医学精品课件：第九章 肠杆菌科

1、第九章 肠杆菌科,蒋朋飞 温州医科大学基础医学院 病原生物与免疫学系 7A208 Tel: 86689910,寄居人和动物肠道中 一大群生物学性状相似的 革兰阴性杆菌 包括： 致病菌：伤寒沙门菌、志贺菌等 机会致病菌：大肠杆菌 由正常菌群转变来的致病菌：致病性大肠杆菌,形态结构相似 培养要求不高 生化反应活泼 抗原结构复杂 抵抗力不强 易发生变异,共 同 特 性,1. 形态结构相似,中等大小 G- 杆菌 无芽孢 大多有菌毛、鞭毛 少数有荚膜,生化反应： 常用SS培养基（选择培养基）分离细菌 乳糖发酵试验 SS培养基 非致病菌(大肠） + 有色大菌落(分解乳糖) 致病菌 (伤寒、痢疾） - 无色

2、透明小菌落(不分解乳糖) SS培养基: 基础培养基,乳糖(底物), 胆盐、煌绿(抑制非 致病菌),中性红(指示剂,乳糖发酵试验： 初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌,抗原：耐热性菌体抗原；细胞壁脂多糖，稳定， 属特异性，刺激机体产生IgM抗体 抗原：鞭毛蛋白，不耐热，失去后运动消失， 刺激机体产生IgG抗体 荚膜抗原（抗原）：多糖类物质，位于抗 原外围,4 抗原结构复杂,6.易变异,溶原性转换,生化反应变异,通过,引起,耐药性变异,毒力变异,转导,接合,H-O抗原及S-R菌落变异等,转化,第一节 埃希菌属,有6个种，其中大肠埃希菌（E.coli）最常见，重要的一个菌种 肠道中重要的正常菌群，出生

3、后数小时就进入肠道，终生伴随，为宿主提供具有营养作用的合成代谢产物 免疫力下降或侵入到肠道外组织器官， 成为条件致病菌，引起肠道外感染 有一些血清型大肠埃希菌具有致病性 作为水源、食物粪便污染的指标,一、生物学性状,G-菌 多有周鞭毛， 普通菌毛、性菌毛 致病性与菌毛有关,培养特性与生化反应,营养要求不高，普通平板，灰白色、圆形、光滑、中等大小的菌落；液体培养呈浑浊生长 生化反应活波，IMViC试验（吲哚、甲基红、VP、枸橼酸盐）结果、 发酵葡萄糖等，产酸产气 分解乳糖、硫化氢阴性、动力阳性，可与沙门菌、志贺菌区别,主要有O、H、K 抗原，血清学分型的基础,抗原血清学分型 超过170种 抗原鞭

4、毛抗原 56种 抗原抗原外层 菌毛抗原荚膜抗原 100种以上,抗原结构,二、致病性,黏附素: 黏附在泌尿道和肠道细胞 、致病物质 志贺毒素和 外毒素不耐热肠毒素和 耐热肠毒素a和b 溶血素A 其他：内毒素、III型分泌系统等,肠道外感染：化脓性感染和泌尿道感染最常见，属于内源性感染 （1）泌尿道感染 （2）败血症 （3）新生儿脑膜炎 胃肠炎：某些致病性血清型菌株引起，属外源性感染，食入污染的食物和水，主要有五种类型,所致疾病,五种引起胃肠炎的大肠埃希菌,1、肠产毒性大肠杆菌(enterotoxigenic E.coli, ETEC) 婴幼儿和旅游者腹泻的主要病原菌，症状从轻度腹泻到严重霍乱样腹

5、泻 致病物质 肠毒素：不耐热肠毒素(LT) LT-主要致病物质 耐热肠毒素(ST) STa 致病 定植因子(菌毛）：黏附作用，失去定植因子的菌株 不引起腹泻,肠毒素（LT、ST）的作用机制 LT：B亚单位与神经节苷脂GM1受体结合 A亚单位穿膜活化腺苷酸环化酶 ATP转化成cAMP，cAMP升高 水、电解质过度分泌，腹泻 LT与霍乱肠毒素氨基酸同源性达75% 一个A亚单位 ST的中间产物为cGMP 五个B亚单位,2.肠侵袭性大肠埃希菌(enteroinvasive E.coli, EIEC) 似菌痢，脓血便，有里急后重 致病机理 不产生肠毒素 靠侵袭力侵袭结肠粘膜上皮细胞，生长繁殖 导致组织破

