中产生胺（如尸胺、腐而厌氧菌自胺酸中产生胺（如尸胺、腐 胺），提高胺），提高PH，从而有助于，从而有助于GV生长生长 63 临床意义临床意义 n阴道微生态环境是伴随着体内雌激素的变阴道微生态环境是伴随着体内雌激素的变 化而变化，雌激素对阴道糖原的含量以及化而变化，雌激素对阴道糖原的含量以及 由糖原产生的乳酸是控制阴道细菌种类和由糖原产生的乳酸是控制阴道细菌种类和

27、数量的主要因素数量的主要因素 n并非并非GV阳性均为阳性均为BV n在诊断在诊断BV时，常作临床简易试验协助诊断时，常作临床简易试验协助诊断, 一般不分离做细菌培养，而以涂片观察各一般不分离做细菌培养，而以涂片观察各 菌群比例，或测分泌物菌群比例，或测分泌物PH、临床症状为主、临床症状为主 64 临床意义临床意义 n本菌也可引起新生儿致死性和非致死性败本菌也可引起新生儿致死性和非致死性败 血症和软组织感染、产后败血症，引起早血症和软组织感染、产后败血症，引起早 产、产褥热、绒毛膜炎，产后子宫内膜炎产、产褥热、绒毛膜炎，产后子宫内膜炎 和尿道感染等妇产科多重严重并发症和尿道感染等妇产科多重严重并

28、发症 65 微生物学检查微生物学检查 1.1.标本直接检查标本直接检查 u涂片检查：阴道分泌物直接涂片检查，对细菌性涂片检查：阴道分泌物直接涂片检查，对细菌性 阴道炎的诊断比细菌培养更为重要阴道炎的诊断比细菌培养更为重要 n直接湿片镜检直接湿片镜检 取阴道分泌物加一滴生理盐水混合涂片，在显取阴道分泌物加一滴生理盐水混合涂片，在显 微镜下观察，微镜下观察，BV患者可见大量阴道上皮细胞，患者可见大量阴道上皮细胞， 少量脓细胞，脱落上皮细胞内粘附着多量的细小少量脓细胞，脱落上皮细胞内粘附着多量的细小 杆菌，使上皮细胞呈锯齿状而不清晰，形成线索杆菌，使上皮细胞呈锯齿状而不清晰，形成线索 细胞细胞 66

29、 微生物学检查微生物学检查 n涂片染色镜检涂片染色镜检 健康者阴道分泌物涂片，呈现大量粗大的健康者阴道分泌物涂片，呈现大量粗大的 革兰阳性菌，极少量各种阴性或染色不定革兰阳性菌，极少量各种阴性或染色不定 的球杆菌；的球杆菌； 如见有大量染色不定的小杆菌，也有革兰如见有大量染色不定的小杆菌，也有革兰 阴性杆菌（如类杆菌）、弧菌或革兰阳性阴性杆菌（如类杆菌）、弧菌或革兰阳性 菌而乳酸杆菌明显减少，可提示菌而乳酸杆菌明显减少，可提示BV患者患者 67 微生物学检查微生物学检查 u分泌物分泌物PH测定：用精密测定：用精密PH试纸直接浸在窥试纸直接浸在窥 阴器下叶分泌物中数秒，阴器下叶分泌物中数秒，PH

30、4.5为可疑为可疑 u胺试验：在阴道分泌物载玻片上，加一滴胺试验：在阴道分泌物载玻片上，加一滴 100g/LKOH，若发出腐败鱼腥样胺嗅味，若发出腐败鱼腥样胺嗅味， 即胺试验阳性即胺试验阳性 68 微生物学检查微生物学检查 2.2.分离培养：分离培养： 5%的人血琼脂平板，的人血琼脂平板，353- 5%CO2环境中环境中48小时观察，如菌落生长典小时观察，如菌落生长典 型和细菌形态为小杆状，革兰染色不定，型和细菌形态为小杆状，革兰染色不定， 着色不均者可进一步作生化试验着色不均者可进一步作生化试验 69 微生物学检查微生物学检查 分泌物（宫颈、阴道）分泌物（宫颈、阴道） 涂片染色镜检涂片染色镜

