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文档简介

1、宁夏银川一中 王学斌 ,相互学习 友好交流 共图发展,第一讲:课本常规实验,实验一 用高倍显微镜观察几种细胞,实验目的: (1)使用高倍显微镜观察几种细胞,比较不同细胞的异同点 (2)运用制作临时装片的方法 方法步骤: 第一步:转动反光镜使视野明亮 第二步:在低倍镜下观察清楚后,把要放大观察的物像移至视野中央 第三步:用转换器转过高倍物镜 第四步:观察并用细胞准焦螺旋调焦,先在低倍镜下找到观察的物象,将需要进一步放大的部位移到视野正中央,2、低倍镜观察,1、对光,转动转换器,使高倍镜到位。调节反光镜和光圈,使光照明亮,再微微调节细调节器,直到物象清晰,3、高倍镜观察,原核细胞,蓝藻细胞模式图,

2、胶质外鞘,类囊体,哺乳动物: 两面凹的圆 饼状,无 核,携氧能 力强。 两栖类和鱼 类:长椭圆 状,有核,实验二生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定,原理: (1)可溶性糖中的还原糖(葡萄糖、果糖 麦芽糖)+斐林试剂砖红色沉淀; (2)脂肪+苏丹橘黄色; 脂肪+苏丹红色 (3)蛋白质+双缩脲试剂紫色,含糖高颜色为白色(苹果、梨,1、还原性糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)的测定,选材,苹果切块、研磨、过滤、样液(备用,取样液、加斐林试剂、振荡、水浴加热 、观察现象,实验步骤,蓝色棕色砖红色,实验现象,制备样液,2、脂肪的测定,富含脂肪的种子(花生,选材,将子叶削成薄片染色(染液)漂洗(50%的酒

3、精)制成装片镜检,实验前浸泡34小时,步骤,实验现象,脂肪被苏丹III染成橘黄色(或被苏丹IV染成红色,生物组织中脂肪的鉴定,3、蛋白质的鉴定,选材,步骤,取组织样液、加双缩尿试剂A、再加双缩尿试剂B、观察颜色,实验现象,加双缩尿试剂A无明显变化,加入双缩尿试剂B后溶液变紫色,三、观察DNA和RNA在细胞中的分布,实验原理: (1)真核细胞的DNA、RNA分别分布在 。 (2)甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同, 。用甲基绿、吡罗红的 将细胞染色,可同时显示DNA和RNA在细胞中的分布。 (3)盐酸的作用:盐酸能改变细胞膜的通透性,加速 的跨膜运输;盐酸使染色体中的 分离,便

4、于DNA与 的结合,实验选材: 常用的材料: 人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶内表皮细胞(为避 免原有颜色的干扰,不可使用紫色表皮细胞) 取材要点 取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以避免装片中出现太多的杂质; 取洋葱表皮细胞时,尽量避免材料上带有叶肉组织细胞,安全要点 用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片均匀受热,以免破裂; 烘烤后的载玻片不要马上放入盛有稀盐酸的烧杯中,最好先自然冷却1分钟,主要步骤(以观察口腔上皮细胞为例) (1)取材 滴: 在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的NaCl溶液; 刮: 用消毒牙签在口腔内侧壁上轻轻地刮几下; 涂: 将

5、牙签上的碎屑涂抹在载玻片的生理盐水中; 烘: 将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干。 (2)水解 解: 将烘干的载玻片放入装有30ml质量分数为8%的盐酸的小烧杯中,进行材料的水解; 保: 将小烧杯放入装有30温水的大烧杯中保温5分钟,3)冲洗涂片 用缓缓的蒸馏水冲洗载玻片10秒钟; (4)染色 用2滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色5分钟; 吸去多余染色剂;盖上盖玻片。 (5)观察 在低倍物镜下,寻找染色均匀,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰; 转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况,实验四 用高倍镜观察线粒体和叶绿体 实验原理: 叶绿体的辨认