6、坏，引起炎症、溃疡 血性黏液便,3.肠致病型大肠埃希菌(enteropathogenic E.coli, EPEC) 婴幼儿腹泻的主要病原菌 致病机理 不产生毒素，靠粘附于微绒毛，大量繁殖破坏肠粘膜微绒毛 黏膜上皮细胞结构和功能受损，导致腹泻,4、肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic E.coli, EHEC) 出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征的病原 污染食品是EHEC感染的重要传染源，如牛肉 致病物质是菌毛和毒素 产生志贺毒素（Stx）-细胞毒，破坏肠绒毛 选择性破坏肾小球内皮细胞-急性肾衰 临床表现: 轻重不一 10%为十岁以下患儿，有严重并发症(急性肾衰竭)，死亡率高 重要

7、血清型：O157：H7,5、肠集聚型大肠杆菌(enteroaggregative E.coli, EAEC) 引起婴儿持续性腹泻、脱水、偶有血便 致病物质：质粒编码的蛋白 致病机制：介导细菌聚集性黏附与肠粘膜细胞，阻 止液体的重吸收，导致腹泻,三、微生物检查,1.标本： 肠外感染 尿、血等 腹泻 粪便 2.分离培养与鉴定： 涂片染色镜检 （选择培养基）分离培养 生化鉴定 *尿路感染需计数细菌总数， 10万/mL,在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的 检测指标,3个大肠菌群/1L饮水 5个大肠菌群/100ml瓶装汽水、果汁,卫生学指标,大肠菌群数,37度24h内发酵产酸产气的肠道杆菌数,我国

8、的卫生标准,防 治,治疗：早期纠正体液平衡，抗生素治疗 预防：防止粪便污染 切断粪-口传播途径 疫苗：ETEC（肠产毒型E.coli)的菌毛抗原是关键抗原，动物实验已获成功 另：合成ST 与LT 非毒性亚单位，疫苗正在研制中,G-菌，球杆状 又称痢疾杆菌 是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌,第二节 志贺菌属,能分解葡萄糖，产酸不产气， 不分解乳糖,除宋内志贺菌,无鞭毛，无芽孢，有菌毛,生化反应,低于其他肠道杆菌，对酸和一般 消毒剂敏感,形态,对理化因素的抵抗力,一.生物学性状,无鞭毛区别于肠道杆菌，初步鉴别,SS培养基上为无色透明菌落,动力实验,抗原与分类：有K、O抗原，无H抗原,根据O抗原分类

9、,致 病 性,侵袭力：菌毛粘附肠粘膜M细胞，波及临近细 胞，生长繁殖-细胞坏死脓血便,加重局部和全身症状,外毒素（A群1型,细胞毒，与内毒素协同作用,致病物质,所致疾病,特点：病灶局限于结肠粘膜，一般不入血 病后免疫期短，也不巩固,所致疾病：细菌性痢疾 传染源:患者和带菌者,传播途径：粪口传播,急性细菌性痢疾 急性典型：发热、腹痛、脓血粘液便、里急后重 急性非典型：易误诊，导致带菌和慢性 中毒性痢疾：小儿，全身中毒症状（严重，死亡率高） 慢性细菌性痢疾：病程迁延两个月以上 带菌者：细菌定植在结肠，无症状，传染源,所致疾病,微生物学检查,及时送/暂用30%甘油缓冲水保存,SS平板（无色透明小菌落

10、,血清学反应（玻片凝集,明确诊断,分离培养,新鲜脓血便/肛拭,双糖培养基（生化反应,快速诊断,荧光菌球试验,协同凝集试验,预防,口服减毒活疫苗,治疗,多种抗生素可选择,但很易引起耐药性,防治原则,及时治疗患者，切断传播途径等 加强卫生管理,其中许多为人畜共患病,第三节 沙门菌属（Salmonella,一大群寄生在人与动物肠道中的G-杆菌,菌群菌型甚多，仅少数对人致病,引起肠热症的伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌等；引起食物中毒的鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌,生物学性状,1、形态与染色 G-杆菌 有周鞭毛;无芽胞、荚膜,2、培养特性与生化反应 普通平板无色半透明S型菌落，SS平板无色菌落

