生产、运输、存储质量管理

1、生殖发育与干细胞治疗工程技术中心管理 手册文件编号（规）-1001页号第1页共2页版次第一版第1次修改标题血液及生物组织质量标准管理规范批准人胡丽娜颁布日期2017年11月10日血液及生物组织质量标准管理规范一、用于细胞制剂生产的羊膜及脐带所对应的脐带血、骨髓及胚胎对应的外周血必须由医院出具合格的检测报告。血液检测项目至少包括表一所列检测项目。表一血液全检标准项目外周血脐带血血型ABO 血型需明确需明确RH 血型需明确需明确乙肝2对半乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）应为阴性应为阴性乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）需明确需明确乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）应为阴性应为阴性乙型肝炎病毒e抗体

2、（HBeAb）应为阴性应为阴性乙型肝炎病毒核心抗体（HBeAb）应为阴性应为阴性丙型肝炎病毒抗体（HCV-Ab）应为阴性应为阴性梅毒螺旋体抗体(TP-Ab)(1)应为阴性应为阴性人类免疫缺陷病毒抗体(HIV-Ab)应为阴性应为阴性巨细胞病毒抗体IgM (CMV-IgM)应为阴性EB病毒衣壳抗原IgM抗体(EBV-CA IgM)应为阴性EB病毒早期抗原IgM抗体(EBV-EA IgM)应为阴性二、羊膜组织评估及运输1) 评估：无菌采集的羊膜组织，使用一次性无菌无热原的塑料管盛放。盛放羊 膜组织所用的塑料管必须管盖旋紧、包装完整，无破损，无液体泄漏；羊膜组织 应为透明或半透明状态，略呈白色或粉红色

3、，应无胎粪污染、颜色变化等异常情 况。2) 运输：膜组织采集后选择合适的保温箱，放冰袋，冷藏运输，尽快与质量部进 行交接，时间控制在5小时之内。3) 初检不合格的样品按不合格品的标准管理规程管理。4.)血液检测报告、羊膜合格后方可用于生产。质量部负责统计检验结果及整理 报告，如遇结果不合格按不合格品的标准管理规程管理，及时通知相关部门生殖发育与干细胞治疗工程技术中心管理手册文件编号（规）-1002页号第1页共4页版次第一版第1次修改标题羊膜上皮细胞采集管理规范批准人胡丽娜颁布日期2017年11月10日羊膜上皮细胞采集管理规范为规范羊膜上皮细胞采集技术的临床应用，保证医疗质量和医疗安全，制 定本

4、规范。本规范适用于羊膜上皮细胞的采集、培养、存储、运输。羊膜上皮细胞的采集（一）医疗机构基本要求：采集羊膜上皮细胞的医疗机构应当保证羊膜上皮细胞来源合法，须为三级甲等医院产科（二）米集环境：1）剖腹产手术室：有固定的羊膜采集工作区；有配备相应的羊膜上皮采集器械及耗材。2）应急处理区：有相应的抢救设备，能够进行急症处理。3）有资料保存与传输设备 （三）人员基本要求：负责羊膜上皮细胞采集工作的医师有副主任医师以上专业技术职务任职资 格，有医院内 2 名以上符合羊膜采集技术人员要求的护士， 并有满足工作需要的 其他相关专业技术人员。（四）羊膜组织的要求：1）羊膜供体的要求：产妇需为健康剖腹产者，如有

5、传染病史（乙肝、丙肝、梅 毒、艾滋病等）则不予采集。2）羊膜的质量标准：要求提供与羊膜组织相对应的脐带血检验报告，报告内容及标准包括： ABO血型、Rh血型需明确。 乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg应为阴性 乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb需明确 乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg应为阴性 乙型肝炎病毒e抗体（HBeAb应为阴性 乙型肝炎病毒核心抗体（HBeAb应为阴性 丙型肝炎病毒抗体（HCV-Ab应为阴性 人类免疫缺陷病毒抗体（HIV-Ab）应为阴性 梅毒血清抗体检测（TP-Ab）应为阴性 EB病毒抗原IgM抗体应为阴性?巨细胞病毒抗体IgM （CMV-IgM）应为阴性（五）技术基本要求1）

6、采集脐血：以肝素抗凝管采集脐血（5ml/支采集2支，或10ml/支采集1支）， 用于血型及传染病学检测。2）采集羊膜 戴上无菌手套， 整个胎盘放置在无菌的区域。 将整个胎盘的粗糙面朝下附有脐 带的光滑面朝上， 使羊膜摊放在胎盘的表面上， 剪去脐带， 在胎盘表面切一个十 字形切口，但不能损及胎盘组织。 从最贴近胎盘组织的底层绒毛层处，由十字形切口中央 （胎盘中部） 开始剥离羊膜，将羊膜从胎盘上剥离开来。 将已剥离的羊膜放入包含羊膜组织存储液的无菌50ml 离心管中，密封保存。 采集单位对羊膜组织来源信息进行记录。3）羊膜的存储及运输 羊膜储存实行专人管理， 其他人员非经许可不得打开专用存储箱，

