医学微生物学教学课件-张敏-第九章肠杆菌科第十章弧菌属

1、第九章 肠杆菌科(Enterobacteriaceae,一大群居住在人和动物肠道中生物学性状近似的 革兰阴性杆菌 属于肠杆菌科,至少有44个菌属，170个以上的菌种 多数是肠道的正常菌群,少数为致病菌，是人类肠传染病的最重要病原菌,乳糖发酵试验,共同特性,初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌,肠道致病菌,肠道非致病菌,不发酵乳糖,发酵乳糖,1、相似的形态染色 中等大小，G 杆菌， 多数有菌毛、鞭毛，少数有荚膜，全部无芽胞,2、营养要求不高,3、生化反应活泼,菌体抗原（O）：存在于脂多糖的（LPS）的最外层，具有属特异性，耐热。 鞭毛抗原（H）：存在与鞭毛蛋白，不耐热 荚膜抗原（K或Vi）：具有型特

2、异性,4、抗原构造复杂,不强,光滑型-粗糙型变异,抗原性变异,SR变异 HO变异,5、抵抗力,6、变异性,第一节 埃希菌属 Escherichia,是人类和动物肠道中的正常菌群 以大肠埃希氏菌（E.coli）最为重要 出生后数小时就进入肠道，并终生伴随,生物学性状,革兰阴性杆菌，有周身鞭毛。 发酵多种糖类，多数能发酵乳糖，产酸产气 IMViC试验为+ + - - 大肠杆菌血清型以O：K：H表示,正常菌群，一般不致病,某些带有致病基因的血清型，引起肠道感染,两大原因可以致病,细菌居住部位改变引起的肠外感染,如尿路感染最常见,1、条件致病,2、致病菌株,引起腹泻的大肠埃希菌,肠产毒型大肠埃希菌(e

3、nterotoxigenic E.coli, ETEC,婴幼儿和旅游者腹泻 致病物质 肠毒素enterotoxin heat labile enterotoxin(LT) heat stable enterotoxin(ST) 定植因子(菌毛,肠侵袭型大肠埃希菌(enteroinvasive E.coli, EIEC,似菌痢样，有脓血便，有里急后重 致病机理 侵袭结肠粘膜上皮并繁殖 细菌死亡后释放内毒素，引起炎症,肠致病型大肠埃希菌(enteropathogenic E.coli, EPEC,婴幼儿腹泻 致病机理 粘附和破坏肠粘膜微绒毛 上皮细胞排列紊乱，功能受损，导致腹泻,肠出血型大肠埃希菌

4、(enterohemorrhagic E.coli, EHEC,亦称为Vero毒素大肠埃希菌 血清型为 O157:H7 临床表现 轻重不一 10%小于十岁患儿，有严重并发症，死亡率高 致病因子 菌毛 毒素 Vero毒素 内毒素与溶血素,肠集聚型大肠埃希菌 (enteroaggregative E.coli, EAEC,婴儿持续性腹泻 致病因子 肠集聚耐热毒素（EAST） 菌毛 溶血素,在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的检测指标,在100ml饮用水中不得检出大肠菌群,卫生学指标,我国的卫生标准,微生物学检查方法,临床标本的分离培养与鉴定,能分解葡萄糖，产酸不产气， 不分解乳糖,（除宋内志贺

5、菌,第二节 志贺菌属 shigella,是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌,通称痢疾杆菌dysentery bacteria,无鞭毛，有菌毛,低于其他肠道杆菌，对酸敏感,形态,生化反应,抵抗力,抗原与分类,根据O抗原分类,致病物质,菌毛有利于菌粘附至肠粘膜,内毒素 肠粘膜通透性升高毒素吸收发热、神志障碍、休克 破坏肠粘膜炎症、溃疡、脓血粘液便 肠壁植物神经肠蠕动失调、痉挛腹痛、里急后重 内毒素血症,外毒素（A群、型） 志贺毒素 ST(VT) 毒素作用主要表现为上皮细胞的损伤，也可引起肾出血； 与内毒素协同作用，加重局部和全身症状,局部 （肠壁） 全身,1、侵袭力,2、毒素,所致疾病,急性细菌性痢

6、疾 急性典型：发热、腹痛、脓血粘液便、里急后重 急性非典型：易误诊，导致带菌和慢性 中毒性痢疾：小儿 慢性细菌性痢疾：病程迁移两个月以上 带菌者,传染源:患者和带菌者,粪口传播,微生物学检查,及时送检/暂用30%甘油缓冲盐水保存,SS平板（无色透明小菌落,血清学反应（玻片凝集,最后诊断,分离培养,新鲜脓血便/肛拭,双糖培养基（生化反应,快速诊断,荧光菌球试验,协同凝集试验,第三节 沙门菌属（Salmonella,一大群人与动物肠道中的寄生菌,菌群菌型甚多，仅少数对人致病,常见沙门菌的主要生化特性,生物学性状,生化反应：不发酵乳糖 发酵葡萄糖产酸产气 （伤寒沙门菌外,沙门菌属细菌的抗原,菌体抗原