11、生化反应：不发酵乳糖和蔗糖 肠道致病菌 分离鉴定依据,四类肠道杆菌的生化反应: 代表种 动力 葡萄糖 乳糖 靛基质 H2S 尿素酶 埃希菌属 大肠埃希菌 + + + + - - 志贺菌属 痢疾志贺菌 - + - +/- - - 沙门菌属 伤寒沙门菌 + + - - -/+ - 变形杆菌属 变形杆菌 + + - + +,3、抗原构造 （1）O抗原：1、脂多糖，耐热 2、可刺激机体产生IgM （2）H抗原：1、蛋白质，不耐热 2、可刺激机体产生IgG （3）Vi抗原（强毒株），表面抗原：抗吞噬,4、抵抗力 不强，对热及一般消毒剂敏感 对氯霉素极敏感,致病性,侵袭力：. 菌毛黏附并侵入M细胞，吞噬细

12、胞 内生长繁殖 . 耐酸应答基因：耐胃酸 C. Vi抗原：抗吞噬 内毒素：沙门菌重要的毒力因子-内毒素效应 激活补体-产生炎症反应 肠毒素：如鼠伤寒沙门菌可产生肠毒素,1.致病物质,2、所致疾病,肠热症: 由伤寒沙门菌引起的伤寒、甲型副伤 寒沙门菌等引起的副伤寒 胃肠炎(食物中毒) 败血症 无症状带菌者,胆囊-肠道-粪排菌 皮肤-血栓出血-玫瑰疹 肾-尿 肝、脾-肿大 骨髓,伤寒和副伤寒的致病过程,伤寒和副伤寒杆菌,小肠上部粘膜,肠系膜淋巴结,固有层淋巴结,进入血液,再次进入血液,第一次菌血症,第二次菌血症,发热、不适、 全身酸痛,高热 相对缓脉 皮疹 肝脾肿大 白细胞减少,消化道,生长繁殖,

13、经胸导管,胆囊中 排出体外（粪便） 超敏反应: 引起肠壁淋巴结坏死 肠出血、穿孔 （注意饮食） 肾脏 随尿排出,典型的伤寒病程 34 周，症状相对较重 恢复期带菌者排菌 3周3月 长期带菌者 1年以上 重要传染源,2）急性胃肠炎（食物中毒） 最常见沙门菌感染，常为集体食物中毒 食用由鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌污染食物引起 发热、恶心、呕吐、腹痛、水样腹泻 血培养阴性，粪便培养阳性,3）沙门菌败血症 多见于儿童和免疫功能低下者 血培养阳性，粪便培养阴性 高热、寒战、厌食、贫血，菌可随血流导致脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、心内膜炎 （4）无症状带菌者 1的患者症状消失后年仍可在粪便中检出沙门

14、菌 细菌贮留在胆囊内,3、免疫性,依靠细胞免疫，增强了巨噬细胞杀灭细菌的功能；恢复机制靠细胞免疫 体液免疫（sIgA、抗O、抗Vi）：只能对胞外细菌有杀死或溶菌作用 可获一定免疫力，黏膜抗体形成局部免疫,三、微生物学检查,1、沙门菌的分离鉴定,第1周 血液 第2周 粪便 第3周 尿液 第13周 骨髓,肠热症,胃肠炎,败血症,粪便、呕吐物、可疑食物,血液,1）标本,2）分离培养和鉴定 血液、骨髓穿刺液 肉汤基 （增菌培养） 粪便、尿液、呕吐物 选择培养基 双糖铁培养基 SS琼脂平板 （分离培养） （纯分离及初步鉴定） 血清学鉴定 系列生化反应 动力试验,微生物学检查,血清学诊断,1、肥达试验（Widal试验,原理：用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌的H抗原与受检血清作凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。 用途：辅助诊断伤寒、副伤寒,肥达试验的结果判断,考虑正常人群抗体水平正常值：伤寒 1/80 1/160 有诊断价值 副伤寒 1/80 动态观察：