31、检 分离培养分离培养 新鲜湿片新鲜湿片 （找线索细胞）（找线索细胞） (5%人血平板人血平板) 纯培养纯培养 (5%人血平板人血平板) 触酶、氧化酶触酶、氧化酶(-) 初步报告初步报告 GV的主要鉴定试验的主要鉴定试验 最后报告最后报告 最后报告最后报告 70 药敏试验药敏试验 对氨苄西林、羧苄西林、苯唑西林、青霉对氨苄西林、羧苄西林、苯唑西林、青霉 素、万古霉素敏感；对磺胺类、萘啶酸、素、万古霉素敏感；对磺胺类、萘啶酸、 新霉素等耐药新霉素等耐药 71 棒状杆菌属棒状杆菌属 （Corynebacterium） 72 n是一群革兰阳性杆菌，归属放线菌是一群革兰阳性杆菌，归属放线菌 科科 n种类

32、繁多，多为条件致病菌，引起种类繁多，多为条件致病菌，引起 人类疾病的主要是白喉棒状杆菌人类疾病的主要是白喉棒状杆菌 73 白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌 74 生物学性状生物学性状形态染色形态染色 nG+G+棒状杆菌，一端或两端膨大，排列棒状杆菌，一端或两端膨大，排列 不规则，常呈不规则，常呈X X、V V、L L状状 n不产生芽胞、无鞭毛、无荚膜不产生芽胞、无鞭毛、无荚膜 n胞浆中有异染颗粒胞浆中有异染颗粒 异染颗粒染色法：异染颗粒染色法： AlbertAlbert染色染色 NeisserNeisser染色染色 75 生物学性状生物学性状培养特性培养特性 n需氧或兼性厌氧需氧或兼性厌氧 n菌落特征

33、菌落特征 l 血平板：细小灰白、狭窄溶血环血平板：细小灰白、狭窄溶血环 l 鸡蛋斜面和吕氏血清斜面：生长迅速，灰白鸡蛋斜面和吕氏血清斜面：生长迅速，灰白 色有光泽菌落色有光泽菌落 l 亚碲酸钾血平板：为选择培养基，菌落亚碲酸钾血平板：为选择培养基，菌落 呈呈 黑色。菌落分为重型、轻型或中间型黑色。菌落分为重型、轻型或中间型 76 生物学性状生物学性状生化反应生化反应 n分解葡萄糖、麦芽糖、果糖等分解葡萄糖、麦芽糖、果糖等 不分解乳糖、多数不分解蔗糖不分解乳糖、多数不分解蔗糖 n不液化明胶不液化明胶 n靛基质试验阴性靛基质试验阴性 77 生物学性状生物学性状抵抗力抵抗力 n本菌对干燥、寒冷、日光

34、等因素较其本菌对干燥、寒冷、日光等因素较其 它无芽孢菌强它无芽孢菌强 n对湿热和常用消毒剂敏感对湿热和常用消毒剂敏感 78 毒力试验毒力试验 n是鉴定白喉杆菌为致病菌株的重要依据 n方法 艾立克(Elek)平板毒力试验 对流电泳法 SPA协同凝集试验 动物试验 79 临床意义临床意义 n致病物质：产生的强烈白喉外毒素致病物质：产生的强烈白喉外毒素 n传染源是患者或带菌者，经呼吸道飞沫感染，传染源是患者或带菌者，经呼吸道飞沫感染， 引起白喉引起白喉 n假膜脱落阻塞呼吸道是白喉早期死亡的主要假膜脱落阻塞呼吸道是白喉早期死亡的主要 原因原因 n中毒性心肌炎是白喉晚期死亡的主要原因中毒性心肌炎是白喉晚

