第十一单元第三章病毒二

1、第十一单元第三章病毒二 病病 毒毒 第十一单元第三章病毒二 感染宿主细胞后能在细胞内正常复制并引起宿主细胞迅感染宿主细胞后能在细胞内正常复制并引起宿主细胞迅 速裂解的噬菌体。速裂解的噬菌体。 感染宿主细胞后，噬菌体基因组长期存在于宿主细胞感染宿主细胞后，噬菌体基因组长期存在于宿主细胞 内（整合于宿主的基因组上或以质粒形成独立存在），并内（整合于宿主的基因组上或以质粒形成独立存在），并 随宿主基因组的复制而同步复制，没有成熟噬菌体产生，随宿主基因组的复制而同步复制，没有成熟噬菌体产生， 不引起宿主细胞裂解的噬菌体。不引起宿主细胞裂解的噬菌体。 这种噬菌体与宿主之间的关系称为这种噬菌体与宿主之间的

2、关系称为溶源性（溶源性（lysogeny）。 凡能引起溶源性的噬菌体称为凡能引起溶源性的噬菌体称为温和噬菌体温和噬菌体，其宿主称为，其宿主称为 溶源菌溶源菌。 第三节第三节 噬菌体噬菌体 第十一单元第三章病毒二 温和噬菌体的存在形式有温和噬菌体的存在形式有3种：种： 游离态：游离态： 前噬菌体所携带的遗传信息由于受噬菌体本身编码的一种前噬菌体所携带的遗传信息由于受噬菌体本身编码的一种 特异阻遏物的阻遏作用而得不到表达，因此不进行特异阻遏物的阻遏作用而得不到表达，因此不进行DNA复复 制和蛋白质合成。但随宿主菌基因组的复制而同步复制。制和蛋白质合成。但随宿主菌基因组的复制而同步复制。 营养态：营

3、养态： 整合态：整合态： 指成熟后被释放并有侵染性的游离噬菌体粒子指成熟后被释放并有侵染性的游离噬菌体粒子 已整合到宿主基因组上的噬菌体核酸，称为已整合到宿主基因组上的噬菌体核酸，称为 前噬菌体（前噬菌体（prophage ）。）。 指前噬菌体经外界理化因子诱导后，脱离宿主指前噬菌体经外界理化因子诱导后，脱离宿主 核基因组而处于积极复制、合成和装配的状态核基因组而处于积极复制、合成和装配的状态 第十一单元第三章病毒二 （参见（参见P82） 整合于细菌染色体或以质粒整合于细菌染色体或以质粒 形成存在的温和噬菌体基因形成存在的温和噬菌体基因 组称做组称做原噬菌体（原噬菌体（prophage） 细胞

4、中含有以原噬菌体状态存在的细胞中含有以原噬菌体状态存在的 温和噬菌体基因组的细菌称做温和噬菌体基因组的细菌称做溶源溶源 性细菌（性细菌（lysogenic bacteria） 第十一单元第三章病毒二 第十一单元第三章病毒二 第十一单元第三章病毒二 噬菌体的的溶源性反应：噬菌体的的溶源性反应： 基因组基因组 的表达的表达 与复制与复制 存在着存在着 强烈的强烈的 时序性时序性 噬菌体基因组有噬菌体基因组有40多个基因，大多数基因根据功能不同聚集多个基因，大多数基因根据功能不同聚集 在一起，分别涉及头部合成、尾部合成、溶源性及调控、在一起，分别涉及头部合成、尾部合成、溶源性及调控、DNA 复制和细

5、胞裂解。复制和细胞裂解。 第十一单元第三章病毒二 第十一单元第三章病毒二 3. 溶源菌（溶源菌（lysogen或或 lysogenic bacteria） 含有含有噬菌体基因组的大肠杆菌，表示：噬菌体基因组的大肠杆菌，表示：E. coli K12() 溶源菌的特性：溶源菌的特性： 第十一单元第三章病毒二 第十一单元第三章病毒二 第十一单元第三章病毒二 第四节第四节 真核细胞病毒真核细胞病毒 主要参考两方面的特征主要参考两方面的特征: 形态学特征、核酸特征形态学特征、核酸特征 与噬菌体基本相同，其复制可以分成六个阶段：与噬菌体基本相同，其复制可以分成六个阶段：吸吸 附附、侵入和脱壳侵入和脱壳，病