6、依据:叶绿体是绿色的,呈扁平的椭圆球形或球形;线粒体辨认依据:线粒体的形态多样,有短棒状、圆球状等;健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中线粒体呈现蓝绿色。 实验材料: 观察叶绿体时选用藓类或黑藻的叶(叶子薄而小,叶绿体清楚,可取整个小叶直接制片)。若用菠菜叶作实验材料,要取菠菜叶的下表皮并稍带些叶肉,因为表皮细胞不含叶绿体,方法步骤: 制片、低倍镜下找到叶片细胞、高倍镜下观察叶绿体的形态和分布;制作人的口腔上皮细胞临时装片、观察线粒体(蓝绿色的是线粒体,细胞质接近无色)。 注意:呈椭球体形的叶绿体在不同光照条件下可以运动,这种运动能随时改变椭球体的方向,使叶绿体既能接受较多光

7、照,又不至于被强光灼伤。叶子上面的叶肉细胞中的叶绿体比下面的多,这可以接受更多的光照。叶绿体的形态和分布都有利于接受光照,完成光合作用,五、通过模拟实验探究膜的透性,实验原理: 某些半透膜(如动物的膀胱膜、肠衣等),可以让某些物质透过,而另一些物质不能透过。或者(玻璃纸)水分子可以透过,而蔗糖分子因为比较大,不能透过。可以用半透膜将不同浓度的溶液分隔开,然后通过观察溶液液面高低的变化,来观察半透膜的透性,进而类比分析得出生物膜的选择透过特性,方法步骤: (1)取两个长颈漏斗,分别在漏斗口处封上一层玻璃纸。 (2)在A漏斗中注入硫酸铜溶液,B漏斗中注入蔗糖溶液,并加入少许红墨水,使其略呈红色。

8、(3)将两个漏斗分别浸入盛有蒸馏水的烧杯中,在两漏斗的液面处做标记,4)静置一段时间后,观察烧杯中蒸馏水颜色的变化及长颈漏斗的液面变化,并将观察到的结果设计表格进行记录,实验六 观察植物细胞的质壁分离和复原 实验原理: 当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用而失水,由于原生质层比细胞壁的收缩性大,原生质层就会与细胞壁分离; 当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用而吸水,外界溶液中的水分就通过原生质层进入到细胞液中,整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态,紧贴细胞壁,使植物细胞逐渐发生质壁分离复原,实验步骤: 1制作洋葱表皮的临时装片。 2观察洋葱细胞(液泡大

9、,呈紫色,原生质层紧贴着细胞壁)。 3从盖玻片的一侧滴入03g/ml的蔗糖溶液,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次,镜检。观察到:液泡由大变小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离。 4观察细胞质壁分离的复原现象。 从盖玻片的一侧滴入清水,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次,镜检。观察到:液泡由小变大,颜色由深变浅,原生质层恢复原状,正常细胞,初始质壁分离,显著质壁分离,观察植物的质壁分离与复原,实验七 探究影响酶活性的因素,探究实验的方法步骤: 提出问题作出假设设计实验实施实验分析与结论表达与交流。 实例1:温度对酶活性的影响 实验原理: 淀粉遇碘后,形成蓝色的复合物;淀粉酶可以使淀粉逐步水解成麦芽糖

10、和葡萄糖,麦芽糖和葡萄糖遇碘后不显色,方法步骤: 取3支试管,编号为、,然后分别注入2mL可溶性淀粉溶液;另取3支试管,编号为、1、1,然后分别注入1mL新鲜淀粉酶溶液;将对应的试管分别放入热水(约600C)、沸水和冰块中,维持各自的温度5min;分别将淀粉酶溶液注入相同温度下的淀粉溶液中,摇匀后,维持各自的温度5min;在3支试管中各滴入1-2滴碘液,摇匀后观察并记录这3支试管中溶液颜色变化,实例2:PH值对酶活性的影响,实验八 叶绿体色素的提取和分离 实验原理: 叶绿体中的色素是有机物,不溶于水,易溶于丙酮等有机溶剂中,所以用丙酮、乙醇等能提取色素;叶绿体色素在层析液中的溶解度不同,分子量