35、期死亡的主要原因 n抗白喉免疫主要依靠白喉抗毒素的中和作用，抗白喉免疫主要依靠白喉抗毒素的中和作用， 体液免疫为主体液免疫为主 n锡克试验用于检测机体有无白喉抗毒素免疫锡克试验用于检测机体有无白喉抗毒素免疫 80 微生物学检查微生物学检查 n标本采集：棉拭子采集疑为假膜边缘的分泌物标本采集：棉拭子采集疑为假膜边缘的分泌物 n标本直接涂片标本直接涂片 革兰染色：观察形态、染色性革兰染色：观察形态、染色性 异染颗粒染色：观察异染颗粒异染颗粒染色：观察异染颗粒 初步报告：检出形似白喉棒状杆菌初步报告：检出形似白喉棒状杆菌 n分离培养分离培养 吕氏斜面：生长迅速，涂片镜检异染颗粒明显吕氏斜面：生长迅速

36、，涂片镜检异染颗粒明显 亚碲酸钾血平板：黑色菌落亚碲酸钾血平板：黑色菌落 81 微生物学检查微生物学检查 咽拭咽拭 标本标本 亚碲酸钾亚碲酸钾 血平板血平板 观察菌落特征观察菌落特征 直接涂片直接涂片 革兰染色革兰染色 异染颗粒染色异染颗粒染色 血平板血平板 吕氏血清斜面吕氏血清斜面 直接涂片直接涂片 革兰染色革兰染色 异染颗粒染色异染颗粒染色 涂片染色镜检涂片染色镜检 生化反应生化反应 毒力试验毒力试验 82 药敏试验药敏试验 n本菌对青霉素、红霉素、氯霉素敏感，对 磺胺类耐药 83 厌氧菌 厌氧菌厌氧菌 （anaerobic bacteriaanaerobic bacteria） 84 定

37、义定义 n在有氧条件下不能生长，无氧的环境在有氧条件下不能生长，无氧的环境 中才能生长的细菌。（缺乏完善的酶中才能生长的细菌。（缺乏完善的酶 系统，只能以无氧发酵进行能量代谢）系统，只能以无氧发酵进行能量代谢） n自然界广泛分布，是人体正常菌群，自然界广泛分布，是人体正常菌群， 其中肠道中厌氧菌量最多其中肠道中厌氧菌量最多 85 分类分类 n生物学分类生物学分类: : lG+G+有芽胞杆菌有芽胞杆菌 lG+G+无芽胞杆菌、无芽胞杆菌、G-G-无芽胞杆菌、无芽胞杆菌、G+G+厌氧厌氧 球菌、球菌、G-G-厌氧球菌厌氧球菌 n对氧耐受程度分类：对氧耐受程度分类： 对氧极端敏感的厌氧菌、中度厌氧菌、

38、对氧极端敏感的厌氧菌、中度厌氧菌、 耐氧厌氧菌耐氧厌氧菌 86 感染性感染性 n 厌氧芽胞杆菌厌氧芽胞杆菌自然界自然界外源性感外源性感 染染如破伤风如破伤风 n 无芽胞厌氧菌无芽胞厌氧菌人体正常菌群人体正常菌群内内 源性感染源性感染病种多样病种多样 87 厌氧感染条件厌氧感染条件 n局部组织的氧化还原电势（局部组织的氧化还原电势（EhEh）下）下 降降 n机体免疫功能下降机体免疫功能下降 n机体局部屏障作用破坏机体局部屏障作用破坏 88 感染的临床及细菌学指征感染的临床及细菌学指征 n局部有大量气体产生局部有大量气体产生 n发生在黏膜附近的感染发生在黏膜附近的感染 n深部外伤深部外伤 n有特殊