6、毒核酸的复制病毒核酸的复制，病毒外壳的合成与病毒外壳的合成与 装配装配，最后是，最后是成熟病毒的释放成熟病毒的释放。 第十一单元第三章病毒二 (1)随机碰撞而接触（静电引力或氢键）随机碰撞而接触（静电引力或氢键） 可逆吸附，无特异性（可逆吸附，无特异性（） (2)病毒吸附蛋白与细胞受体的结合病毒吸附蛋白与细胞受体的结合 特异性，不可逆吸附，特异性，不可逆吸附， 第十一单元第三章病毒二 动物病毒：动物病毒： 3种侵入方式种侵入方式 无包膜病毒只有核酸注入细胞质中；无包膜病毒只有核酸注入细胞质中； 大多数包膜病毒或部分无包膜大多数包膜病毒或部分无包膜 病毒通过细胞的内吞功能病毒通过细胞的内吞功能

7、病毒包膜与细胞质病毒包膜与细胞质 膜的融合膜的融合； 第十一单元第三章病毒二 动物病毒存在不同的结构类型和不同的侵入方式，动物病毒存在不同的结构类型和不同的侵入方式， 其脱壳过程也较复杂。其脱壳过程也较复杂。 病毒的毒粒消失，失去原有的感染性，进入潜隐期。病毒的毒粒消失，失去原有的感染性，进入潜隐期。 第十一单元第三章病毒二 DNA复制：复制：通常在宿主细胞核完成，也有一些病毒的基因通常在宿主细胞核完成，也有一些病毒的基因 组在细胞质中复制组在细胞质中复制(如痘病毒如痘病毒)。早期。早期mRNA通常由宿主的酶以通常由宿主的酶以 病毒病毒DNA为模板进行转录，仍有例外情况，如痘病毒利用自身为模板

8、进行转录，仍有例外情况，如痘病毒利用自身 的聚合酶合成的聚合酶合成mRNA。 第十一单元第三章病毒二 RNA的复制：的复制：在宿主细胞基质中进行的。在宿主细胞基质中进行的。 单链单链RNA病毒通常将病毒通常将ssRNA转变为复制型转变为复制型dsRNA，指导合成新的病毒，指导合成新的病毒 RNA基因组。基因组。 双链双链RNA病毒一般包含多条不同的病毒一般包含多条不同的dsRNA，RNA要与特定蛋白结合形要与特定蛋白结合形 成一个复合体，在复合体中复制形成一个双链基因组。成一个复合体，在复合体中复制形成一个双链基因组。 第十一单元第三章病毒二 反转录病毒核酸的复制：反转录病毒核酸的复制：在其它

9、病毒也显著不同。形成在其它病毒也显著不同。形成 的的dsDNA进行环化，然后整合到宿主细胞染色体上，之进行环化，然后整合到宿主细胞染色体上，之 后病毒核酸才开始增殖，或转录和合成能使细胞肿瘤化后病毒核酸才开始增殖，或转录和合成能使细胞肿瘤化 的蛋白。的蛋白。 第十一单元第三章病毒二 晚期晚期mRNA指导衣壳蛋白的合成，衣壳蛋白的自发指导衣壳蛋白的合成，衣壳蛋白的自发 装配过程与噬菌体的装配过程类似。装配过程与噬菌体的装配过程类似。 装配在细胞质中进行。在装配过程中，空的前衣壳装配在细胞质中进行。在装配过程中，空的前衣壳 首先形成，然后核酸以某种未知的方式插入衣壳中。首先形成，然后核酸以某种未知

