SYSMEX五分类血液分析仪XT-2000i检测原理及临床应用

1、sysmex五分类血液分析仪xt-2000i检测原理及临床应用,血细胞分析仪的发展简史,二分群时代：淋巴细胞、非淋巴细胞 三分群时代：（大细胞、中间细胞、小细胞） 五分类时代：淋巴、单核、中性粒、嗜酸粒、 嗜碱粒,五分类血球方法学概览,方法学 第一代：纯物理原理(cd-3700，se-9000) 激光、射频、电阻 第二代：物理+化学（sysmex sf-3000，） 酶染色、颗粒染色 特异性溶血 第三代：物理 +分子生物学（sysmex xt-1800i/xt-2000i） 分子生物学技术（dna、rna染色,内 容,xt-2000i检测报告组成 白细胞系统的检测原理和临床病例分析 红细胞系统

2、参数的临床意义 网织红细胞的参数 血小板系统参数的临床意义 标本采集的要求,xt-2000i- 规格,参数 30项 研究参数 2项（ig，ig） 处理速度: 80标本/小时 检测模式: 4种模式（cbc, cbc+diff cbc+ret,cbc+diff+ret 标本量: 手动进样: 85 ul 自动穿刺: 150 ul 末梢血预稀释进样：40ul+160ul稀释液,xt-2000i报告单的组成,一）2个直方图、4个散点图 （二） 30项数字结果： rbc、wbc、plt、hgb、hct、mcv、mch、mchc、rdw-sd、rdw-cv、mpv、pct、pdw、p-lcr、neu%/#、

3、mnon%/#、lym%/#、eo%/#、ba%/#、 ret %/#, irf, lfr, mfr, lfr,xt 分析流程,检测模块,分析原理,检测通道,图形,rbc/plt,wbc,鞘 流 电 阻 法,半导体激光 fcm,rbc/plt 通道,plt 直方图,参数,plt,hgb,hgb 通道,比色法,hgb,全 血 标 本,diff 通道,ret 通道,diff散点图,wbc# baso,ret plt-o irf,ret散点图,lymph mono neut+ba eo *ig - research,ret,半导体激光 fcm,wbc/ba 通道,wbc/ba 散点图,rbc 直方图

4、,rbc,only for xt-2000i,白细胞系统的检测原理和 临床病例分析,白细胞系统参数,diff散点图、wbc/baso散点图 ：白细胞总数 ：中性粒细胞 ：淋巴细胞 ：单核细胞 ：嗜酸性粒细胞 ：嗜碱性粒细胞 ：绝对值：百分数,半导体激光和流式细胞的应用,侧向散射光,rna/dna含量,细胞内部结构,细胞体积大小,前向散射光,侧向荧光,激光束,分光镜,wbc/baso 原理,步骤1: 吸入标本 通过 srv吸入标本血样和试剂 步骤2: 溶血 stromatolyser-fb使红细胞溶血 除嗜碱性粒细胞以外的wbc 收缩 步骤3: 分析 分析前向散射光和侧向散射光的散射图,baso

5、 试剂系统,baso,other wbc,rbc,hemolysed (acid, hypotonic solution,保持原形,脱浆收缩,溶血,wbc diff 分类通道原理,步骤1: 吸入 从 srv吸入血液和试剂 步骤2: 溶血 stromatolyser-4dl 溶解rbc - wbc膜被轻微损伤，打孔 (acid, hypotonic solution) 步骤3: 染色(rna and dna) stromatolyser-4ds 染色 染液: 荧光染料 ( polymethine dye) 步骤3: 分析 分析前向散射光和荧光的散点图,溶血 (wbc membrane is we

6、akly damaged,染色 rna dna,diff 试剂系统,blast原核细胞, ig.未成熟粒细胞,异常淋巴细胞 等,高荧光浓度,低荧光浓度,高荧光浓度,正常细胞,wbc分类-散点图（正常标本,淋巴,单核,中性,嗜酸,侧向荧光(rna ,dna,红细胞碎片,侧向散射光(内部结构,分类-散点图(异常标本,淋巴,单核,中性,嗜酸,侧向荧光(rna ,dna,红细胞碎片,侧向散射光(内部结构,异型淋巴,ig,核左移,出现幼稚粒细胞的病例,该病例为儿童急性粒细胞白血病（aml-m2），患儿因突发高热而前来就诊，首次血常规检查发现，外周血原始细胞占71%，幼稚红细胞占2%。,出现幼稚淋巴细胞的

7、病例,急淋（all）-l1,急淋（all）l1,红细胞系统参数,直方图 ：红细胞总数 ：血红蛋白浓度 ：红细胞压积 ：平均红细胞体积 ：平均血红蛋白量 ：平均血红蛋白浓度 ：红细胞体积分布宽度,三种直方图的典型变化- 缺铁性贫血的直方图,特点： 曲线波峰左移，峰底变宽， 显示小细胞不均一性,三种直方图的典型变化- 巨幼红细胞贫血治疗前的直方图,特点： 曲线波峰右移，波底增宽， 显示明显的大细胞不均一 性,三种直方图的典型变化- 轻型-海洋性贫血的直方图,特点： 小峰左移，峰底变窄， 典型的小细胞均一性贫血,红细胞体积分布宽度的临床意义,一、定义： 红细胞体积分布宽度（red blood cel