7、O： 伤寒沙门菌和副甲、肖氏沙门菌有交叉的抗原成分。如1，12抗原 刺激机体产生IgM 鞭毛抗原H：分第1相和第2相 第1相特异性高 刺激机体产生IgG,伤寒、希氏沙门菌的表面抗原与毒力有关,Vi抗原,抗原性弱，刺激机体产生短暂低效价抗体，伴随活菌一起存在,测定Vi抗体有助于检出带菌者,致病性与免疫性,侵袭力：Vi抗原,毒 素,内毒素 外毒素-肠毒素（鼠伤寒沙门菌,肠热症包括伤寒、甲型副伤寒、肖氏、希氏副伤寒 胃肠炎（食物中毒） 败血症 无症状带菌者,1、致病物质,2、所致疾病,胆囊-肠道-粪便排菌 皮肤-血栓出血-玫瑰疹 肾-尿液排菌 肝脾-肿大 骨髓 相对缓脉,伤寒和副伤寒的致病过程,伤寒

8、沙门和甲型副伤寒杆菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌,小肠上部粘膜,肠系膜淋巴结,固有层淋巴结,进入血液,再次进入血液,第一次菌血症,第二次菌血症,再次进入肠道,局部坏死,3、免疫性,以细胞免疫为主 免疫力牢固,微生物学检查,标本,伤寒和副伤寒 食物中毒 败血症 第1周取静脉血 可疑食物 血 第1-3周取骨髓液 呕吐物 第2周起取粪、尿 粪,SS平板,生化反应,血清学鉴定,微生物学检查,血清学诊断,原理：用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清作定量凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。 用途：辅助诊断伤寒，副伤寒,1

9、、肥达试验,肥达试验的结果判断,异常值：O凝集效价1：80； H凝集效价1：160； 副伤寒H凝集效价1：80 动态观察：恢复期效价增加4倍 诊断意义： O IgM,出现早，维持时间短 H IgG,出现迟，维持时间长 O高 H高 肠热症可能性大 O低 H低 排除 O高 H低 早期或有交叉反应的其它沙门菌感染 O低 H高 预防接种或曾患过肠热证,3、防治原则 口服减毒活疫苗（Ty21a,分离病原菌 查Vi抗体,2、带菌者检查,其他肠道杆菌,克雷伯菌属-医源性感染的重要细菌,变形杆菌-条件致病菌 食物中毒 多形性 迁徙生长现象 分解尿素 外斐试验,肠道杆菌生化反应,乳糖 葡萄糖 动力 硫化氢 尿素

10、酶 大肠杆菌 + - - 痢疾杆菌 - + - - - 伤寒杆菌 - + + +/- - 副伤寒杆菌 - + + - 变形杆菌 - + +,第11章 弧菌属（Vibrio,弧菌是一大群菌体短小，弯曲成弧形的革兰阴性菌,第一节 霍乱弧菌（V.cholerae,形态与染色,液体中 运动非常活泼 呈穿梭样 涂片中 排列整齐 呈鱼群状,革兰染色阴性 弧型或逗点状，单鞭毛,培养特性,耐碱不耐酸 在pH8.89.0的碱性蛋白胨水/碱性琼脂平板上生长良好,根据O抗原不同,抗原构造与分型,现已有155个血清群,其中O1群、O139群引起霍乱,根据表型差异,O1群霍乱弧菌可分为两个生物型,古典生物型,El To

11、r生物型,抵抗力,El Tor生物型和其它非O1群霍乱弧菌在外环境中的生存力较古典型为强,本菌不耐酸，不耐热,1霍乱肠毒素choleratoxin,致病物质,活性亚单位,5个B亚单位 ctxB,1个A亚单位 ctxA,与受体介导A亚单位进入细胞,B亚单位与小肠粘膜上皮细胞GM1神经节苷脂受体结合，介导A亚单位进入细胞,致病机理,A亚单位裂解为A1和A2两条多肽，A1亚单位发挥毒性作用,胞内cAMP，导致肠腺上皮细胞分泌功能亢进， 分泌Na+、K+、HCO3-和水，大量水和电解质在肠腔堆积，引起剧烈水样腹泻与呕吐,G蛋白 Gs 活化腺苷酸环化酶,A1,鞭毛运动,2 鞭毛、菌毛,普通菌毛,有助于细

12、菌穿过肠粘膜表面粘液层而接近肠壁上皮细胞,是细菌定居于小肠所必须的因子,上吐下泻：剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物）， 大量水分和电解质丧失 低容量性休克和肾衰竭（死亡率高达60,烈性肠道传染病，为我国的甲类法定传染病,传播途径,主要是通过污染的水源或食物经口摄入,所致疾病,传染源 患者及无症状感染者,临床表现,霍 乱,三、免疫性,感染霍乱弧菌后，机体可获得牢固免疫力 SIgA起主要作用 O1群的免疫对O139无保护作用,四、微生物学检查法,标本,直接镜检,分离培养,涂片见G-性弧菌，鱼群状排列 悬滴法观察细菌呈穿梭样运动,碱性蛋白胨水增菌 选择培养基为TCBS 玻片凝集反应,病人粪便，肛拭 （流行病学调查包括水样,五、防治原则,改善社区环境，加强水源管理,疫苗预防接种,及时补充液体和电解质,控制传染源,切断传播途径,提高易感者免疫力,治疗霍乱的关键,第二节 副溶血性弧菌 （V. para