39、的分泌物（恶臭、暗血红色）有特殊的分泌物（恶臭、暗血红色） n某些抗生素治疗无效的感染某些抗生素治疗无效的感染 n其它：镜检有菌而培养阴性等其它：镜检有菌而培养阴性等 89 主要内容主要内容 n厌氧芽胞梭菌厌氧芽胞梭菌 l破伤风梭菌破伤风梭菌 l产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌 l肉毒梭菌肉毒梭菌 n无芽胞厌氧菌无芽胞厌氧菌 90 厌氧芽胞梭菌厌氧芽胞梭菌 n厌氧或微需氧厌氧或微需氧 n革兰阳性粗大芽孢杆菌，芽孢呈圆形革兰阳性粗大芽孢杆菌，芽孢呈圆形 或卵圆形或卵圆形 n多数为腐物寄生菌，少数为致病菌，多数为腐物寄生菌，少数为致病菌， 能分泌外毒素和侵袭性酶能分泌外毒素和侵袭性酶 91 细菌细菌所致疾

40、病所致疾病 破伤风梭菌破伤风梭菌破伤风破伤风 产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌 菌血症、气性坏疽、软组织感菌血症、气性坏疽、软组织感 染、食物中毒等染、食物中毒等 肉毒梭菌肉毒梭菌食物中毒、婴儿肉毒梭菌症、食物中毒、婴儿肉毒梭菌症、 创伤、肉毒症创伤、肉毒症 艰难梭菌艰难梭菌 抗生素相关性腹泻、抗生素相抗生素相关性腹泻、抗生素相 关性伪膜性肠炎关性伪膜性肠炎 92 破伤风梭菌（破伤风梭菌（C Ctetanitetani） n 广泛存在于自然界广泛存在于自然界 n破伤风杆菌及其毒素都破伤风杆菌及其毒素都 不能侵入正常的皮肤和粘膜不能侵入正常的皮肤和粘膜 在发展中国家死亡率在发展中国家死亡率 可达到可达到

41、9090 93 n菌体细长，有周身鞭毛、无荚膜菌体细长，有周身鞭毛、无荚膜 n培养培养2472h2472h形成芽胞；芽胞呈球形成芽胞；芽胞呈球 形，大于菌体宽度，位于菌体顶形，大于菌体宽度，位于菌体顶 端，细菌呈端，细菌呈 nG+G+，严格厌氧，有溶血现象，严格厌氧，有溶血现象 n芽胞抵抗力很强芽胞抵抗力很强 l100100C1C1小时可完全被破坏小时可完全被破坏 l在干燥的土壤和尘埃中可存活在干燥的土壤和尘埃中可存活 数年数年 94 95 破伤风梭菌的芽胞染色破伤风梭菌的芽胞染色 96 培养特性培养特性 在潮湿的血平板上呈扩散生长，不易获得单个的表面菌落。在潮湿的血平板上呈扩散生长，不易获得

42、单个的表面菌落。 这种迁徒生长的生长物边缘不整齐，具有卷发状的突起，这种迁徒生长的生长物边缘不整齐，具有卷发状的突起， 由纤细的细丝形成。这些特征不仅具有诊断价值，而且便由纤细的细丝形成。这些特征不仅具有诊断价值，而且便 于从混合培养物中分离得到纯培养于从混合培养物中分离得到纯培养 97 培养特性培养特性 生长在庖肉培养基中的破伤风梭菌，显示糖分解（加有酚红指生长在庖肉培养基中的破伤风梭菌，显示糖分解（加有酚红指 示剂的肉汤微变红）和蛋白质分解（分解含硫的氨基酸变黑）示剂的肉汤微变红）和蛋白质分解（分解含硫的氨基酸变黑） 同时也产气（本图未示）。左图为未接种的对照管同时也产气（本图未示）。左图