11、小的溶解度高,随层析液在滤纸上扩散得快,溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢,所以用层析法来分离四种色素。 实验材料:幼嫩、鲜绿的菠菜叶,四、实验步骤: 提取色素; 收集滤液; 制备滤纸条; 划滤液细线; 纸层析法分离色素; 观察实验结果,研磨要迅速、充分;滤液收集后,要及时用棉塞将试管口塞紧。 滤液细线要细且直,而且要重复划几次;层析液不能没及滤液线,实验九 探究酵母菌细胞呼吸的方式 实验目的: 了解酵母菌的无氧呼吸和有氧呼吸情况; 学会运用对比实验的方法设计实验 实验原理: 酵母菌是一种单细胞真菌,在有氧和无氧的条件下都能生存,属于兼性厌氧菌。方程式(略);CO2可使澄清石灰水变混浊,也可使

12、溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短,可以检测酵母菌培养CO2的产生情况;橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下与乙醇发生化学反应,变成灰绿色,方法步骤: 1配制酵母菌培养液:取20g食用酵母菌,分成两等份,分别放入锥形瓶A和锥形瓶B中 ,再分别向瓶中注入等量质量分数为5%的葡萄糖溶液 2检测CO2的产生:组装好实验装置(如图),让空气依次通过装置的3个锥形瓶。将装置放到适宜的环境中培养相同时间,观察石灰水的变化。 3检测洒精的产生:各取2mL酵母菌培养液的滤液,分别注入2支干净的试管中。分别滴加适量重铬酸钾的浓硫酸溶液并轻轻振荡,使它们混合均匀

13、,观察试管中溶液的颜色变化,如何控制有氧和无氧条件,有氧条件,无氧条件,B瓶应封口放置一段时间后,再连通盛有澄清石灰水的锥形瓶。这是为什么,实验十 观察细胞的有丝分裂 实验原理: 在高等植物体内,有丝分裂常见于根尖、芽尖等分生区细胞。由于各个细胞的分裂是独立进行的,因此在同一分生组织中可以看到处于不同分裂时期的细胞;染色体容易被碱性染料(如龙胆紫溶液)着色,通过在高倍显微镜下观察各个时期细胞内染色体(或染色质)的状态,就可判断这些细胞处于有丝分裂的哪个时期,进而认识有丝分裂的完整过程,实验步骤:根尖的培养;装片的制作(解离漂洗染色制片);观察 分生区细胞特点是:细胞呈正方形,排列紧密,有的细胞

14、正处于分裂期。在一个视野里,往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样,可以慢慢地移动装片,从邻近的分生区细胞中寻找。 制作好洋葱根尖有丝分裂装片的关键: ()解离时,要将根尖细胞杀死,细胞间质被溶解,使细胞容易分离;()压片时,用力的大小要适当,使细胞分散开,实验过程,取材(上午10时至下午2时、根尖2 3mm, 原因,解离(15盐酸95酒精、3 5min,目的,漂洗(清水、10min,目的,染色(龙胆紫或 、3 5min,制片(轻加压,前期,中期,模 式 图,观 察 图,后期,末期,模 式 图,观 察 图,琼脂块可以模拟不同大小的细胞,琼脂加热后可以混合酚酞,冷却固化后,NaO

15、H等物质又容易向内扩 散,NaOH和酚酞相遇,呈紫红色,容易观察,实验原理,实验十一 探究细胞大小与物质运输的关系,操作步骤,将含酚酞的琼脂块切成三块边长分别为3cm、2cm、1cm的正方体,将琼脂块分别放在烧杯内,加NaOH溶液淹没琼脂块,浸泡10min。不时翻动琼脂块,将琼脂块从NaOH溶液中取出。用纸巾吸干,切成两半。仔细观察切面的颜色变化,变成红色的部分代表NaOH扩散的深度,测量每一块上NaOH扩散后着色的浓度。记录测量结果,根据测量结果进行计算,并将结果填在记录表中,结论,细胞表面积与体积的关系限制了细胞的长大,琼脂块的表面积与体积之比随琼脂块增大而减少,NaOH扩散的体积与整个琼