10、的方式插入衣壳中。 有包膜病毒的衣壳的装配通常与无包膜病毒相同。有包膜病毒的衣壳的装配通常与无包膜病毒相同。 第十一单元第三章病毒二 无包膜病毒粒子和有包膜病毒粒子释放的机制是不同的。无包膜病毒粒子和有包膜病毒粒子释放的机制是不同的。 包膜病毒的释放与包膜的形成通常是并行的，宿主细胞包膜病毒的释放与包膜的形成通常是并行的，宿主细胞 可以在一段时间里持续释放病毒粒子。可以在一段时间里持续释放病毒粒子。 病毒编码的蛋白质病毒编码的蛋白质 与细胞膜融合，然与细胞膜融合，然 后在释放核衣壳的后在释放核衣壳的 同时，细胞膜以出同时，细胞膜以出 芽的形式形成病毒芽的形式形成病毒 包膜。包膜。 无包膜病毒通

11、常是通过裂解宿主细胞而释放的。无包膜病毒通常是通过裂解宿主细胞而释放的。 第十一单元第三章病毒二 有包膜病毒的装配与释放有时有包膜病毒的装配与释放有时 也是同时完成的。也是同时完成的。 第十一单元第三章病毒二 主要依据形态学特征主要依据形态学特征：(很多植物病毒具有螺旋型衣很多植物病毒具有螺旋型衣 壳壳 ，多数植物病毒衣壳是由一种类型的蛋白质组成的，多数植物病毒衣壳是由一种类型的蛋白质组成的) 几乎所有的植物病毒都是单链或双链的几乎所有的植物病毒都是单链或双链的RNA病毒，病毒， 极少数是极少数是DNA病毒。病毒。 第十一单元第三章病毒二 通过因人为地或自然的机械损伤所形成的微伤口进入通过因人

12、为地或自然的机械损伤所形成的微伤口进入 细胞；或者靠携带有病毒的媒介，主要靠是有吮吸式口器细胞；或者靠携带有病毒的媒介，主要靠是有吮吸式口器 的昆虫取食将病毒带入细胞。的昆虫取食将病毒带入细胞。 +RNA 翻译翻译 RNA复制酶复制酶RNA(ds) +RNA 其单链其单链RNA为正链，可作为为正链，可作为 mRNA指导噬菌体蛋白合成指导噬菌体蛋白合成 组装成噬菌体组装成噬菌体 第十一单元第三章病毒二 病毒粒子整个装配过程高度有序。在病毒粒子整个装配过程高度有序。在 衣壳蛋白和衣壳蛋白和RNA基因组合成完毕后，基因组合成完毕后， 衣壳粒靠拢，衣壳蛋白与衣壳粒靠拢，衣壳蛋白与TMV RNA 同时从

13、专一的装配起始位点开始装配。同时从专一的装配起始位点开始装配。 衣壳粒不断地以螺旋方式装配，形成衣壳粒不断地以螺旋方式装配，形成 一个长杆状衣壳。随着杆的延长，一个长杆状衣壳。随着杆的延长， RNA也螺旋形盘绕于衣壳的中间通道也螺旋形盘绕于衣壳的中间通道 内，并在末端形成环状结构。内，并在末端形成环状结构。 增殖产生的子代病毒或病毒核酸可通过病毒编码的增殖产生的子代病毒或病毒核酸可通过病毒编码的 运动蛋白（运动蛋白（movement protein）与胞间连丝的相互作用）与胞间连丝的相互作用 从受染细胞进入邻近细胞。从受染细胞进入邻近细胞。 第十一单元第三章病毒二 依据病毒是否能感染昆虫并在其

14、体内繁殖以及是否以依据病毒是否能感染昆虫并在其体内繁殖以及是否以 昆虫为主要宿主，可把病毒分为昆虫为主要宿主，可把病毒分为7个科：个科： 杆状病毒科、杆状病毒科、 虹彩病毒科、虹彩病毒科、 呼肠弧病毒科、呼肠弧病毒科、 痘病毒科、痘病毒科、 细小病毒科、细小病毒科、 微小核糖核酸病毒科、微小核糖核酸病毒科、 弹状病毒科弹状病毒科 最重要的最重要的3 3个科个科 第十一单元第三章病毒二 很多昆虫的感染伴随着细胞内包涵体的形成。根据很多昆虫的感染伴随着细胞内包涵体的形成。根据 包涵体的形状和形成位置可将病毒分为三类：颗粒体病包涵体的形状和形成位置可将病毒分为三类：颗粒体病 毒、细胞质多面体和核心多

