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文档简介
1、名校名 推荐专题五课题 3血红蛋白的提取和分离1凝胶色谱法是根据什么原理分离蛋白质的()a 分子的大小b相对分子质量的大小c带电荷的多少d溶解度2缓冲液的作用是:在一定范围内,抵制外界的影响来维持()基本不变。a 温度b phc渗透压d氧气浓度3电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷()的电极移动a 相同b相反c相对d相向4为防止血液凝固,在采血容器中要预先加入抗凝血剂()a naclb甲苯c蒸馏水d柠檬酸钠5将搅拌好的混合液转移到离心管中,离心后, 可以明显看到试管中的溶液分为4 层,其中第 2 层是 ()a 无色透明的甲苯层b脂溶性物质的沉淀层c血红蛋白的水溶液d其他杂质的暗红色沉
2、淀物6蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述中,不正确的是()a 根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性,可将样品中各种不同的蛋白质分离b根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等,可通过电泳分离蛋白质c根据蛋白质相对分子质量的大小,可通过凝胶色谱法分离蛋白质d根据蛋白质的分子大小、密度不同,可通过离心沉降法分离蛋白质7下列叙述中,不正确的是()a 蛋白质所带的电荷数越多,移动得越快b蛋白质所带的电荷数越少,移动得越快c电荷数相同时,颗粒越大,移动越慢d电荷数相同时,颗粒越小,移动越快1名校名 推荐8对凝胶电泳的相关认识错误的是()a 蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决
3、于分子的大小b蛋白质在sds 聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率完全取决于分子的大小csds 聚丙烯酰胺凝胶电泳不仅用于蛋白质相对分子质量的测定,还可用于蛋白质混合组分的分离d凝胶中加入sds 可以消除静电荷对迁移率的影响9 (双选 )下列关于dna 和蛋白质提取与分离实验的叙述,正确的有()a 提取细胞中的dna 和蛋白质都需用蒸馏水涨破细胞b用不同浓度nacl 溶液反复溶解与析出dna 可去除蛋白质c蛋白质提取和分离过程中进行透析可去除溶液中的dnad蛋白质和dna 都可以用电泳的方法进行分离纯化10 电 泳 利 用 了 待 分 离 样 品 中 各 种 分 子 的 _ 以 及_ 、_ 的不同,使
4、带电分子产生不同的迁移速率,从而实现样品中各种分子的分离。11图 53 表示血红蛋白提取和分离的部分实验装置,请回答下列问题:图 5 3(1) 血红蛋白的提取和分离一般分四步:_、粗分离、纯化和 _ 。收 集 的 血 红 蛋 白 溶 液 在 透 析 袋 中 透 析 , 这 就 是 样 品 的 粗 分 离 , 透 析 的 目 的 是_,透析的原理是_ 。(2)甲图装置中,b 是血红蛋白溶液,则a 是 _ ;乙装置中,c 溶液的作用是 _ 。(3) 乙 图 装 置 分 离 蛋 白 质 的 方 法 叫 _ , 是 根 据_ 分离蛋白质的有效方法。(4) 用乙装置分离血红蛋白时,待 _ 接近色谱柱底端
5、时,用试管收集流出液,每 5 ml 收集一管,连续收集。2名校名 推荐12在装填凝胶柱时,不能有气泡存在的原因是()a 气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分离效果b气泡阻碍蛋白质的运动c气泡与蛋白质发生化学反应d气泡在装填凝胶的时候,使凝胶不紧密13有关样品的加入和洗脱的叙述正确的是()a 先加入1 ml 透析后的样品b加样前要使缓冲液缓慢下降至全部流出c如果红色区带均匀一致地移动,说明色谱柱制作成功d洗脱时可以用缓冲液也可以用清水14加有少量柠檬酸钠的猪血分装于试管中,随后依次加入0.3%、0.9% 和 1.5%的氯化钠溶液稀释,30 分钟后离心。下列叙述正确的是()a 和试管的上清液
6、中有血红蛋白,沉淀中都有红细胞b和试管的上清液呈淡黄色,沉淀中均有皱缩的红细胞c和试管的沉淀中分别有红细胞的碎片和皱缩的红细胞d和试管的上清液是血清15蛋白质的提取与分离分为哪几步()a 样品处理、凝胶色谱操作、sds聚丙烯酰胺凝胶电泳b样品处理、凝胶色谱操作、纯化c样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定d样品处理、纯化、粗分离、纯度鉴定16凝胶色谱技术是一种快速而又简单的分离技术,由于设备简单, 操作方便, 不需要有机溶剂, 对高分子物质有很高的分离效果,目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫以及医学有关领域广泛应用,不但应用于科学实验研究,而且已经大规模地应用于工业生产。据图5 4
7、 回答问题:图 5 4(1)a 、 b 均 为 蛋 白 质 分 子 , 其 中 先 从 层 析 柱 中 洗 脱 出 来 的 是 _ , 原 因 是_3名校名 推荐_ 。(2) 自 己 制 作 凝 胶 色 谱 柱 时 , 在 色 谱 柱 底 部 d 位 置 相 当 于 多 孔 板 的 结 构 可 由_ 代替。(3) 装 填 凝 胶 色 谱 柱 时 , 色 谱 柱 内 不 能 有 气 泡 存 在 , 原 因 是_ 。(4)洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体_(填“相同”或“不同”),洗脱时,对洗脱液的流速要求是_ 。课题 3血红蛋白的提取和分离课时达标1 b2.b3.b4.d5.b6a解析:蛋
8、白质分离主要根据五种原理:分子大小、 溶解度、 电荷、 吸附性质、对配体分子的生物学亲和力等。透析是利用蛋白质分子不能通过半透膜的性质,使蛋白质和其他小分子物质分开。7 b8a解析:蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率不仅取决于分子相对分子量的大小,还与所带电荷量、大分子的形状等有关。当凝胶中加入sds,则可以消除静电荷对迁移率的影响, 因此, sds聚丙烯酰胺凝胶电泳中的迁移率取决于分子相对分子量的大小,它不仅用于蛋白质相对分子质量的测定,还可用于蛋白质混合组分的分离。9 bd解析: a 选项,在提取dna时,如果是用动物的细胞需要用蒸馏水涨破,如果用植物细胞则不需要,而是用洗涤剂溶解细胞膜
9、;用2 mol/l的 nacl 溶液溶解dna,然后过滤出蛋白质, 再降低 nacl 溶液的浓度, 析出 dna。dna和蛋白质样品都是带负电荷的,从负极向正极移动,移动的距离都和样品的分子量有关。c 中透析用以除去小分子物质,dna是大分子物质。10带电性质的差异分子本身的大小形状11(1) 样品处理纯度鉴定去除相对分子质量较小的杂质透析袋能使小分子自由进出,而大分子则保留在袋内(2) 磷酸缓冲液洗脱血红蛋白4名校名 推荐(3) 凝胶色谱法相对分子质量的大小(4) 红色的蛋白质12 a13c解析:样品加入和洗脱过程中,加样前,先打开色谱柱下端的流出口;待缓冲液下降到与凝胶面平齐,关闭出口;加样后, 打开出口,待样品完全进入凝胶层后,关闭出口;连接好缓冲液洗脱瓶后,再打开下端出口,进行洗脱。洗脱时用缓冲液,不能用清水,如果红色区带均匀一致地移动,说明色谱柱制作成功。14c解析:加有少量柠檬酸钠的猪血分装于试管中,加入0.3%氯化钠溶液的细胞吸水涨破;0.9%氯化钠溶液与细胞
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