16、脂块的体积之比随着琼脂块的增大而减少,实验十二 观察细胞的减数分裂,一实验目的: 通过观察蝗虫精母细细胞减数分裂固定装片,识别减数分裂不同的阶段染色体的形态、位置和数目,加深对减数分裂过程的理解。 二实验原理: 蝗虫的精母细胞进行减数分裂形成精细胞,再形成精子。此过程要经过两次连续的细胞分裂:减数第一次分裂和减数第二次分裂。在此过程中,细胞中的染色体形态、位置和数目都在不断地发生变化,因而可据此识别减数分裂的各个时期,有丝分裂和减数分裂图型比较,实验原理: 1进行正常有丝分裂的植物细胞,在有丝分裂后期,染色体的着丝点分裂,子染色体在纺缍丝的作用下分别移向两极,最终被平均分配到两个子细胞中去。

17、2用低温处理植物组织细胞,使纺缍体的形成受到抑制,以致影响染色体被拉向两极,细胞也不能分裂成两个子细胞,于是,植物细胞染色体数目加倍,实验十三 低温诱导染色体加倍,低温诱导,培养洋葱根:待洋葱根长出1cm左右时,放入冰箱的冷藏室内(40C)。诱导培养36h,固定形态,剪取根尖,放入卡诺氏液中固定,然后用酒精冲冼,解离漂洗染色制片,制作装片,观察,用显微镜观察,并寻找发生了染色体数目变化的细胞,方法步骤,调查法一般用于全面、准确地摸清某些问题的现状,以便于采取解决问题的措施。 调查报告的主要内容如下: 调查目的:调查什么、想获得哪些调查指标 调查方法:文献调查、直接调查;访问、座谈、测验、发放问

18、卷;用普遍调查、抽样调查。 调查结果:一般要编制相应的调查表 统计与分析:在人群中随机抽样调查并计算发病率;在患者家系调查并判断遗传方式,实验十四 调查常见的人类遗传病,方法步骤:可以以小组为单位开展调查工作。 其程序是: 组织问题调查小组确定课题分头调查研究撰写调查报告汇报交流调查结果,注意事项: (1)调查时,最好选取群体中发病率较高的单基因遗传病,如红绿色盲、白化病、高度近视(600度以上)等 (2)为保证调查的群体足够大,小组调查的数据,应在班级和年级中进行汇总,某校生物兴趣小组对该校O6、O7、O8级学生中红绿色盲的发病情况开展调查。请你设计一个表格,记录调查情况,某遗传病的发病率

19、= 某种遗传病的患病人数某种遗传病的被调查人数100,调查结果往往与实际水平有一定的差距,要想缩小与实际水平的差距,在调查时应采取哪些措施,随机性调查,调查的群体足够大,统计患者的性别比例: 若患者男性多于女性,则w基因位于X染色体上; 若患者男性与女性差不多,则w基因位于常染色体上; 若患者全是男性,则w基因位于Y染色体上,某人患w遗传病,不知控制w遗传病的基因在染色体上的位置,请你设计一个简单的调查方案进行调查,并预测调查结果。(说明:w遗传病为单基因控制的隐性遗传病,实验十五 探究植物生长调节剂对扦插枝条生根的作用 实验原理:植物插条经植物生长调节剂处理后,对植物插条的生根情况有很大的影

20、响,而且用不同浓度、不同时间处理其影响程度亦不同。其影响存在一个最适浓度,在此浓度下植物插条的生根数量最多,生长最快。 方法步骤: 1.选择生长素类似物:2,4-D或-萘乙酸(NAA)等。 2.配制生长素类似物母液:6mg/mL(用蒸馏水配制,加少许无水乙醇以促进溶解)。 3.设置生长素类似物的浓度梯度:将母液分别配成2、3、4、5 、 6mg/mL的溶液,贴上相应标签,4选择插条:以1年或2年生苗木为最好(形成层细胞分裂能力强、发育快、易成活) 5处理插条:枝条的形态学上端为平面,下端要削成斜面,这样在扦插后可增加吸收水分的面积,促进成活。每一枝条留3或4个芽,芽数尽量一样多。 处理方法:1