43、为未接种的对照管 98 生化反应、抗原构造、抵抗力生化反应、抗原构造、抵抗力 nH H2 2S S阳性、吲哚阳性、明胶酶阳性、不发酵糖类阳性、吲哚阳性、明胶酶阳性、不发酵糖类 nO O抗原、抗原、H H抗原，气液相色谱可检出代谢产物有乙酸、抗原，气液相色谱可检出代谢产物有乙酸、 丙酸、丁酸、乙醇和丁醇丙酸、丁酸、乙醇和丁醇 n繁殖体抵抗力无特异性，繁殖体抵抗力无特异性，芽胞抵抗力极强芽胞抵抗力极强：在土壤：在土壤 中数十年不死，耐煮沸中数十年不死，耐煮沸1h1h，干热，干热1501h1501h，50g/l50g/l石石 炭酸炭酸10-15h10-15h。对青霉素敏感，磺胺类有抑制作用，。对青霉

44、素敏感，磺胺类有抑制作用， 对氨基糖甙类耐药对氨基糖甙类耐药 99 n该菌无侵袭力，仅在局部繁殖，其致病作该菌无侵袭力，仅在局部繁殖，其致病作 用完全有赖于病菌所产生的外毒素用完全有赖于病菌所产生的外毒素 n致病条件致病条件具无氧环境的伤口具无氧环境的伤口 l伤口窄而深（如刺伤）伤口窄而深（如刺伤） l有泥土或异物污染有泥土或异物污染 l大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局部大面积创伤、烧伤，坏死组织多，局部 组织缺血组织缺血 100 n破伤风痉挛毒素破伤风痉挛毒素( (外毒素外毒素) ) l引起破伤风的主要致病物质引起破伤风的主要致病物质 l属神经毒素属神经毒素(neurotoxin)(neur

45、otoxin)，毒性极，毒性极 强强( (小鼠小鼠LDLD50 50为 为0.015ng0.015ng，对人致死量，对人致死量 1g)1g) 101 n潜伏期：可从几天至几周潜伏期：可从几天至几周 平均平均1-21-2周周 n典型的症状典型的症状 l苦笑面容苦笑面容 l角弓反张角弓反张 l其它：呼吸肌痉挛、窒息、其它：呼吸肌痉挛、窒息、 死亡死亡 102 103 This baby has neonatal tetanus. It is completely rigid. Tetanus kills most of the babies who get it. Infection usuall

46、y happens when newly cut umbilical cord is exposed to dirt CDC 104 105 The adults have a severe case of tetanus. The muscles in his back and legs are very tight. Muscle spasms can break bones in the persons body 106 n破伤风免疫属外毒素免疫，主要是抗毒素破伤风免疫属外毒素免疫，主要是抗毒素 发挥中和作用，一般病后不会获得牢固免发挥中和作用，一般病后不会获得牢固免 疫力疫力 n破伤风

47、痉挛毒素对脑干神经和脊髓前角神破伤风痉挛毒素对脑干神经和脊髓前角神 经细胞有高度亲和力，与中枢神经组织结经细胞有高度亲和力，与中枢神经组织结 合非常牢固，一旦结合即非抗毒素所能中合非常牢固，一旦结合即非抗毒素所能中 和和 n一旦发病，疗效不佳，病死率一旦发病，疗效不佳，病死率50%50% 107 微生物学检查微生物学检查 n根据破伤风的典型临床表现即可作出诊断，故一般不做细根据破伤风的典型临床表现即可作出诊断，故一般不做细 菌学检查菌学检查 l直接涂片从病灶处取标本，直接涂片革兰氏染色，镜直接涂片从病灶处取标本，直接涂片革兰氏染色，镜 检观察检观察若有革兰阳性圆形端生芽胞即鼓褪状的杆菌，若有革