15、面体病毒。毒、细胞质多面体和核心多面体病毒。 颗粒体病毒：在细胞质内形成的颗粒状蛋白包含体颗粒体病毒：在细胞质内形成的颗粒状蛋白包含体 多面体病毒：在被感染细胞的细胞核或细胞质中形成多面体包含体。多面体病毒：在被感染细胞的细胞核或细胞质中形成多面体包含体。 包涵体的成分是蛋白质，其内包裹一个或多个病毒粒包涵体的成分是蛋白质，其内包裹一个或多个病毒粒 子。多面体病毒粒子对高温、低子。多面体病毒粒子对高温、低pH和多种化学物质有耐受和多种化学物质有耐受 力，但当接触到昆虫肠中的碱性物质后，包含体就会溶解，力，但当接触到昆虫肠中的碱性物质后，包含体就会溶解， 释放出病毒粒子，随后感染昆虫的中肠细胞。

16、释放出病毒粒子，随后感染昆虫的中肠细胞。 第十一单元第三章病毒二 第一，昆虫病毒只攻击无脊椎动物，有很强的宿主第一，昆虫病毒只攻击无脊椎动物，有很强的宿主 专一性，因此相对安全可靠。专一性，因此相对安全可靠。 第二，由于包含体对病毒具有保护作用，当散布到第二，由于包含体对病毒具有保护作用，当散布到 环境中这些病毒粒子有较长的保存期和较高环境中这些病毒粒子有较长的保存期和较高 的存活率。的存活率。 第三，这些病毒粒子在昆虫的幼虫组织内能够达到第三，这些病毒粒子在昆虫的幼虫组织内能够达到 很高的浓度（每只幼虫含有高达很高的浓度（每只幼虫含有高达1010个病毒粒个病毒粒 子），因此非常适合商业生产。

17、子），因此非常适合商业生产。 第十一单元第三章病毒二 大多数真菌病毒来自高等真菌，如青霉菌属和曲霉菌大多数真菌病毒来自高等真菌，如青霉菌属和曲霉菌 属，一般包含有双链属，一般包含有双链RNA，真菌病毒大多是具有潜，真菌病毒大多是具有潜 伏性的病毒，该病毒在宿主体内可诱发植物疾病。伏性的病毒，该病毒在宿主体内可诱发植物疾病。 低等真菌的病毒知之甚少，在研究过的少量病毒中，低等真菌的病毒知之甚少，在研究过的少量病毒中， 含有含有dsRNA和和dsDNA基因组。与高等真菌的病毒不基因组。与高等真菌的病毒不 同，低等真菌病毒的繁殖都伴随着宿主损伤和裂解。同，低等真菌病毒的繁殖都伴随着宿主损伤和裂解。

18、真核藻类的病毒只有少数被分离出来，目前所有研究真核藻类的病毒只有少数被分离出来，目前所有研究 过的这类病毒都具有过的这类病毒都具有dsDNA基因组和多面体结构衣基因组和多面体结构衣 壳。壳。 第十一单元第三章病毒二 第五节第五节 亚病毒亚病毒 类病毒类病毒 拟病毒（卫星病毒）拟病毒（卫星病毒） 朊病毒朊病毒 自然界中一些只含有核酸或只含有蛋白质的分子自然界中一些只含有核酸或只含有蛋白质的分子 病原体，被称为亚病毒。病原体，被称为亚病毒。 亚病毒亚病毒 第十一单元第三章病毒二 一、类病毒（一、类病毒（viroids） 1.定义：定义： 只含只含RNA组分、专性活细胞内寄生的分子病原体。组分、专性