8、ls volume distribution width）是反映周围血红细胞体积异质性的参数，用所测单个红细胞体积的变异系数来表示（cv=sd/x也可用sd表示）。 rdw-sd指把直方图顶点的高度定为100%，自下而上高度为20%时的红细胞分布宽度；rdw-cv指假定红细胞直方图分布曲线为正规分布曲线时，把标准偏差除以mcv，再乘以100所得出的数值,红细胞体积分布宽度rdw的临床意义,缺铁性贫血与轻型地中海的鉴别诊断 有关缺铁性贫血的早期诊断与治疗 用于贫血的形态学分类(mcv/rdw,缺铁性贫血与轻型地中海贫血的鉴别,rdw是两者鉴别的参考指标： 1、ida患者rdw100%升高； 2、

9、轻型地中海贫血患者基本正常,缺铁性贫血的早期诊断,uchida对1648例学生进行了各项指标的观察， 结果显示： mcv rdw 正常人 （894fl）（12.7 0.7）% 隐性缺铁前期（894fl）（13.7 0.7）% 隐性缺铁期 (866fl）（14.0 1.5）% ida患者 79fl （15.6 1.7）,缺铁性贫血的治疗过程,贫血的形态学分类(mcv/rdw,ret 检测参数,dna/rna核酸荧光染色 参 数：ret, irf, lfr, mfr, hfr, plt-o,内置全自动ret分析及成熟度分类 激光染色法检测plt,ret 试剂系统,staining: ploymet

10、hine: rna oxazine: dna,ret,wbc,rbc,high level fluorescence,low level fluorescence,very high level fluorescence,reagent: retsearch ii (diluent + dye,fluorescence(rna,ret-散点图,forward scatter(volume,mfr,hfr,lfr,plt,rbc-o,ret,wbc,irf,网织红细胞检测的临床意义 ret，irf(mfr+hfr,ret是一个独立的监测骨髓造血功能恢复的参数 irf是评估造血功能恢复的可靠依据

11、irf是评估造血功能恢复比ret更敏感的指标 ret增高：表示骨髓造血功能旺盛。急性溶血性贫血，急性失血等明显增高。增生性贫血，骨转移等轻度升高。 ret减少：肾脏，内分泌疾病，溶贫再生危象，再生障碍性贫血，放化疗后等,plt-i,报告,plt-o 用于明显的病理性标本,plt-o,xt-2000i以电阻抗法plt-i为准 当出现异常标本时， xt-2000i会转换用光学法plt-o检测,plt-i/o 散射图,直方图(直流阻抗法,散射图(光学法,plt-i/plt-o 两种检测方法,plt-i: rbc/plt通道 电阻抗每次检测20-25万个细胞，而ret通道内激光法每次只能检测60000

12、个细胞，其中plt3000个 电阻抗法的plt数目的准确性与重复性比较好 plt-o: ret/plt-o通道 激光法对plt的形态鉴别能力强 异常标本中的小rbc、wbc碎片、或plt数目较少时，激光法能更准确地将plt鉴别出来,plt-i和plt-o转换的标准,红细胞低鉴别线rl(%)10% 血小板低鉴别线pl(%)9% 血小板高鉴别线pu(%)39% 血小板高鉴别线pu(%)23fl 和pu20% 存在细胞碎片 存在红细胞凝集 血小板高鉴别线pu%13%和plt35fl45% 和 plt-i#80 x109/l plt-i115,血小板系统参数,直方图 ：血小板计数 ：血小板体积分布宽度

13、 ：平均血小板体积 p c t：血小板压积 ：大血小板比例,血小板直方图的临床意义,在多种疾病中plt直方图均可发生改变，如：特发性血小板减少性紫癫，特点是血小板数量减少，巨大血小板增多，直方图表现为曲线峰右移，而窄峰图则常因plt减少所致。 影响因素： 曲线峰左移，可能存在细胞浆碎片； 曲线峰右移，常表示存在异常红细胞 （裂细胞或极端小的红细胞,p-lcr,参考值：0.13-0.43 体积超过12fl的plt占总plt的比率 对检测血小板凝集、与红细胞的重叠以及监视血小板造血功能等有意义,mpv,参考值：9.4-12.5 fl 是反映骨髓造血功能是否良好的指标。 用于病情观察：白血病化疗时，mpv增加是骨髓恢复的第一个征兆,mpv与plt联合检测的临床意义,标本采集要求,最佳血液标本静脉血,静脉血和末梢血因采血方式和部位的不同而 存在较大差别： 血小板plt：静脉血末梢血 白细胞wbc：静脉血末梢血 红细胞rbc：静脉血略末梢血 针刺采血： 皮肤刺破后，导致血小板形成红色血栓 活化血小板，使血小板聚集 同时在血管中间形成一运动迅速，成分含量高的液流,五分类血液分析仪标本采集要求,1、最好一次穿刺采血成功 2、使用封闭式真空注射器和厂家生产的 edta-k2抗凝管 3、采血后应立即颠倒混匀数次，使血液与抗 凝剂充分混合，防止血