用高效液相渗透凝胶色谱法法分析动物皮肤和兔关节液中透明质酸.

1、文献 1:ANALYSIS BY HIGH-PERFORMANCE GEL PERMEATION CHROMATOGRAPHYOF HYALURONIC ACID IN ANIMAL SKINS AND RABBIT SYNOVIAL FLUID用高效液相渗透凝胶色谱法法分析动物皮肤和兔关节液中透明质酸文献来源 :正式出版物 Journal of Chromatography A Volume 435, 1988,Pages 335342文献摘要:作者描述了用两根色谱柱同时测定生物样品中透明质酸的浓度和分子量。作者 在开头的介绍中这样说 :我们曾经用 Shodex OHpak B-806成功把

2、 HA 跟其他多糖分离 ,并且测定了它的 分子量。但是 ,要测定 HA 的浓度需要 HA 跟其他物质完全分离 ,因此我们用两根柱 子(Shodex OHpak 和 B-806 and B-805合用来达到更高的分离度和覆盖不同的分子 量范围。色谱条件equipped with two Shodex OHpak columns (Showa Denko, Tokyo,Japan, B-806 and B-805 (50 cm x 8 mm I.D., a guard column of Shodex OHpak800P (50 mm x 6 mm I.D. The eluent was 0.02

3、 M sodium chloride,The flow-rate was 0.5 ml/min.对照品作者自制不同分子量的 HA(过特定的柱子或者透析 ,HA 的浓度是作者用咔唑法 测糖醛酸的方法测定。标准曲线的制备作者用不同分子量的自制 HA 做曲线,结果如下 :1:DNA,M=3 千1百万;2 :纯化的 HA,M=1 百万;3:纯化的 HA,M=61 万;4:纯化的 HA,M=33.5 万;5:纯化的 HA,M=25.7 万;结果表明:在分子量 60万和 20万之间是成线性关系的 ;作者同时进了 Pullulan (GPC 葡聚糖标准品 ,结果发现用上述曲线测出来的 Pullulan 分子

4、量跟实际的分子量有差别 ,说明 HA 的标准曲线应该用 HA 标准品校 正。结论这个结果证明了可用此方法同时测定生物样品中 HA 的分子量和浓度。然而 此色谱技术对于大于 1 百万分子量的 HA 却不能提供精确的分子量。文献 2 Analysis of Over 15 Million Dalton Polymers by Aqueous SEC Method用水性凝胶渗透色谱法分析超过 1500 万分子量的多聚体文献来源:SHODEX 公司网站下载文献摘要:这篇文章主要是 SHODEX公司介绍用 Shodex? OHpak SB -807 HQ 色谱柱来分析高分子量 HA（ 大于 100万,主要介绍了两个试验 :一.分别用 SB-807柱子和 SB-806柱子分析了 Mw=550 万的 HA,结果如下 （绿色 曲线为 806,红色为 807:结果:用806峰形不对称（拖尾,作者分析原因为 HA超出了 806的排阻限度 ,高分 子量的 HA 在同一时间流出的结果 ;807 峰形对称 ,可以准确的表示出样品的分子量 分布,同时,807的大颗粒可以保护潜在的剪切降解。.用 SB-807分析了三