19、活细胞内寄生的分子病原体。 2.与其它病毒不同点：与其它病毒不同点： 没有衣壳；没有衣壳； 闭合闭合ssRNA (250-370bp)； 碱基配对的杆状区与未配对的环状区相间排列（棒状闭合环状分子）碱基配对的杆状区与未配对的环状区相间排列（棒状闭合环状分子） 不作不作mRNA指导蛋白质合成；能在宿主细胞内自我复制。指导蛋白质合成；能在宿主细胞内自我复制。 3.致病性：致病性： 马铃薯纺锤形块茎病，柑橘裂皮病马铃薯纺锤形块茎病，柑橘裂皮病 第十一单元第三章病毒二 二、拟病毒（二、拟病毒（virusoids） 拟病毒：一类包裹在真病毒粒子中的有缺陷的亚病毒。拟病毒：一类包裹在真病毒粒子中的有缺陷的

20、亚病毒。 辅助病毒：包裹拟病毒的真病毒被称为辅助病毒。辅助病毒：包裹拟病毒的真病毒被称为辅助病毒。 拟病毒特点：拟病毒一般不具有衣壳，基因组为拟病毒特点：拟病毒一般不具有衣壳，基因组为RNA或或DNA ，多数只含，多数只含300-400个核苷酸，是辅助病毒的个核苷酸，是辅助病毒的“ 卫星病毒卫星病毒”（所以又称卫星病毒），不能独立复（所以又称卫星病毒），不能独立复 制，必须依赖辅助病毒的协助。拟病毒和辅助病制，必须依赖辅助病毒的协助。拟病毒和辅助病 毒基因组没有同源性。毒基因组没有同源性。 辅助病毒的复制不需要拟病毒的参与辅助病毒的复制不需要拟病毒的参与 第十一单元第三章病毒二 三、朊病毒（三

21、、朊病毒（prion）又称又称“普利昂普利昂”或或“蛋白侵染子蛋白侵染子” 1.定义：定义： 一类不含核酸的侵染性蛋白质分子，通常称为一类不含核酸的侵染性蛋白质分子，通常称为PrP(prion protein) 2. 致病性：致病性： 引起人与动物的致死性引起人与动物的致死性中枢神经系统疾病中枢神经系统疾病 羊瘙痒病羊瘙痒病 牛海绵状脑病（疯牛病）牛海绵状脑病（疯牛病） 库鲁氏病库鲁氏病 克雅氏病克雅氏病 格格-史氏综合症史氏综合症 第十一单元第三章病毒二 3. 朊病毒致病的可能机制朊病毒致病的可能机制 推测其致病机制是：推测其致病机制是： prp存在两种类型，即在患病组织中的存在两种类型，即

22、在患病组织中的prpsc（致病型）和（致病型）和 正常脑组织与患病组织中都存在的正常脑组织与患病组织中都存在的prpc（细胞型）。（细胞型）。 两种蛋白的一级结构相同，但二级结构有很大差异，细胞两种蛋白的一级结构相同，但二级结构有很大差异，细胞 型型prp对蛋白酶敏感，无聚集能力，而致病型对蛋白酶敏感，无聚集能力，而致病型prp对蛋白酶有对蛋白酶有 一定抗性，且可聚集成纤维状组织。一定抗性，且可聚集成纤维状组织。 动物体内如果未被朊病毒感染，通常细胞型动物体内如果未被朊病毒感染，通常细胞型prp不会自发不会自发 转变为致病型转变为致病型prp，而当被朊病毒感染后，患者体内的细胞型，而当被朊病毒

23、感染后，患者体内的细胞型 prp会发生构象转变而成为致病型会发生构象转变而成为致病型prp。 朊病毒感染会导致多拷贝的朊病毒蛋白质的产生，是否朊病毒感染会导致多拷贝的朊病毒蛋白质的产生，是否 违背违背“中心法则中心法则”？ 第十一单元第三章病毒二 朊病毒的发现与思考朊病毒的发现与思考 1） 朊病毒感染会导致多拷贝的朊病毒蛋白质的产生，是否违朊病毒感染会导致多拷贝的朊病毒蛋白质的产生，是否违 背背“中心法则中心法则”？ 3）蛋白质折叠与功能的关系，是否存在折叠密码？）蛋白质折叠与功能的关系，是否存在折叠密码？ 2）蛋白质是否可以作为遗传物质？）蛋白质是否可以作为遗传物质？ prion是生命的一个