7、且箱内不得 存放无关的杂物。 采集好的羊膜时应及时存储在 2-8 C的专用箱中。箱内应当安放温度计，测量 温度范围需符合要求 羊膜液采集后到进入生产工序前应当保持全程冷链（2-8 r）0 羊膜运回制备中心后， 交接时应当检查羊膜运输箱温度是否符合要求， 储存羊 膜的离心管是否破损、标签是否完好，并填写相应记录0（六）其他管理要求1）羊膜上皮细胞来源合法，建立捐献者来源登记制度，保证羊膜上皮细胞来源 可追溯0不得通过羊膜上皮细胞采集谋取不正当利益， 不得泄漏羊膜上皮细胞捐 献者资料02）采集羊膜上皮细胞前履行告知程序，由捐献者签署知情同意书03）羊膜上皮细胞采集不应当因捐献羊膜上皮细胞而损害捐赠

8、者相应的正常生理 功能04）采集羊膜上皮细胞前对捐赠者进行必要的检查，防止患者因羊膜上皮细胞移 植感染其它疾病0 艾滋病病毒感染者或者艾滋病患者、 肝炎病毒携带者、 梅毒患 者等患有经血液传播疾病者和恶性肿瘤、 遗传性血液疾病患者等的羊膜上皮细胞 不得用于羊膜上皮细胞移植0 5）有完善的质量保障体系生殖发育与干细胞治疗工程技术中心管理手册文件编号（规）-1003页号第1页共2页版次第一版第1次修改标题羊膜上皮细胞存储管理规范批准人胡丽娜颁布日期2017年11月10日羊膜上皮细胞存储管理规范羊膜上皮细胞的存储（一）羊膜上皮细胞的存储要求1）用于保存羊膜上皮细胞标本、羊膜上皮细胞和试剂的冰箱及冷冻

9、箱不能用于 其它用途。保存羊膜上皮细胞的设备必须放在安全的地方， 存放地点由专人负责。2）液氮库应设置在通风良好的环境中，并有保证工作人员的安全防护措施。液氮库应有防止和处理液氮泄漏措施。3）在拿取羊膜上皮细胞时，必须尽量减少温度的变化。4）发生意外事故导致羊膜上皮细胞转移和变更存放地点时，必须有书面记载。（二）监控和报警系统1） 在气相中保存羊膜上皮细胞的容器必须有温度连续监控系统，并且至少每24 小时记录一次温度。2）液氮罐必须有保证液氮水平面的系统。标准操作规程中必须有明确规定。3）羊膜上皮细胞保存设备必须有连续报警系统4）报警系统应以声光电方式及时通知到相关管理人员。5）报警参数的设定

10、必须能使工作人员有足够的时间处理羊膜上皮细胞。6）必须定期检查报警系统的功能。检查记录必须保存，并应便于检查。生殖发育与干细胞治疗工程技术中心管理手册文件编号（规）-1004页号第1页共2页版次第一版第1次修改标题羊膜上皮细胞培养管理规范批准人胡丽娜颁布日期2017年11月10日羊膜上皮细胞培养管理规范羊膜上皮细胞的分离、培养及冻存（一）羊膜细胞的分离1）将羊膜组织以生理盐水反复清洗，去除残留血液及粘液。2）将羊膜置于胰酶中，37C温浴后震荡，使羊膜细胞从组织上脱落。3）去除羊膜组织，收集羊膜细胞，经过滤、清洗，将细胞重悬于培养基中。取样 计数，按照一定细胞密度接种于培养瓶，放入 37C, 5

11、%CO&养箱中培养。（二）羊膜细胞的培养及传代1）根据P0代细胞贴壁及增殖状态，每2-3天予以换液。2）当细胞增殖贴壁扩增基本完成时，细胞需传代或冻存。传代细胞经过生理盐 水清洗及胰酶消化、培养基终止消化后，计数，再按照一定密度接种到新的培养 瓶中，放入37C, 5%COt养箱中培养。（三）羊膜细胞的冻存: 1）细胞经清洗、消化及终止消化后，计数，离心去上清2）采用冷冻保护液，按照一定的细胞密度将细胞重悬后转入冻存管中，经程序降温后转入液氮长期保存。3） 羊膜上皮细胞必须使用符合标准的程控降温仪或-80 C冰箱进行冷冻降温4）冷冻的羊膜上皮细胞必须在专门的冷冻管中密封存储，并保存于专门的液氮罐

12、内。以上所有操作均需操作者记录相应的信息，经复核后将记录归档保存。生殖发育与干细胞治疗工程技术中心管理手册文件编号（规）-1005页号第1页共3页版次第一版第1次修改标题羊膜上皮细胞运输管理规范批准人胡丽娜颁布日期2017年11月10日羊膜上皮细胞运输管理规范羊膜上皮细胞的运输（一）冷冻羊膜上皮细胞的运输：1）同一羊膜上皮细胞库内的运输：在同一羊膜上皮细胞库内转运或使用冷冻的羊膜上皮细胞时，必须有安全转 运规程以保证羊膜上皮细胞的完整性和运送人的安全。2）羊膜上皮细胞库与其他机构间的运输 在运输冷冻羊膜上皮细胞的过程中，必须有安全运输规程以保证羊膜上皮细胞 的完整性和运送人的安全。 必须尽量缩