48、兰阳性圆形端生芽胞即鼓褪状的杆菌， 可初步报告结果可初步报告结果 l分离培养本菌较易分离。将可疑的材料接种疱肉培养分离培养本菌较易分离。将可疑的材料接种疱肉培养 基，置基，置757585 85 水浴加热水浴加热3030分钟，杀灭其他杂菌，而分钟，杀灭其他杂菌，而 芽胞得以存活，在厌氧环境中孵育。在疱肉培养基中芽胞得以存活，在厌氧环境中孵育。在疱肉培养基中 生长后，可转种适宜的培养基，如有此菌，则生长后，可转种适宜的培养基，如有此菌，则呈迁徒呈迁徒 生长生长，其生长扩散的最大边缘，通常为平板的一半或，其生长扩散的最大边缘，通常为平板的一半或2 2 3 3 108 微生物学检查微生物学检查 动物实

49、验动物实验: 0.1: 0.10.25ml0.25ml培养滤液肌肉或尾根部注射，阳培养滤液肌肉或尾根部注射，阳 性者于注射性者于注射12-2412-24小时后出现尾部僵直竖起小时后出现尾部僵直竖起( (旗杆尾旗杆尾) )，后，后 腿强直全身肌肉痉挛等特征，甚至死亡腿强直全身肌肉痉挛等特征，甚至死亡 109 鉴定依据鉴定依据 n在平板上呈迁徒生长，可被特异性抗毒素血清抑制在平板上呈迁徒生长，可被特异性抗毒素血清抑制 n幼稚培养的菌体呈细丝状外观，陈旧培养的细菌多呈鼓槌幼稚培养的菌体呈细丝状外观，陈旧培养的细菌多呈鼓槌 状状 n不分解糖类和蛋白质不分解糖类和蛋白质 n大多数菌株产生靛基质大多数菌株

50、产生靛基质 n在牛乳琼脂（含在牛乳琼脂（含3 3琼脂）平板上，形成弥散的不透明区琼脂）平板上，形成弥散的不透明区 n根据产生的挥发性代谢产物。破伤风梭菌的主要代谢产物根据产生的挥发性代谢产物。破伤风梭菌的主要代谢产物 为乙酸、丙酸和丁酸为乙酸、丙酸和丁酸 n动物接种和保护性试验动物接种和保护性试验 110 n防止创口厌氧微环境的形成防止创口厌氧微环境的形成 n人工自动免疫人工自动免疫百白破百白破(DPT)(DPT) n人工被动免疫人工被动免疫破伤风抗毒素（破伤风抗毒素（T.A.TT.A.T） l紧急预防：紧急预防：T.A.T 1500-3000UT.A.T 1500-3000U皮下或皮下或 肌

51、内注射肌内注射 l特异治疗：早期足量使用抗毒素及抗特异治疗：早期足量使用抗毒素及抗 生素生素(T.A.T 10-20(T.A.T 10-20万万U ivdrip)U ivdrip) 111 临床上气性坏疽病原菌中最多见的一种梭菌临床上气性坏疽病原菌中最多见的一种梭菌 气性坏疽气性坏疽 112 临床表现为扩散性水肿、气肿，触摸有捻发音，剧烈疼临床表现为扩散性水肿、气肿，触摸有捻发音，剧烈疼 痛，迅速蔓延，最后大块组织坏死痛，迅速蔓延，最后大块组织坏死 113 nG+G+粗短大杆菌，两端钝圆粗短大杆菌，两端钝圆 n芽胞位于位于菌体中央或芽胞位于位于菌体中央或 次极端呈卵圆形，直径不次极端呈卵圆形，

52、直径不 大于菌体大于菌体 n无鞭毛，在体内有明显的无鞭毛，在体内有明显的 荚膜荚膜 114 n厌氧。繁殖迅速，周期为厌氧。繁殖迅速，周期为8 8分钟分钟 n血平板上双层溶血环，内环完全溶血平板上双层溶血环，内环完全溶 血，由血，由毒素引起；外环不完全溶毒素引起；外环不完全溶 血，由血，由a毒素引起毒素引起 nNaglerNagler反应反应 n代谢活跃，牛奶培养基中能分解乳糖产酸产气，代谢活跃，牛奶培养基中能分解乳糖产酸产气， 酸使酪蛋白凝固，大量气体冲散凝固的酪蛋白，酸使酪蛋白凝固，大量气体冲散凝固的酪蛋白， 冲开棉塞、气势汹涌可出现冲开棉塞、气势汹涌可出现 汹涌发酵汹涌发酵 本菌特本菌特