24、特例？还是仅仅为表达调控的一种形式？是生命的一个特例？还是仅仅为表达调控的一种形式？ 第十一单元第三章病毒二 1. 噬菌体的侵染与异常发酵噬菌体的侵染与异常发酵 发酵周期延长；发酵周期延长； 碳源消耗缓慢；碳源消耗缓慢； 发酵产物形成缓慢或根本不形成；发酵产物形成缓慢或根本不形成； 发酵液产气泡，粘稠，拉丝；发酵液产气泡，粘稠，拉丝； OD值不升或下降；值不升或下降； 革氏染色不均匀，菌体少，有碎片；革氏染色不均匀，菌体少，有碎片； pH值变化大，明显上升；值变化大，明显上升； 用敏感菌作平板检查时，出现大量噬菌斑；用敏感菌作平板检查时，出现大量噬菌斑； 电镜观察，可见大量噬菌体粒子。电镜观察

25、，可见大量噬菌体粒子。 一、噬菌体与发酵工业一、噬菌体与发酵工业 第十一单元第三章病毒二 2. 噬菌体的分离与检查噬菌体的分离与检查 直接观察法（电镜）直接观察法（电镜） 双层平板法或液体法双层平板法或液体法 3. 预防噬菌体污染的措施预防噬菌体污染的措施 (1) 决不使用污染或有污染嫌疑的菌种，并经常轮决不使用污染或有污染嫌疑的菌种，并经常轮 换生产菌种换生产菌种; (2) 各种非生产菌液及时灭活各种非生产菌液及时灭活; (3) 生产设备定期清洗、灭菌生产设备定期清洗、灭菌; (4) 严格操作守则。严格操作守则。 (5) 严格保持环境卫生严格保持环境卫生; 第十一单元第三章病毒二 4. 已染

26、噬菌体后发酵过程应采取的措施已染噬菌体后发酵过程应采取的措施 (1) 加入少量的表面活性剂，如加入少量的表面活性剂，如0.10.2土温等，土温等， 抑制噬菌体吸附；抑制噬菌体吸附； (2) 加入少量的抗生素，如加入少量的抗生素，如12g/ml的四环素、的四环素、 氯霉素等，抑制噬菌体蛋白合成；氯霉素等，抑制噬菌体蛋白合成； (3) 加入一些金属螯合剂，如草酸钠等也对抑制噬加入一些金属螯合剂，如草酸钠等也对抑制噬 菌体的吸附有帮助。菌体的吸附有帮助。 (4) 如要继续发酵，应及时向发酵液中补加抗噬菌如要继续发酵，应及时向发酵液中补加抗噬菌 体的菌种。体的菌种。 (5) 如果是在发酵后期感染噬菌体

27、，应尽快将发酵如果是在发酵后期感染噬菌体，应尽快将发酵 液中的产品提取以减少损失。液中的产品提取以减少损失。 第十一单元第三章病毒二 二、噬菌体与基因工程二、噬菌体与基因工程 通过结构改造，可成为理想的基因工程的载体通过结构改造，可成为理想的基因工程的载体 作为基因工程载体的优点：作为基因工程载体的优点： (1)由于由于噬菌体基因组中约一半基因不是噬菌体生长和噬噬菌体基因组中约一半基因不是噬菌体生长和噬 菌斑形成所必需的，可被外源基因取代而不影响其生长菌斑形成所必需的，可被外源基因取代而不影响其生长 繁殖。繁殖。 (2)噬菌体能将其自身基因组与宿主基因组进行整合，可噬菌体能将其自身基因组与宿主基因组进行整合，可 使插入的外源基因随宿主基因共同复