13、短羊膜上皮细胞在羊膜上皮细胞库与其他机构间的运输时间。必须具有备用运输计划，以防止羊膜上皮细胞运输中发生的紧急或意外情况。 保存在-135 C以下的低温羊膜上皮细胞的运输必须使用装有液氮的容器，容器内必须装有足量的液氮。保证即使超过预定到达时间 48小时，容器内温度仍能 保持在-135 C以下。 运输方式必须符合与运输此类物品相关的法规。 运输容器的标记必须符合与所使用的低温材料和运输生物物质有关的法规。 应对运输信息进行记录，并归档保存。 羊膜上皮细胞离开羊膜上皮细胞库后， 该份羊膜上皮细胞的有关资料应在系统 中消除。（ 二） 羊膜细胞制剂的运输：1）制剂运输时所需设备及仪器 运输箱：采用经

14、过验证证明保温性良好的运输箱。 无线监控器（温湿度、行踪）。2）胞制剂运输要求细胞制剂长途运输需低温保存，短途可常温保存。运输箱内温度不得低于2C,高于30C。每次运输过程的温度需保持相对稳定。须对细胞制剂运输过程 的温湿度及运行路线进行全程监控。3）无线监控器全程由电脑进行监控,由专人负责。若温度出现异常监控人员需 立即通知运输人员采取紧急处理措施。4） 运输结束细胞制剂交接前，运输人员需先确认运输过程温度是否在230C 允许范围。确认无误后方可进行细胞交接。5）运输过程温度监控记录，由专人定期归档保存。6）若出现温度偏差，及时处理，并形成温度偏差记录，及时上报7）无线监控器应定期校验生殖发

15、育与干细胞治疗工程技术中心管理手册文件编号（规）-1006页号第1页共2页版次第一版第1次修改标题羊膜上皮细胞制剂使用管理规范批准人胡丽娜颁布日期2017年11月10日羊膜上皮细胞制剂使用管理规范羊膜上皮细胞制剂属于生物组织制品类， 为保障使用安全及患者利益，在临 床使用过程中需严格遵守本规范。1、每份羊膜上皮细胞制剂都应附带血液指标检测结果（具体见表一），如 果未附带有血液指标检测结果则视为不合格产品，不能使用。2、患者在使用羊膜上皮细胞制剂前，均需完善相关血液指标检测，内容同表一。3、羊膜上皮细胞制剂应用于患者前应详细告知患者可能的风险和获益。4、羊膜上皮细胞制剂应用于患者前需对双人核对患

16、者信息、医嘱等资料，严格执 行三查七对。5、羊膜上皮细胞制剂应用于患者前需对提供的小样进行血液指标检测，结果无异常后方可使用。6、羊膜上皮细胞制剂应用完毕后，应再次对残留羊膜上皮细胞制剂进行血液指标 检测并保存装羊膜上皮细胞制剂的袋子。表一血液指标检测项目项目血型ABO 血型RH 血型乙肝2对半乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）乙型肝炎病毒表面抗体（HBsAb）乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）乙型肝炎病毒 e抗体（HBeAb）乙型肝炎病毒核心抗体（HBcAb ）丙型肝炎病毒抗体（HCV-Ab ）梅毒螺旋体抗体（TP-Ab ）人类免疫缺陷病毒抗体（HIV-Ab ）巨细胞病毒抗体IgM （CMV-

17、IgM）EB病毒衣壳抗原IgM 抗体（EBV-CA IgM ）EB病毒早期抗原IgM抗体（EBV-EA IgM）重医附二医院生殖发育与干细胞治疗工程技术中心细胞制剂申请单申请单位申请人患者姓名性别年龄科室及病区住院号ID号用途辅助治疗临床研究申请日期组织来源脐带骨髓胚胎羊膜细胞类型JC-MSCs CBMSCs OiRPC OiRPE ChAECs制剂规格50ml/ 袋O5ml/ 支O1ml/ 支C500 讪/ 支细胞数量X107，共袋X106，共支使用途径静脉滴注局部注射血管介入治疗其他备注治疗时间转换中心联系人联系电话医附二医院生殖发育与干细胞治疗工程技术中心品名：iCELL人羊膜上皮细胞（hAECs）制剂规格：姓名：性别：年龄：送达医院及科室：订单编号：批号：出库时间：送达时间：出库温度：送达温度：医院接收人员制剂运送人员：细胞制剂交接单重医附二医院生殖发育与干细胞治疗工程技术中心细胞制剂交接单品名：iCELLTM脐带间充质干细胞（UC-MSCs）制剂规格：ml/齐I姓名：性别：年龄：送达医院及科室：单编号：批号：库时间：送达时间：库温度：送达温度：院接收人员制剂运送人员：重医附二医院生殖发育与干细胞治疗工程技术中心细胞制剂交接单品名：iCELL骨髓间充