53、征征 115 产气荚膜梭菌在乳糖蛋黄牛奶血琼脂平板上，显示乳糖分产气荚膜梭菌在乳糖蛋黄牛奶血琼脂平板上，显示乳糖分 解（加有酚红指示剂，菌落红色）；分解卵磷脂在菌落周解（加有酚红指示剂，菌落红色）；分解卵磷脂在菌落周 围形成浊斑；形成双溶血环，内为完全溶血由围形成浊斑；形成双溶血环，内为完全溶血由毒素致，外毒素致，外 层不完全溶血由层不完全溶血由毒素致毒素致 116 产气荚膜梭菌：血琼脂培养显示溶血。某些菌株产生双产气荚膜梭菌：血琼脂培养显示溶血。某些菌株产生双 溶血区（血琼脂培养基，无氧，溶血区（血琼脂培养基，无氧，3737，2424小时）小时） 117 产气荚膜梭菌在产气荚膜梭菌在nagl

54、ernagler卵黄琼脂平板上培养，平皿的左侧涂卵黄琼脂平板上培养，平皿的左侧涂 有抗毒素，右侧无抗毒素，无氧下孵育过夜后，在涂有抗血有抗毒素，右侧无抗毒素，无氧下孵育过夜后，在涂有抗血 清的一侧不出现乳白色浑浊或只有很少的浑浊（左），无抗清的一侧不出现乳白色浑浊或只有很少的浑浊（左），无抗 血清的一侧出现明显的乳白色浑浊血清的一侧出现明显的乳白色浑浊( (右右) )，为，为naglernagler试验阳性试验阳性 118 临床意义临床意义 n本菌可产生外毒素及多种侵袭性酶本菌可产生外毒素及多种侵袭性酶 n毒素为卵磷脂酶，能分解人和动物细胞膜上磷毒素为卵磷脂酶，能分解人和动物细胞膜上磷 脂和蛋

55、白质的复合物，破坏细胞膜，引起溶血、脂和蛋白质的复合物，破坏细胞膜，引起溶血、 组织坏死和血管内皮损伤，使血管通透性增高，组织坏死和血管内皮损伤，使血管通透性增高， 水肿；促使血小板凝集，导致血栓和局部组织缺水肿；促使血小板凝集，导致血栓和局部组织缺 血血 n毒素可引起人类坏死性肠炎毒素可引起人类坏死性肠炎 119 临床意义临床意义 n本菌主要引起气性坏疽，食物中毒和坏死性肠炎本菌主要引起气性坏疽，食物中毒和坏死性肠炎 n当本菌侵入肌肉组织后，细菌即迅速繁殖，产生大量组织当本菌侵入肌肉组织后，细菌即迅速繁殖，产生大量组织 蛋白分解酶类及糖分解酶，溶解组织造成组织坏死，并形蛋白分解酶类及糖分解酶

56、，溶解组织造成组织坏死，并形 成大量气体，以致形成组织中气肿，压迫软组织，阻碍血成大量气体，以致形成组织中气肿，压迫软组织，阻碍血 液供应，更加重肌肉坏死，并引起局部浆液渗出，液供应，更加重肌肉坏死，并引起局部浆液渗出，临床表临床表 现为扩散性水肿，触摸有现为扩散性水肿，触摸有捻发音捻发音，剧烈疼痛，迅速蔓延，剧烈疼痛，迅速蔓延， 最后大块组织坏死最后大块组织坏死 n毒素和组织坏死产物入血，可出现严重的全身中毒症状毒素和组织坏死产物入血，可出现严重的全身中毒症状 120 鉴定依据鉴定依据 n形态特征和缺少芽胞，有荚膜的特征形态特征和缺少芽胞，有荚膜的特征 n菌落特性和糖发酵反应，特别是汹涌发酵

