各类鼻咽癌细胞株特性及来源

1、各类鼻咽癌细胞株特性及来源 CNE1 为鼻咽高分化鳞状细胞癌细胞系 ;CNE2、 HNE1 、HNE2 、HNE3、HONE1 为鼻 咽低分化鳞状细胞癌细胞系；5 一 8F为鼻咽低分化鳞状细胞癌，细胞系SUNE 1亚株，具有 高转移、高成瘤能力；6- 10B为鼻咽低分化鳞状细胞癌细胞系 SUNE-1亚株，具有高成瘤潜能, 不转移特性。C666-1为长期携带EB病毒基因的低分化鼻咽癌细胞株；HK-1为携带EB病毒 基因的高分化鼻咽癌细胞株 . NP69 为永生化鼻咽上皮细胞系，于 1XKsFM（keratinoeyte serum-free medium, KSFM）培养基 中,37C、5%CO

2、2、饱和湿度条件下培养，呈现鳞状上皮样、贴壁生长，具有正常鼻咽上皮的特 性。 CNE11 癌组织来源 病人王某某, 女, 58 岁, , 籍贯吉林省 ,中国医学科学院日坛医院住院号： 2382248.1975 年8月1 3日患者因头痛 耳鸣、 鼻衄等症状来院就诊。临床检查鼻咽部有菜花样肿物 , 肿瘤 已侵犯颅底和颅神经（川,IV，区刘）,双颈淋巴结转移,诊断为鼻咽癌。X光诊断为鼻咽 后壁软组织肿物符合鼻咽癌 , 颅底象见左侧翼状突外板可疑骨质破坏 ,鼻咽部肿物作活检 , 病理诊断为高分化鳞癌。 培养过程 在第12代时（培养后的 6个月）,在上皮样细胞培养中发现有少量梭形细胞。在有的培养 瓶中

3、, 梭形细胞逐渐增加。 在接种少量细胞的培养瓶中 ,有的全为上皮样细胞 , 有的全为梭形 细胞。选择全为上皮样的细胞传代，称CNE细胞株；全为梭形的细胞传代，称CNF细胞株 CNE细胞株容易形成空泡，不传代的老细胞，在显微镜下可见到有些细胞的胞浆突出，然后 脱落成死细胞，还有多核巨细胞。在这二株细胞，特别是CNF细胞的单层或多层细胞上有很 多圆形细胞 , 核大,浆少。在培养液中也有大量圆的脱落细胞。将培养液中的悬浮细胞接种 于培养瓶,细胞仍能贴瓶,生长出原来的上皮样细胞或梭形细胞。将CNE , CNF细胞和这二株 细胞的脱落细胞培养成单层后 , 不传代, 每周换液二次, 继续培养7 个月,未能

4、得到类淋巴 母细胞株，在培养过程中未见到肿瘤组织培养中常见到的成纤维细胞生长。 特性 CNE-2谷淑燕，赵文平，曾毅，唐慰平赵明伦邓惠华,李昆.从低分化鼻咽癌病人建立鼻咽癌上皮细 胞株J.癌症,1983,02:70-72+129-130. 组织来源和培养方法 组织取自鼻咽癌（W期）患者,林XX,63岁，男性,广东籍,活检组织病理检查为慢性鼻 咽炎,但同时负压吸引的鼻咽脱落细胞为低分化鳞状细胞癌 （图1）. 病人血清的E B病毒抗体和鼻咽脱落细胞的EBNA检测，病人血清的各种抗EB病毒抗 体的滴度分别为：VCA/IgG 1: 320 , EA IgG 1: 160, VCA/lgA 1: 40,

5、 EA/lgA1 : 5 ,抗EBNA 抗 体为1:160=鼻咽脱落细胞中发现成团的癌细胞呈 EBNA阳性 细胞株的EB病毒抗原 用抗补体免疫荧光试验检查CNE- 2细胞中各种EB病毒抗原。体外培养第3代细胞可见 EB NA阳性，胞核呈颗粒状明亮的荧光，细胞传至第11代后进行多次检查，EBNA均呈阴性。 经ludR或巴豆油、丁酸激活的细胞，检查EA、VCA也呈阴性。将细胞与类淋巴母细胞株HK-1 共同培养,观察EB病毒对上皮细胞的再感染，6天后上皮细胞的EBNA仍呈阴性。 HNE1、HNE2，HNE3和 HONE1 人体鼻咽癌上皮样细胞株和梭形细胞株的建立 J.中国科学，1978,01:113-118+121-124. 2 祝和成，姚开泰，李桂源等,4株鼻咽癌上皮细胞株建立及其生物学特性.湖南医科大学学 报.1992,06,17(2),103-107. 组织细胞培养及建株肿瘤组织 取自4倒男性鼻咽癌初诊患者，分别命名为HNE1、HNE2，HNE3和HONE1，其中HNE1 和H0NE1为EBV阳性，HNE2和HNE3为EBV阴性。病理诊断均为低分化鳞癌。 EBV抗原及EBV基因组分析EBNA检测结果发现.HNE i和HONE 1细胞30代以前均为 EBNA阳性，HNE2和HNE 3则为阴性。晚代HNE1和HONE1细胞的EBNA也逐渐转为阴性， 而从HONE1第5代细胞中克隆出