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文档简介
1、胶体金技术的发展原理及制备方法 1971年Faulk和Taylor首先将胶体金应用于免疫细胞化学研究,1974年Romano建立 了间接免疫金染色法,从此胶体金作为新型的免疫标记技术得到迅速发展。 由胶体金标记技术发展起来的胶体金免疫快速诊断技术主要有两种:快速斑点免疫金渗 滤法和胶体金免疫层析法。后者具有操作简便(浸入液体中就行)、快速(全程510分钟 搞定)、无需仪器设备(结果目测就0K)、试剂稳泄、成品易于保存(保质期12年)等 优点,是科学研究和临床诊断的有力工具。 胶体金试纸条 胶体金试纸卡 胶体金(colloidal gold)即胶体状态的金单质,因为其单质粒径非常小可以分散于溶
2、液中形成胶体,故划胶体金。胶体金的常规制备方法是用还原剂还原氯金酸(HAuCh,橘黄 色晶体,易潮解,氯金酸合成见下图)里的金元素形成金胶体颗粒。这种胶体颗粒在碱性环 境下带上负电荷,可与蛋白质的正电荷基团牢固结合,对蛋白进行标记,用于后续的检测, 如制成胶体金试纸条(卡)进行物质的检测。 王水(Aqua regia) V浓盐憨:V浓硝醸=3:1 人 Au+HNO3+4HCI=HAuCI4+NO t +2H2O 氯金酸 氯金酸制备反应式 还原氯金酸的化合物很多,通常我们选择柠掾酸三钠(WGHQ2比0) 当用1%柠檬 酸三钠还原100 mL 0.01%金氯酸时,不同体积比可以得到不同粒径和颜色的
3、胶体金哦! 制备胶体金步骤简单(见下图),重点是制备过程所用到的材料都必须是彻底淸洁的。 例如水至少是双蒸水,玻璃棒、玻璃容器等要酸洗后冲洗干净并且最好是硅化的,制备好的 胶体金可以加入0. 02% NaNs在洁净玻璃容器内长期存放。 胶体金的制备方法 适合于胶体金试纸条(卡)的胶体金粒径在2040 mn之间为宜,制备的胶体金溶液呈 红色,胶体金被宜于试纸条(卡)的样品垫下游。当液体样品滴加后,液体溶解胶体金并带 动其与样品中的抗原(抗体),在硝酸纤维素膜的毛细作用下从一端慢慢渗移到吸收垫一端, 利用抗体/抗原特异性结合及胶休金的显色(红色)反应,可以检测抗原/抗体存在与否。 胶体金试纸条(卡)主要分为双抗夹心法和竞争法两类,前者适合检测大分子物质,后者适 合检测小分子物质。两种试纸条(卡)的原理见下图: 可复制.编制.期待你的好评与关注! 抗原 抗体对;恃异性抗体1 (金标) 丫抗金标折休 T抗体对:恃异性抗悴2 双抗体夹心法(检测抗履) 双抗原夹心法检测抗体 ).金标抗体 丁抗金标妹体c嶠联抗原 T绶 抗原(小分子 抗原竞争法检测小分子物质) 除了这两种常规
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