57、现象菌落特性和糖发酵反应，特别是汹涌发酵现象 nNaglerNagler试验试验 n动物试验：将培养物动物试验：将培养物1m11m1，注入家兔静脉内（或，注入家兔静脉内（或0.5ml0.5ml注入小注入小 鼠腹腔内），鼠腹腔内），1010分钟后致死动物，置分钟后致死动物，置3737孵育箱孵育箱4 46 6小时。小时。 可见动物体内充满气体，腹部膨胀。剖检可见各种脏器肿胀可见动物体内充满气体，腹部膨胀。剖检可见各种脏器肿胀 并有许多气泡，尤以肝脏明显，称并有许多气泡，尤以肝脏明显，称“泡沫肝泡沫肝” ” ，取心血或，取心血或 肝组织印片可见阳性粗大杆菌，有明显荚膜肝组织印片可见阳性粗大杆菌，有明

58、显荚膜 121 nG+G+大杆菌，芽胞椭圆形位于菌体次极端，比菌体大杆菌，芽胞椭圆形位于菌体次极端，比菌体 粗，呈网球拍状粗，呈网球拍状 n所致疾病：肉毒食物中毒所致疾病：肉毒食物中毒 n食用肉毒毒素污染的食物食用肉毒毒素污染的食物 n多见于发酵豆制品多见于发酵豆制品( (臭豆腐、豆瓣酱、豆豉臭豆腐、豆瓣酱、豆豉) )及罐及罐 头、火腿、香肠等头、火腿、香肠等 n症状：以神经症状为主症状：以神经症状为主眼睑下垂、眼球肌麻痹、眼睑下垂、眼球肌麻痹、 眼斜、吞咽困难，呼吸肌及心肌麻痹而死亡。眼斜、吞咽困难，呼吸肌及心肌麻痹而死亡。 n防治：食品加热消毒防治：食品加热消毒 尽早注射多价肉毒抗毒素尽早

59、注射多价肉毒抗毒素 122 鉴定依据鉴定依据 n涂片镜检为革兰阳性近极端芽胞，呈汤匙状涂片镜检为革兰阳性近极端芽胞，呈汤匙状 n厌氧，消化肉渣变黑，产生恶臭味厌氧，消化肉渣变黑，产生恶臭味 n菌落边缘有皱褶菌落边缘有皱褶 n肉毒毒素测定阳性肉毒毒素测定阳性 123 其他厌氧菌其他厌氧菌 n革兰阴性无芽胞杆菌革兰阴性无芽胞杆菌 脆弱类杆菌、产黑色素类杆菌脆弱类杆菌、产黑色素类杆菌 n革兰阳性无芽胞杆菌革兰阳性无芽胞杆菌 放线菌、乳酸杆菌、双歧杆菌属放线菌、乳酸杆菌、双歧杆菌属 n厌氧球菌厌氧球菌 韦荣球菌属韦荣球菌属 124 微生物学检查微生物学检查标本采集标本采集 n采集时注意不被正常菌群污染，尽量避免接触空气采集时注意不被正常菌群污染，尽量避免接触空气 n易污染标本不宜厌氧培养易污染标本不宜厌氧培养 齿龈、咽喉拭子、痰液或气管吸出物、小肠内容物、齿龈、咽喉拭子、痰液或气管吸出物、小肠内容物、 阴道或宫颈拭子、尿液或导尿液、粪便、洗胃液、皮肤表阴道或宫颈拭子、尿液或导尿液、粪便、洗胃液、皮肤表 面或伤口边缘等标本面或伤口边缘等标本 n不同部位标本采集法不同部位标本采集法 针筒抽取、穿刺术、外科切开等针筒抽取、穿刺术、外科切开等 n即送即检，避免标本干燥、接触空气和低