21、)浸泡法:把插条的基部浸泡在配制好的溶液中。2)沾蘸法:把插条基部在浓度较高的药液中蘸一下(约5s,6.进行实验:将处理过的插条下端浸在清水中,注意保持温度(2530 )。 7.小组分工,观察记录:每天都要观察记录各小组实验材料的生根情况。自行设计记录表格,记录用不同浓度生长素类似物处理后枝条生根情况,如生根条数,根的长度等,记录表格,注:可先设计一组梯度比较大的预实验进行摸索,再在预实验的基础上设计细致的实验,十六、 模拟尿糖的检测,实验原理,葡萄糖试纸是一种酶试纸,由葡萄糖氧化酶、过氧化氢酶和某种无色的化合物固定于滤纸上制成。当尿液滴加到酶试纸上时,尿液中的葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化作用下

22、生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在酶的催化作用下形成水和原子氧,原子氧可以将试纸上无色的化合物氧化成有色化合物,使试纸呈现特定的颜色,再与标准比色卡比较,即可判断尿样中葡萄糖的含量,葡萄糖,葡萄糖氧化酶,葡萄糖酸+H2O2,过氧化氢酶,H2O+O,无色化合物+O 有色化合物,H2O2,方法步骤: (1)将5个分别装有水、葡萄糖溶液、三份模拟“尿样”的滴瓶和5条葡萄糖试纸分别对应做好标记,并在记录本上设计好记录表格。 (2)分别用滴管从5个滴瓶中吸取溶液,在对应的葡萄糖试纸上各滴加2滴。 (3)观察试纸的颜色变化并与试纸包装上的不同尿糖浓度比色,以确定尿糖的含量。 (4)结果以“+”表示,人体内

23、的血糖浓度总是维持在一个适当的水平。当血糖代谢失去平衡时,人体就会患低血糖病或糖尿病。某学校的学生兴趣小组作了以下的模拟尿糖的检测实验和问题讨论,请根据以下材料完成相关的内容: (1)实验材料:试管,试管架,滴管,清水,葡萄糖溶液,蛋白质溶液,葡萄糖试纸(遇葡萄糖会出现一定的颜色),模拟的尿液样本甲、乙两份。 (2)实验目的,用葡萄糖试纸检测尿液中是否存在葡萄糖,3)实验步骤 取 支试管,分别编号,并放在试管架上。 在上述试管中 。 将葡萄糖试纸放到干净的纸巾上。 然后用一支干净的滴管,从1号试管中吸取等量液体滴2滴在葡萄糖试纸上。 。 。 将5张试纸进行比较分析,得出实验结论,5,15号分别

24、加入等量的清水、葡萄糖溶液、蛋白质溶液、甲尿液、乙尿液,观察和记录葡萄糖试纸的颜色变化,重复步骤,用葡萄糖试纸测试另外4种溶液,每次记录测试纸的颜色变化,4)问题讨论: 某同学实验所得的5张试纸的现象没有很大区别,最可能的原因是什么? 。 仅凭尿液样本还不能断定某人患糖尿病,应该怎样进行进一步确诊? 。 除了用葡萄糖试纸检验糖尿病病人的尿液中含有葡萄糖外,还可以用什么方法,可能是用同一支滴管取液体样本,可以检测血液中胰岛素的浓度,斐林试剂水浴加热出现砖红色沉淀,实验原理: 1在含糖的液体培养基(培养液)中酵母菌繁殖很快,迅速形成一个封闭容器内的酵母菌种群,通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。 2养分、温度、空间和有毒排泄物等是影响种群数量持续增长的限制因素,实验十七 探究培养液中酵母菌数量的动态变化,1934年高斯把5个大草履虫置于0.5mL的培养液中,每隔24小时统计1次数据,

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